| 中文摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-21页 |
| 符号说明 | 第21-23页 |
| 1.背景综述:γc家族细胞因子和NK细胞 | 第23-35页 |
| ·γc家族细胞因子的生物学功能 | 第23-28页 |
| ·IL-2和IL-15 | 第24-27页 |
| ·IL-4 | 第27页 |
| ·IL-7 | 第27页 |
| ·IL-9 | 第27-28页 |
| ·IL-21 | 第28页 |
| ·NK细胞亚群的发育和功能 | 第28-34页 |
| ·人NK细胞的发育 | 第28页 |
| ·人NK细胞的亚群及表面标志 | 第28-30页 |
| ·NK细胞的功能 | 第30-34页 |
| ·γc家族细胞因了对NK细胞的调节作用 | 第34-35页 |
| 2.前言 | 第35-37页 |
| 3.实验材料 | 第37-43页 |
| ·外周血和脐血 | 第37页 |
| ·细胞因子 | 第37页 |
| ·培养基及血清 | 第37页 |
| ·制备单个核细胞的试剂 | 第37页 |
| ·检测NK细胞杀伤活性的试剂(~(51)Cr释放法) | 第37页 |
| ·FACS染色和检测试剂 | 第37-39页 |
| ·细胞纯化分选试剂(MACS和FACS) | 第39页 |
| ·激光共聚焦显微镜样品制备试剂 | 第39页 |
| ·ELISA试剂盒 | 第39-40页 |
| ·主要实验耗材 | 第40页 |
| ·主要试剂的配制 | 第40-42页 |
| ·主要实验仪器 | 第42-43页 |
| 4.实验方法 | 第43-51页 |
| ·细胞冻存 | 第43页 |
| ·细胞复苏 | 第43页 |
| ·外周血或脐血单个核细胞的分离 | 第43-44页 |
| ·细胞计数 | 第44页 |
| ·苔盼蓝拒染法测细胞活力 | 第44-45页 |
| ·细胞的CFSE染色 | 第45页 |
| ·细胞培养 | 第45页 |
| ·IL-2和IL-15活性的测定 | 第45-46页 |
| ·FACS检测细胞表面标志 | 第46页 |
| ·FACS检测细胞凋亡 | 第46页 |
| ·FACS检测胞内细胞因子 | 第46-47页 |
| ·FACS检测胞内抗凋亡分子Bcl-2和Bcl-xL | 第47页 |
| ·CD56~+细胞或CD34~+细胞的MACS纯化 | 第47-48页 |
| ·NK细胞亚群的FACS纯化 | 第48页 |
| ·激光共聚焦显微镜检测 | 第48-49页 |
| ·ELISA | 第49页 |
| ·结核杆菌耐热多肽抗原的纯化 | 第49-50页 |
| ·~(51)Cr释放法检测NK细胞的杀伤活性 | 第50页 |
| ·统计学分析 | 第50-51页 |
| 5.实验结果 | 第51-85页 |
| ·IL-2和IL-15对脐血NK细胞产生不同的促增殖效应 | 第51-53页 |
| ·FACS结果显示IL-15对脐血NK细胞的促增殖作用强于IL-2 | 第51页 |
| ·细胞计数结果显示IL-15对脐血NK细胞的促增殖作用强于IL-2 | 第51-52页 |
| ·CFSE染色表明IL-15对脐血NK细胞的促增殖作用强于IL-2 | 第52-53页 |
| ·IL-2和IL-15对脐血NK细胞功能的影响存在差异 | 第53-54页 |
| ·IL-2和IL-15对脐血NK细胞的杀伤活性产生不同的影响 | 第53-54页 |
| ·IL-2和IL-15对脐血NK细胞IFN-γ的分泌产生不同的影响 | 第54页 |
| ·IL-2和IL-15对脐血CD56~(bright)和CD56~(dim)NK细胞亚群产生不同的作用 | 第54-61页 |
| ·IL-2和IL-15对脐血NK细胞不同亚群产生不同的促增殖效应 | 第55-57页 |
