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Xanthomonas gardneri抗铜基因copB的克隆及功能鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
1 绪论第12-27页
   ·辣椒-番茄细菌性疮痂病概述第12-19页
     ·病原及发病症状第12-13页
     ·寄主植物第13-14页
     ·分类地位第14-15页
     ·病原菌的生理专化第15-17页
     ·侵染循环与流行规律第17页
     ·防治技术第17-19页
       ·栽培防治第17-18页
       ·化学防治第18页
       ·生物防治第18-19页
   ·植物相关细菌铜抗性研究进展第19-25页
     ·铜的生理作用及毒性第19-20页
       ·铜对植物的毒害第19页
       ·铜对植物相关细菌的毒害第19-20页
     ·抗铜基因在植物相关细菌中的分布第20-21页
       ·抗铜基因在植物病原细菌中的分布第20页
       ·抗铜基因在植物促生细菌中的分布第20-21页
     ·植物相关细菌抗铜机制第21-23页
       ·丁香假单孢菌(Pseudomonas syringe)的Cop系统第21-22页
       ·地氆草黄单胞杆菌相■橘致病变种(Xanthomonas axonopodis pv.c/7n )cop系统第22页
       ·辣椒、番茄疮痂病菌(Xanthomonas campestrispv. vesicatoria)的cop系统第22-23页
       ·苜蓿根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)的pco系统第23页
     ·植物相关细菌铜抗性与动植物关系第23-24页
       ·植物相关细菌抗铜基因与致病性关系第23页
       ·植物相关细菌抗铜基因与促生性关系第23-24页
     ·植物相关细菌铜抗性的应用第24-25页
     ·植物相关细菌铜抗性研究概况与前景第25页
   ·本研究的目的意义及技术路线第25-27页
     ·研究目的和意义第25-26页
     ·技术路线第26-27页
2 材料和方法第27-37页
   ·实验材料第27-28页
     ·菌株和质粒第27页
     ·生化试剂第27页
     ·培养基和菌株培养条件第27-28页
   ·实验方法第28-37页
     ·Xv10抗铜性实验第28页
     ·构建突变体菌株第28-34页
       ·copB基因组DNA制备第28-29页
       ·copB基因的扩增与纯化第29-30页
       ·copB基因与pMD18-T的连接与转化第30页
       ·对含有copB-T的Ecoli提质粒第30-31页
       ·copB-T与pK18mobsacB的双酶切、连接与转化第31-32页
       ·pBBR1MCS-5质粒DNA提取第32页
       ·抗庆大基因Gm扩增、与pMD18-T载体的连接与转化第32-33页
       ·pKS-copB与Gm-T的双酶切、连接与转化第33-34页
       ·copBXv突变体菌株制备第34页
     ·构建copBXv突变体互补菌株第34-37页
       ·扩增带有启动子的copB基因第34-35页
       ·copB'基因与pMD18-T的连接与转化第35页
       ·copB'-T与pHM1的双酶切第35-36页
       ·copB'-T与pHM1的连接与转化第36页
       ·构建copB突变体互补菌株第36-37页
     ·Xv10野生型、突变体、互补菌株致病性测试第37页
     ·Xv10野生型、突变体、互补菌株的抗铜性实验第37页
     ·Xv10野生型、突变体、互补菌株胞外多糖分泌的检测第37页
3 结果与分析第37-45页
   ·硫酸铜敏感性分析第37-38页
   ·Xv10在200μg/ml硫酸铜YDC平板上生长情况第38页
   ·Xv10基因组DNA制备、copB基因克隆结果分析第38-39页
   ·copB-T质粒电泳、双酶切图、凝胶回收图第39页
   ·pK18mobsacB双酶切、pKS-copB质粒、pKS-copB质粒双酶切图第39-40页
   ·构建pKS-copB质粒第40-42页
   ·copBXv基因突变体菌株的构建结果第42页
   ·copBXv基因突变体的互补结果分析第42-44页
   ·Xv10,△copBxv和△copBxv-C致病性测试结果第44页
   ·Xv10,△copBxv和△copBxv-C抗铜性测试结果第44-45页
   ·copBxv突变体胞外多糖分泌检测第45页
4 结论和讨论第45-47页
   ·copB基因的分子鉴定第45页
   ·copB基因与植物致病性关系第45-46页
   ·copB基因与铜抗性关系第46页
   ·copB基因与菌株生理特性关系第46页
   ·讨论第46-47页
参考文献第47-53页
附录第53-54页
致谢第54-55页
作者简历第55页

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