| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-18页 |
| 英文缩略语 | 第18-20页 |
| 第1章 文献综述 | 第20-46页 |
| ·昆虫气味信号传导过程 | 第20-23页 |
| ·周缘神经过程 | 第20-22页 |
| ·中枢神经过程 | 第22-23页 |
| ·昆虫气味结合蛋白的研究进展 | 第23-35页 |
| ·气味结合蛋白的数量和分类 | 第23-25页 |
| ·气味结合蛋白分子特征及其对气味分子的结合和释放机制 | 第25-32页 |
| ·气味结合蛋白体外配体结合实验及体内功能研究 | 第32-34页 |
| ·气味结合蛋白生理功能 | 第34-35页 |
| ·昆虫气味降解酶的研究进展 | 第35-42页 |
| ·气味降解酶的分类 | 第36页 |
| ·触角淋巴液中可溶性酶 | 第36-39页 |
| ·触角淋巴液中膜结合酶 | 第39页 |
| ·胞内酶 | 第39-41页 |
| ·表皮酶 | 第41-42页 |
| ·昆虫酯酶分类及羧酸/胆碱酯酶作用机理 | 第42-44页 |
| ·分类 | 第42-43页 |
| ·羧酸/胆碱酯酶作用机理 | 第43-44页 |
| ·本研究目的与意义 | 第44-46页 |
| 第2章 甜菜夜蛾触角酯酶基因的克隆、序列分析和表达谱研究 | 第46-68页 |
| 摘要 | 第46-47页 |
| ·材料与方法 | 第47-55页 |
| ·供试材料及材料收集 | 第47页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第47-48页 |
| ·昆虫核酸提取 | 第48页 |
| ·DNA第一链的合成 | 第48-49页 |
| ·甜菜夜蛾转录组CXE同源搜索及引物设计 | 第49-52页 |
| ·PCR扩增 | 第52-53页 |
| ·RACE技术扩增CXE基因的cDNA全序列 | 第53页 |
| ·PCR产物纯化、克隆和测序 | 第53-54页 |
| ·甜菜夜蛾CXE基因的定量分析 | 第54-55页 |
| ·结果与分析 | 第55-65页 |
| ·甜菜夜蛾CXE基因cDNA片段的获得 | 第55-56页 |
| ·甜菜夜蛾CXE基因cDNA全长及基因组DNA的克隆与分析 | 第56-61页 |
| ·荧光定量PCR产物熔解曲线分析 | 第61-63页 |
| ·甜菜夜蛾CXE基因的组织表达谱 | 第63-64页 |
| ·甜菜夜蛾CXE基因表达的日动态 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-68页 |
| 第3章 斜纹夜蛾触角酯酶基因的克隆、序列分析和表达谱研究 | 第68-84页 |
| 摘要 | 第68-69页 |
| ·材料与方法 | 第69-72页 |
| ·供试材料及材料收集 | 第69页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第69页 |
| ·昆虫核酸提取 | 第69页 |
| ·DNA第一链的合成 | 第69页 |
| ·PCR引物设计 | 第69页 |
| ·PCR扩增 | 第69页 |
| ·RACE技术扩增CXE基因的cDNA全序列 | 第69-71页 |
| ·PCR产物纯化、克隆和测序 | 第71页 |
| ·斜纹夜蛾CXE基因系统发育分析 | 第71-72页 |
| ·斜纹夜蛾CXE基因的定量分析 | 第72页 |
| ·结果与分析 | 第72-81页 |
| ·斜纹夜蛾CXE基因cDNA片段的克隆与分析 | 第72-73页 |
| ·斜纹夜蛾CXE基因cDNA全长及基因组DNA的克隆与分析 | 第73-77页 |
| ·斜纹夜蛾和甜菜夜蛾CXE系统发育分析 | 第77-78页 |
| ·荧光定量PCR产物熔解曲线分析 | 第78页 |
| ·斜纹夜蛾CXE基因的组织表达谱 | 第78-80页 |
| ·斜纹夜蛾CXE基因表达的日动态 | 第80-81页 |
| ·讨论 | 第81-84页 |
| 第4章 甜菜夜蛾和斜纹夜蛾触角酯酶的体外表达及蛋白纯化 | 第84-98页 |
| 摘要 | 第84-85页 |
| ·材料与方法 | 第85-86页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第85-86页 |
| ·甜菜夜蛾和斜纹夜蛾CXE基因真核表达供体质粒构建 | 第86-93页 |
| ·引物设计 | 第86-88页 |
| ·PCR扩增 | 第88页 |
| ·PCR纯化产物纯化、克隆、测序 | 第88页 |
| ·双酶切、连接、转化测序 | 第88页 |
| ·重组杆状病毒质粒的构建 | 第88-89页 |
| ·昆虫细胞的培养 | 第89页 |
| ·重组病毒Bacmid DNA对昆虫细胞的的转染及感染 | 第89-90页 |
| ·SDS-PAGE及Western杂交 | 第90-91页 |
| ·重组酯酶的Native-PAGE鉴定 | 第91-92页 |
| ·酯酶亲和纯化及超滤浓缩 | 第92-93页 |
| ·结果与分析 | 第93-97页 |
| ·重组杆状病毒Bacmid的获得 | 第93-94页 |
| ·High-Five细胞被重组Bacmid感染后症状 | 第94页 |
| ·Western杂交检测 | 第94-95页 |
