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拟南芥初生壁CesA在光暗条件下表达与功能分析

缩略语表(Abbreviations)第1-8页
摘要第8-9页
Abstract第9-10页
1 文献综述第10-31页
   ·植物细胞壁的研究进展第10-12页
     ·植物细胞壁的分层与形成第10-11页
     ·植物细胞壁的化学组成第11-12页
   ·植物纤维素生物合成的研究进展第12-14页
     ·纤维素的作用及结构第12-13页
     ·纤维素生物合成研究进展第13-14页
   ·植物纤维素合酶第14-19页
     ·植物纤维素合酶基因的发现第14-15页
     ·纤维素合酶基因的结构第15-16页
     ·纤维素合酶基因的功能第16-18页
     ·拟南芥纤维素合酶基因的表达与调控第18-19页
   ·本研究的目的与意义第19-20页
   ·实验材料第20页
   ·实验方法第20-31页
     ·拟南芥的种植第20页
     ·AtCesA6的T-DNA突变体的鉴定及特性分析第20-24页
       ·"双引物法"鉴定引物的设计第20页
       ·拟南芥叶片总DNA的提取第20-21页
       ·T-DNA突变体PCR鉴定的条件第21页
       ·拟南芥叶片总RNA的提取第21-22页
       ·第一链cDNA的合成第22页
       ·PCR反应第22-23页
       ·PCR产物的胶回收第23页
       ·目的片段与pMD-18T的连接第23页
       ·重组质粒的转化第23-24页
       ·目的片段的测序第24页
     ·AtCesA6基因在细胞壁合成中的作用第24-27页
       ·GUS染色第24页
       ·形态观察第24页
       ·AtCesAs的荧光定量PCR第24-25页
       ·基因表达差异的分析方法第25页
       ·细胞壁成分测定第25-27页
       ·CGA325'615和DCB处理突变体Atcesa6第27页
     ·AtCesAs基因超表达体系的建立第27-31页
       ·AtCesA1、AtCesA2和AtCesA5基因的双元载体的构建第27-29页
       ·农杆菌介导法转化拟南芥植株第29-30页
       ·转AtCesAs基因拟南芥种子的抗性筛选第30页
       ·抗性筛选转目的基因拟南芥的鉴定第30-31页
3 结果与分析第31-46页
   ·突变体Atcesa6(salk_004587)的纯合鉴定第31-32页
   ·突变体Atcesa6(salk_004587)转录通读发现及验证第32-35页
     ·不同生育期Atcesa6的RT-PCR第32页
     ·转录通读现象的验证第32-35页
   ·光暗处理的GUS染色第35-36页
   ·光暗处理的拟南芥形态观察第36-37页
   ·初生壁纤维素合酶基因的表达第37-38页
   ·光暗处理细胞壁成分的测定第38-40页
   ·CGA325'615和DCB处理突变体Atcesa6第40-41页
   ·超表达载体构建第41-46页
     ·目的基因的PCR扩增第41-42页
     ·表达载体图谱及限制性酶切检测第42-43页
     ·pD1301s-AtCesAs Top10阳性克隆的检测第43-44页
     ·农杆菌EHA105阳性克隆的PCR检测第44页
     ·转基因拟南芥阳性苗的检测第44-46页
4 讨论第46-49页
   ·转录通读现象第46页
   ·AtCesA6基因在初生壁合成中的作用第46-48页
   ·超量表达研究初生壁相关基因功能第48-49页
参考文献第49-56页
附录第56-60页
致谢第60页

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