摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-17页 |
第一章 引言 | 第17-31页 |
1. 文献综述 | 第17-29页 |
·非生物逆境 | 第17-20页 |
·低温逆境 | 第17-18页 |
·盐逆境 | 第18-19页 |
·干旱逆境 | 第19-20页 |
·非生物逆境信号转导的分子机制 | 第20-24页 |
·ABA 依赖性信号途径 | 第21-22页 |
·ABA 非依赖性信号途径 | 第22-23页 |
·逆境信号通路之间的网络联系 | 第23页 |
·小结 | 第23-24页 |
·活性氧(ROS) | 第24-29页 |
·活性氧在植物体内的双重作用 | 第24-25页 |
·植物体内活性氧的产生部位 | 第25页 |
·植物体内活性氧清除系统 | 第25-27页 |
·活性氧在体内的动态平衡 | 第27-28页 |
·植物中活性氧的检测方法 | 第28-29页 |
2. 研究背景,目的和意义 | 第29-30页 |
3. 技术路线 | 第30-31页 |
第二章 ABP5 的转录因子特性分析 | 第31-39页 |
1. 材料与方法 | 第31-34页 |
·材料 | 第31页 |
·方法 | 第31-34页 |
·ABP5 ORF/N/M/C 片段的获得 | 第31-32页 |
·pDB-ABP5 系列载体的构建 | 第32页 |
·酵母感受态的制备及转化 | 第32-34页 |
·SC-Leu-Trp-His 平板验证ABP5 与ABRE 元件结合特异性分析 | 第34页 |
·ABP5 转录调控功能分析 | 第34页 |
2. 结果与分析 | 第34-38页 |
·ABP5 与拟南芥同源基因序列比对 | 第34-35页 |
·ABP5 与ABRE 元件结合特异性分析 | 第35-36页 |
·pDB-ABP5 系列载体的构建 | 第36-37页 |
·ABP5 在酵母中转录调控功能分析 | 第37-38页 |
·SC-Leu-His 平板验证 | 第37-38页 |
·X-gal 染色验证 | 第38页 |
3. 小结 | 第38-39页 |
第三章 ABP5 在拟南芥中的亚细胞定位 | 第39-46页 |
1. 材料与方法 | 第39-42页 |
·材料 | 第39页 |
·方法 | 第39-42页 |
·ABP5-GFP 融合蛋白表达载体的构建 | 第39-40页 |
·农杆菌GV3101 热激感受态细胞的制备和农杆菌转化 | 第40-41页 |
·农杆菌介导的花序浸泡法转化拟南芥Columbia 野生型 | 第41页 |
·转基因植株筛选 | 第41页 |
·激光共聚焦扫描显微镜观察ABP5 蛋白定位 | 第41-42页 |
2. 结果与分析 | 第42-45页 |
·pCHF3-ABP5-GFP 融合蛋白表达载体的构建 | 第42-43页 |
·农杆菌转化结果 | 第43-44页 |
·拟南芥转化结果 | 第44页 |
·激光共聚焦扫描显微镜观察ABP5 蛋白定位 | 第44-45页 |
3. 小结 | 第45-46页 |
第四章 ABP5 在玉米中的表达谱分析 | 第46-53页 |
1. 材料与方法 | 第46-48页 |
·材料 | 第46页 |
·方法 | 第46-48页 |
·玉米材料的处理 | 第46页 |
·玉米总RNA 的提取 | 第46-47页 |
·RT-PCR 方法 | 第47页 |
·Real Time PCR 方法 | 第47-48页 |
2. 结果与分析 | 第48-52页 |
·引物效率验证实验 | 第48-49页 |
·ABP5 在玉米中的表达谱 | 第49-52页 |
·H_2O_2 处理 | 第49-50页 |
·ABA 处理 | 第50页 |
·NaCl 处理 | 第50页 |
·PEG 处理 | 第50-51页 |
·4℃处理 | 第51-52页 |
3. 小结 | 第52-53页 |
第五章 转ABP5 拟南芥纯系植株的获得 | 第53-60页 |
1. 材料与方法 | 第53-56页 |