| ·CXE的α/β-乙酸萘酯的活性染色检测 | 第95-96页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第96-97页 |
| ·讨论 | 第97-98页 |
| 第5章 甜菜夜蛾和斜纹夜蛾触角酯酶的动力学参数测定 | 第98-118页 |
| 摘要 | 第98-99页 |
| ·材料与方法 | 第99-103页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第99-101页 |
| ·CXE对人工底物α-NA相对酶活力测定 | 第101-102页 |
| ·CXE对天然酯类物质降解百分率测定 | 第102页 |
| ·纯化的重组酯酶对天然酯类物质酶动力学测定 | 第102页 |
| ·SexiCXE14对信息素混合物降解偏好性测定 | 第102页 |
| ·不同pH条件下酶活力测定 | 第102-103页 |
| ·结果与分析 | 第103-114页 |
| ·CXE对α-NA的相对酶活力 | 第103-106页 |
| ·CXE对不同酯类物质的降解活性 | 第106-108页 |
| ·纯化重组酯酶的酶动力学参数 | 第108-112页 |
| ·SexiCXE14对混合物中不同组分的偏好性 | 第112-113页 |
| ·pH对酶活力的影响 | 第113-114页 |
| ·讨论 | 第114-118页 |
| 第6章 利用表达序列标签对褐飞虱等昆虫气味结合蛋白基因的预测及验证 | 第118-128页 |
| 摘要 | 第118-119页 |
| ·材料与方法 | 第119-124页 |
| ·供试材料及材料收集 | 第119页 |
| ·生物信息预测流程 | 第119-120页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第120-121页 |
| ·昆虫核酸提取 | 第121页 |
| ·DNA第一链的合成 | 第121页 |
| ·PCR引物设计及Genbank登录号 | 第121页 |
| ·PCR扩增 | 第121页 |
| ·PCR产物纯化、克隆和测序 | 第121-124页 |
| ·结果与分析 | 第124-126页 |
| ·昆虫EST中的OBP预测 | 第124-126页 |
| ·预测的OBP基因的PCR验证 | 第126页 |
| ·讨论 | 第126-128页 |
| 第7章 褐飞虱气味结合蛋白的序列分析及表达谱研究 | 第128-138页 |
| 摘要 | 第128页 |
| ·材料与方法 | 第128-131页 |
| ·供试昆虫及材料收集 | 第129页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第129页 |
| ·昆虫核酸提取 | 第129页 |
| ·DNA第一链的合成 | 第129页 |
| ·PCR引物设计 | 第129页 |
| ·RACE技术扩增OBP基因的cDNA全序列 | 第129页 |
| ·PCR产物纯化、克隆和测序 | 第129-130页 |
| ·褐飞虱OBP基因的表达谱分析 | 第130-131页 |
| ·数据统计分析 | 第131页 |
| ·结果与分析 | 第131-137页 |
| ·褐飞虱OBP基因cDNA全长克隆与分析 | 第131页 |
| ·qPCR产物的熔解曲线和扩增效率分析 | 第131-133页 |
| ·褐飞虱OBP基因表达谱的分析 | 第133-137页 |
| ·讨论 | 第137-138页 |
| 第8章 褐飞虱气味结合蛋白的功能研究 | 第138-154页 |
| 摘要 | 第138-139页 |
| ·材料与方法 | 第139-146页 |
| ·供试材料及材料收集 | 第139页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第139页 |
| ·昆虫核酸提取 | 第139页 |
| ·DNA第一链的合成 | 第139页 |
| ·PCR引物设计 | 第139-140页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第140页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第140-141页 |
| ·SDS-PAGE电泳分析 | 第141页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第141-142页 |
| ·褐飞虱OBP和气味物质的体外结合实验 | 第142-143页 |
| ·dsRNA合成 | 第143-144页 |
| ·dsRNA喂食实验及qPCR检测 | 第144页 |
| ·“H”管双向选择生物测定 | 第144-145页 |
| ·数据统计分析 | 第145-146页 |
| ·结果与分析 | 第146-152页 |
| ·褐飞虱OBPs体外表达和纯化 | 第146页 |
| ·褐飞虱OBPs与气味物质结合能力 | 第146-150页 |
| ·褐飞虱OBP3活体功能研究 | 第150-152页 |
| ·讨论 | 第152-154页 |
| 全文总结 | 第154-156页 |
| 参考文献 | 第156-172页 |
| 附录：攻读博士学位期间学术论文的发表及参加学术会议 | 第172-174页 |
| 致谢 | 第174页 |
