| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-9页 |
| 1． 前言 | 第9-35页 |
| 1．1 研究的目的和意义 | 第9-10页 |
| 1．2 文献综述 | 第10-33页 |
| 1．2．1 Cre／lox位点特异性重组系统及其应用 | 第10-21页 |
| 1．2．1．1 几种位点特异性重组系统 | 第11-13页 |
| 1．2．1．2 Cre／loxP定位重组系统 | 第13-21页 |
| 1．2．1．2．1 Cre重组酶的结构 | 第13-15页 |
| 1．2．1．2．2 loxP位点 | 第15页 |
| 1．2．1．2．3 Cre-loxP的作用模式 | 第15-18页 |
| 1．2．1．2．4 Cre-loxP位点特异性重组系统的应用 | 第18-21页 |
| 1．2．2 转基因植物雄性不育研究进展 | 第21-33页 |
| 1．2．2．1 雄性育性的生物学基础 | 第22-27页 |
| 1．2．2．1．1 花药分化和雄配子形式 | 第22-24页 |
| 1．2．2．1．2 花药发育的分子生物学研究 | 第24-27页 |
| 1．2．2．2 通过转基因途径获得植物雄性不育的方法 | 第27-32页 |
| 1．2．2．3 基因工程雄性不育系的保持 | 第32页 |
| 1．2．2．4 基因工程雄性不育系的恢复 | 第32-33页 |
| 1．3 技术路线 | 第33-35页 |
| 2． 材料和方法 | 第35-51页 |
| 2．1 小麦转化材料和方法 | 第35-46页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第35页 |
| 2．1．2 菌种和质粒 | 第35页 |
| 2．1．3 分子生物学及生化试剂 | 第35页 |
| 2．1．4 PCR引物 | 第35-36页 |
| 2．1．5 培养基 | 第36-37页 |
| 2．1．6 主要方法 | 第37-38页 |
| 2．1．7 小麦转化表达载体构建的基本方法 | 第38-42页 |
| 2．1．7．1 PCR扩增产物的克隆 | 第38-41页 |
| 2．1．7．2 小麦表达载体的构建流程 | 第41-42页 |
| 2．1．8 小麦外植体制备及基因枪法转化 | 第42-43页 |
| 2．1．9 再生植株的PCR检测 | 第43-44页 |
| 2．1．10 再生植株的Southern印迹分析 | 第44-46页 |
| 2．1．11 转不育基因小麦植株的花粉活力检测 | 第46页 |
| 2．2 烟草转化材料和方法 | 第46-51页 |
| 2．2．1 植物材料 | 第46页 |
| 2．2．2 菌种和质粒 | 第46页 |
| 2．2．3 分子生物学及生化试剂 | 第46页 |
| 2．2．4 PCR引物 | 第46-47页 |
| 2．2．5 烟草组织培养基 | 第47页 |
| 2．2．6 植物表达载体构建的基本方法 | 第47-48页 |
| 2．2．7 烟草的遗传转化及再生 | 第48页 |
| 2．2．8 再生植株的PCR及Southern检测 | 第48-49页 |
| 2．2．9 GUS基因活性的检测 | 第49页 |
| 2．2．10 烟草植株的二次转化及鉴定 | 第49-51页 |
| 3． 结果与分析 | 第51-75页 |
| 3．1 解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens barnase基因的克隆 | 第51-52页 |
| 3．2 解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens barstar基因的克隆 | 第52-53页 |
| 3．3 小麦转化及载体构建分析 | 第53-64页 |
| 3．4 烟草载体构建及阳性株的获得与鉴定 | 第64-69页 |
| 3．5 烟草二次转化植株的转化、鉴定及形态学观察 | 第69-75页 |
| 4． 讨论 | 第75-80页 |
| 4．1 解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens barnse基因的致死效应 | 第75-76页 |
| 4．2 barnase对农杆菌的致死作用 | 第76页 |
| 4．3 烟草二次转化花器官形态异常分析 | 第76-77页 |
| 4．4 小麦基因枪法转化效率探讨 | 第77页 |
| 4．5 转不育基因小麦的沉默现象 | 第77-78页 |
| 4．6 二次转化烟草植株的花粉活力分析 | 第78-79页 |
| 4．7 二次转化烟草植株的种子萌发率分析 | 第79-80页 |
| 5． 结论 | 第80-82页 |
| 6． 参考文献 | 第82-94页 |
| 7． 致谢 | 第94-99页 |
| 附录 | 第99-96页 |
| 缩写表 | 第96-97页 |
| 溶液配制 | 第97-99页 |
| 测序图谱 | 第99-102页 |
| 质粒构建流程 | 第102-110页 |
| 转化载体鉴定图谱 | 第110-113页 |