·材料 | 第53页 |
·方法 | 第53-56页 |
·植物稳定表达载体pBI121-ABP5full 及RNAi 载体pK7GWIWG2-ABP50RF/full 的建构 | 第53-54页 |
·农杆菌GV3101 电击感受态细胞的制备和农杆菌转化 | 第54页 |
·拟南芥转化及转基因植株的抗性筛选 | 第54页 |
·转基因植株的PCR 检测 | 第54-55页 |
·转基因纯系植株的获得 | 第55页 |
·转基因拟南芥中ABP5 表达量鉴定 | 第55-56页 |
2. 结果与分析 | 第56-59页 |
·植物稳定表达载体的构建 | 第56-58页 |
·pBI121-ABP5full 的构建 | 第56-57页 |
·pK7GWIWG2-ABP50RF,pK7GWIWG2-ABP5full 的构建 | 第57-58页 |
·农杆菌转化结果 | 第58页 |
·拟南芥转化结果 | 第58-59页 |
·最终获得的拟南芥材料(过表达系及RNAi 系) | 第59页 |
·ABP5 本基因表达 | 第59页 |
3. 小结 | 第59-60页 |
第六章 ABP5 在转基因拟南芥中的生理功能分析 | 第60-71页 |
1. 材料与方法 | 第60-61页 |
·材料 | 第60页 |
·方法 | 第60-61页 |
·转基因与野生型植株表型观察 | 第60页 |
·植株对ABA 敏感性分析 | 第60页 |
·NBT 及DAB 染色 | 第60-61页 |
·平板实验 | 第61页 |
·土壤中抗性实验 | 第61页 |
2. 结果与分析 | 第61-70页 |
·正常培养条件下,转基因与野生型植株表型观察 | 第61-62页 |
·植株对ABA 敏感性分析 | 第62-64页 |
·NBT 及DAB 染色实验 | 第64-66页 |
·NBT 染色实验 | 第64-65页 |
·DAB 染色实验 | 第65-66页 |
·1μM MV 平板上转基因拟南芥的存活率变化 | 第66页 |
·转ABP5 拟南芥对盐胁迫的耐受性降低 | 第66-68页 |
·200 mM NaCl 平板实验 | 第66-67页 |
·土壤中耐盐实验 | 第67-68页 |
·转ABP5 拟南芥对旱胁迫的耐受性降低 | 第68-69页 |
·转ABP5 拟南芥对寒胁迫的耐受性降低 | 第69-70页 |
3. 小结 | 第70-71页 |
第七章 转ABP5 拟南芥的基因表达分析 | 第71-83页 |
1. 材料与方法 | 第71-73页 |
·材料 | 第71页 |
·方法 | 第71-73页 |
·拟南芥材料的培养及处理 | 第71页 |
·用Real Time PCR 方法检测抗逆相关基因的表达量变化 | 第71-72页 |
·ABP5 转基因拟南芥植株的芯片分析 | 第72-73页 |
2. 结果与分析 | 第73-82页 |
·拟南芥RNA 的提取 | 第73-74页 |
·抗逆相关基因的表达量变化 | 第74-77页 |
·NaCl 处理与正常培养条件下,在转基因系中比野生型表达量均下降的基因 | 第75页 |
·NaCl 处理与正常培养条件下,在转基因系中比野生型表达量均上升的基因 | 第75-76页 |
·NaCl 处理与正常培养条件下,表达量变化不同的基因 | 第76-77页 |
·基因芯片结果 | 第77-82页 |
·在两个转基因系中表达均发生明显变化的基因 | 第77-78页 |
·ROS 代谢相关基因的表达变化 | 第78-79页 |
·抗病相关基因的表达变化 | 第79-80页 |
·脂类分子运输相关基因的表达变化 | 第80-81页 |
·开花相关基因的表达变化 | 第81-82页 |
·衰老相关基因的表达变化 | 第82页 |
·其它基因的表达变化 | 第82页 |
3. 小结 | 第82-83页 |
第八章 结论与讨论 | 第83-87页 |
参考文献 | 第87-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
作者简历 | 第97页 |