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Cre/loxP定位重组系统在植物雄不育和杂种优势中的利用研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-9页
1. 前言第9-35页
 1.1 研究的目的和意义第9-10页
 1.2 文献综述第10-33页
  1.2.1 Cre/lox位点特异性重组系统及其应用第10-21页
   1.2.1.1 几种位点特异性重组系统第11-13页
   1.2.1.2 Cre/loxP定位重组系统第13-21页
    1.2.1.2.1 Cre重组酶的结构第13-15页
    1.2.1.2.2 loxP位点第15页
    1.2.1.2.3 Cre-loxP的作用模式第15-18页
    1.2.1.2.4 Cre-loxP位点特异性重组系统的应用第18-21页
  1.2.2 转基因植物雄性不育研究进展第21-33页
   1.2.2.1 雄性育性的生物学基础第22-27页
    1.2.2.1.1 花药分化和雄配子形式第22-24页
    1.2.2.1.2 花药发育的分子生物学研究第24-27页
   1.2.2.2 通过转基因途径获得植物雄性不育的方法第27-32页
   1.2.2.3 基因工程雄性不育系的保持第32页
   1.2.2.4 基因工程雄性不育系的恢复第32-33页
 1.3 技术路线第33-35页
2. 材料和方法第35-51页
 2.1 小麦转化材料和方法第35-46页
  2.1.1 植物材料第35页
  2.1.2 菌种和质粒第35页
  2.1.3 分子生物学及生化试剂第35页
  2.1.4 PCR引物第35-36页
  2.1.5 培养基第36-37页
  2.1.6 主要方法第37-38页
  2.1.7 小麦转化表达载体构建的基本方法第38-42页
   2.1.7.1 PCR扩增产物的克隆第38-41页
   2.1.7.2 小麦表达载体的构建流程第41-42页
  2.1.8 小麦外植体制备及基因枪法转化第42-43页
  2.1.9 再生植株的PCR检测第43-44页
  2.1.10 再生植株的Southern印迹分析第44-46页
  2.1.11 转不育基因小麦植株的花粉活力检测第46页
 2.2 烟草转化材料和方法第46-51页
  2.2.1 植物材料第46页
  2.2.2 菌种和质粒第46页
  2.2.3 分子生物学及生化试剂第46页
  2.2.4 PCR引物第46-47页
  2.2.5 烟草组织培养基第47页
  2.2.6 植物表达载体构建的基本方法第47-48页
  2.2.7 烟草的遗传转化及再生第48页
  2.2.8 再生植株的PCR及Southern检测第48-49页
  2.2.9 GUS基因活性的检测第49页
  2.2.10 烟草植株的二次转化及鉴定第49-51页
3. 结果与分析第51-75页
 3.1 解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens barnase基因的克隆第51-52页
 3.2 解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens barstar基因的克隆第52-53页
 3.3 小麦转化及载体构建分析第53-64页
 3.4 烟草载体构建及阳性株的获得与鉴定第64-69页
 3.5 烟草二次转化植株的转化、鉴定及形态学观察第69-75页
4. 讨论第75-80页
 4.1 解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens barnse基因的致死效应第75-76页
 4.2 barnase对农杆菌的致死作用第76页
 4.3 烟草二次转化花器官形态异常分析第76-77页
 4.4 小麦基因枪法转化效率探讨第77页
 4.5 转不育基因小麦的沉默现象第77-78页
 4.6 二次转化烟草植株的花粉活力分析第78-79页
 4.7 二次转化烟草植株的种子萌发率分析第79-80页
5. 结论第80-82页
6. 参考文献第82-94页
7. 致谢第94-99页
附录第99-96页
缩写表第96-97页
溶液配制第97-99页
测序图谱第99-102页
质粒构建流程第102-110页
转化载体鉴定图谱第110-113页

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