| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-16页 |
| ·Notch 信号途径 | 第12-13页 |
| ·Notch 信号途径的研究 | 第13页 |
| ·Notch 相关的 E(spl) bHLH 基因 | 第13页 |
| ·E(spl)mγ蛋白 | 第13-14页 |
| ·E(spl)mγ蛋白相关研究 | 第14-16页 |
| 第二章 实验方案设计 | 第16-19页 |
| ·研究目的和意义 | 第16页 |
| ·研究内容 | 第16页 |
| ·实验流程 | 第16-17页 |
| ·Bmmγ原核表达及抗体制备 | 第16-17页 |
| ·Bmmγ在家蚕中的转录水平和翻译水平分析 | 第17页 |
| ·与 Notch 信号途径相关的功能研究 | 第17页 |
| ·流程图 | 第17-19页 |
| ·Bmmγ基因的原核表达与表达分析 | 第17页 |
| ·与 Notch 信号途径相关的功能研究 | 第17-19页 |
| 第三章 生物信息学分析 | 第19-26页 |
| ·生物信息数据库与软件 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-20页 |
| ·结果 | 第20-25页 |
| ·Bmmγ基因的序列 | 第20-21页 |
| ·疏水性分析 | 第21页 |
| ·跨膜分析 | 第21-22页 |
| ·信号肽分析 | 第22页 |
| ·Bmmγ蛋白二级结构预测 | 第22-23页 |
| ·Bmmγ蛋白三级结构的预测 | 第23页 |
| ·Bmmγ蛋白亚细胞定位 | 第23-24页 |
| ·Bmmγ基因氨基酸序列的同源性分析 | 第24页 |
| ·Bmmγ基因进化树的构建 | 第24-25页 |
| ·讨论 | 第25-26页 |
| 第四章 Bmmγ的原核表达与抗体制备 | 第26-43页 |
| ·材料与试剂 | 第26-29页 |
| ·材料 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·主要试剂的配制 | 第26-29页 |
| ·方法 | 第29-37页 |
| ·Bmmγ基因的克隆 | 第29-32页 |
| ·Bmmγ的表达 | 第32-34页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第34-35页 |
| ·抗体的制备 | 第35-36页 |
| ·抗原的制备 | 第36页 |
| ·免疫动物 | 第36页 |
| ·采血制备抗体 | 第36-37页 |
| ·多克隆抗血清的 Western blot 鉴定 | 第37页 |
| ·多克隆抗血清的效价测定 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-41页 |
| ·家蚕蛹总 RNA 电泳 | 第37页 |
| ·RT-PCR 扩增和 pMD19-T-Bmmγ重组质粒双酶切鉴定 | 第37-38页 |
| ·pET-28a-Bmmγ双酶切鉴定 | 第38页 |
| ·pET-28a-Bmmγ的表达及纯化 | 第38-39页 |
| ·Bmmγ蛋白的 Western blot 鉴定 | 第39-40页 |
| ·测定多克隆抗体效价 | 第40-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| 第五章 Bmmγ的表达分析 | 第43-58页 |
| ·材料与试剂 | 第43-45页 |
| ·材料 | 第43页 |
| ·试剂 | 第43页 |
| ·主要试剂的配制 | 第43-45页 |
| ·方法 | 第45-49页 |
| ·提取家蚕各个时期、各个组织的总 RNA | 第45页 |
| ·荧光定量 PCR | 第45页 |
| ·荧光定量 PCR | 第45-46页 |
| ·荧光定量 PCR 结果分析 | 第46页 |
| ·家蚕蛋白的提取以及电泳检测 | 第46-47页 |
| ·Bmmγ蛋白表达量分析 | 第47-48页 |
| ·家蚕冰冻切片的制作 | 第48页 |
| ·免疫组织 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-55页 |
| ·各时期 Bmmγ基因转录状况 | 第49-50页 |
| ·Bmmγ蛋白在家蚕发育各时期中的表达 | 第50-51页 |
| ·幼虫各组织中 Bmmγ基因转录状况 | 第51-53页 |
| ·Bmmγ蛋白在五龄幼虫各组织中的表达 | 第53页 |
| ·Bmmγ蛋白在蛾各部位中的表达 | 第53-54页 |
| ·Bmmγ在五龄幼虫中的定位 | 第54页 |
| ·Bmmγ在蛹中的定位 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-58页 |
| 第六章 亚细胞定位 | 第58-61页 |
| ·材料与试剂 | 第58-59页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·试剂 | 第58页 |
| ·试剂的配制 | 第58-59页 |
| ·方法 | 第59页 |
| ·结果 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-61页 |
| 第七章 与 Notch 信号途径相关的研究 | 第61-69页 |
| ·材料与试剂 | 第61-62页 |
| ·材料 | 第61页 |
| ·试剂与仪器 | 第61页 |
| ·主要试剂的配制 | 第61-62页 |
| ·方法 | 第62-64页 |
| ·BmN 细胞复苏 | 第62页 |
| ·BmN 细胞的传代培养 | 第62-63页 |
| ·不同浓度 DAPT 处理 BmN 细胞 | 第63页 |
| ·不同时间 DAPT 处理 | 第63页 |
| ·细胞 RNA 的提取与逆转录反应 | 第63页 |
| ·荧光定量 PCR | 第63-64页 |
| ·结果 | 第64-67页 |
| ·不同浓度 DAPT 进行阻断 | 第64-65页 |
| ·不同时间阻断后 Bmmγ基因转录水平 | 第65-67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74页 |