| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-21页 |
| 1 土壤镉污染的治理方法 | 第10-13页 |
| ·物理修复 | 第10-11页 |
| ·化学修复 | 第11页 |
| ·生物修复 | 第11-13页 |
| 2 微生物细胞表面展示技术 | 第13-17页 |
| ·应用于环境治理的细菌表面展示系统的构成 | 第14-15页 |
| ·运载蛋白(Carrier protein) | 第14-15页 |
| ·靶蛋白(Target protein) | 第15页 |
| ·利用假单胞菌冰核蛋白作为运载蛋白的细胞表面展示体系 | 第15-17页 |
| ·冰晶核蛋白(Ice Nucleation Protein) | 第15-16页 |
| ·冰晶核蛋白展示系统在环境方面的应用 | 第16-17页 |
| 3 金属硫蛋白的研究进展 | 第17-20页 |
| ·金属硫蛋白的分类 | 第17-19页 |
| ·动物细胞金属硫蛋白 | 第17-18页 |
| ·植物细胞金属硫蛋白 | 第18页 |
| ·微生物细胞金属硫蛋白 | 第18-19页 |
| ·金属硫蛋白的应用 | 第19-20页 |
| 4 研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 材料和方法 | 第21-35页 |
| 1 实验材料 | 第21-25页 |
| ·菌株与质粒 | 第21页 |
| ·酶和试剂盒 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21-24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-35页 |
| ·菌株培养 | 第25页 |
| ·猴金属硫蛋白α四聚体4MTα的原核表达和纯化 | 第25-27页 |
| ·猴金属硫蛋白α四聚体4MTα的诱导表达 | 第25-26页 |
| ·GST-4MTα融合蛋白质纯化方法 | 第26-27页 |
| ·融合蛋白质GST-4MTα的理化性质检测 | 第27页 |
| ·DTNB实验 | 第27页 |
| ·牛血红蛋白饱和法测定融合蛋白质GST-4MTα结合Cd~(2+)的能力 | 第27页 |
| ·表面展示重组质粒pIME的构建 | 第27-31页 |
| ·恶臭假单胞菌的三亲本杂交 | 第31页 |
| ·恶臭假单胞菌X4的细胞分级分离 | 第31页 |
| ·绿色荧光蛋白(EGFP)荧光强度(FSU)的检测 | 第31-32页 |
| ·工程菌融合蛋白质的诱导表达及SDS-PAGE电泳 | 第32-33页 |
| ·Western-blot分析 | 第33页 |
| ·工程菌的镉抗性检测 | 第33页 |
| ·工程菌的重金属吸附实验 | 第33-35页 |
| ·工程菌对镉吸附量的测定 | 第33-34页 |
| ·pH值对工程菌镉吸附能力的影响 | 第34页 |
| ·Cu~(2+)和Zn~(2+)离子对工程菌吸附Cd~(2+)离子的影响 | 第34-35页 |
| 结果与分析 | 第35-51页 |
| 1 猴金属硫蛋白α四聚体融合蛋白质GST-4MTα的表达、纯化和镉吸附量 | 第35-38页 |
| ·GST-4MTα融合蛋白质的表达和纯化结果 | 第35-36页 |
| ·DTNB实验分析结果 | 第36页 |
| ·4MTα突变蛋白Cd~(2+)吸附能力检测 | 第36-38页 |
| 2 恶臭假单胞菌X4的性质 | 第38页 |
| 3 恶臭假单胞菌表面展示载体的构建及功能鉴定 | 第38-46页 |
| ·含融合基因inp-4mtα-egfp的重组质粒pIME的构建 | 第38-39页 |
| ·pIME质粒三亲本杂交转入恶臭假单胞菌X4 | 第39页 |
| ·融合蛋白质INP-4MTα-EGFP在重组菌的表达及表面活性 | 第39-44页 |
| ·融合蛋白质INP-4MTα-EGFP在重组菌的培养和诱导表达 | 第39-40页 |
| ·融合蛋白质INP-4MTα-EGFP在重组菌的表面活性测定 | 第40-44页 |
| ·恶臭假单胞菌X4-1的荧光活性检测 | 第44-46页 |
| 4 工程菌对镉的吸附能力 | 第46-51页 |
| ·工程菌X4-1的Cd~(2+)耐受性 | 第46页 |
| ·工程菌X4-1对Cd~(2+)吸附能力 | 第46-51页 |
| 讨论 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