| ·IL-15维持CD34~-和CD56~+细胞中CD56~(dim)NK细胞的增殖 | 第57-58页 |
| ·脐血CD56~(bright)和CD56~(dim)NK细胞之间不能相互转化 | 第58-59页 |
| ·IL-2和IL-15对脐血NK细胞不同亚群的表面标志产生不同的影响 | 第59-61页 |
| ·IL-2诱导脐血CD56~(dim)NK细胞的凋亡而IL-15抑制其凋亡 | 第61-65页 |
| ·IL-2诱导CD56~(dim)NK细胞的凋亡 | 第61-63页 |
| ·抗IL-2抗体能够协同IL-15的抗凋亡作用,而抗IL-15抗体对IL-2的促凋亡作用无影响 | 第63-65页 |
| ·IL-15促使NK细胞高表达Bcl-xL从而抑制其凋亡 | 第65-66页 |
| ·IL-15诱导NK细胞表达高水平的Bcl-xL | 第65-66页 |
| ·CD56~(bright)NK细胞Bcl-2和Bcl-xL的表达水平均高于CD56~(dim)NK细胞 | 第66页 |
| ·IL-2和IL-15对脐血T细胞的影响存在差异 | 第66-68页 |
| ·IL-2对脐血T细胞的促增殖作用明显强于IL-15 | 第66-67页 |
| ·IL-2促进脐血T细胞CD25表达的能力强于IL-15 | 第67-68页 |
| ·成人外周血NK细胞的表型与脐血存在着差异 | 第68-69页 |
| ·IL-2和IL-15对成人外周血NK细胞的影响差异较小 | 第69-70页 |
| ·NK细胞调节γδT细胞对结核杆菌耐热抗原刺激的反应 | 第70-75页 |
| ·结核杆菌耐热抗原的纯化及其对人γδT细胞的刺激作用的验证 | 第71-72页 |
| ·人外周血NK细胞的功能状态与γδT细胞的增殖成正相关 | 第72-73页 |
| ·NK细胞调节γδT细胞对结核杆菌耐热抗原的反应 | 第73-75页 |
| ·IL-2参与结核杆菌耐热抗原对NK细胞的活化 | 第75-77页 |
| ·NK细胞通过分泌细胞因子正向调节γδT细胞的增殖 | 第77-80页 |
| ·结核杆菌耐热抗原可以刺激NK细胞分泌多种细胞因子 | 第77-78页 |
| ·NK细胞正向调节γδT细胞不依赖于IFN-γ | 第78-79页 |
| ·IL-12、TNF-α和GM-CSF参与NK细胞正向调节γδT细胞的过程 | 第79-80页 |
| ·NK细胞通过细胞-细胞间的接触调节γδT细胞的增殖 | 第80-85页 |
| ·细胞-细胞间的接触参与NK细胞正向调节γδT细胞的过程 | 第80-81页 |
| ·CD54参与NK细胞正向调节γδT细胞的过程 | 第81-83页 |
| ·阻断CD54分子,NK细胞对γδT细胞的调节作用减弱 | 第83-85页 |
| 6.讨论 | 第85-92页 |
| ·IL-2和IL-15对脐血NK细胞产生不同的调节作用 | 第85-87页 |
| ·IL-2和IL-15对脐血NK细胞的不同亚群产生不同的作用 | 第86页 |
| ·IL-2和IL-15对脐血NK细胞功能的影响存在着差异 | 第86页 |
| ·IL-15通过高表达Bcl-xL而不是Bcl-2来抑制CD56~(dim)NK细胞的凋亡 | 第86-87页 |
| ·IL-2和IL-15对脐血T细胞的影响存在差异 | 第87页 |
| ·IL-2和IL-15对成人外周血NK细胞的影响弱于脐血 | 第87-89页 |
| ·脐血NK细胞的表型与成人外周血存在差异 | 第88页 |
| ·IL-2和IL-15对成人外周血NK细胞的影响差异较小 | 第88-89页 |
| ·NK细胞能够调节γδT细胞对结核杆菌耐热抗原的增殖反应 | 第89-90页 |
| ·NK细胞通过分泌细胞因子调节γδT细胞的增殖 | 第89-90页 |
| ·NK细胞通过CD54调节γδT细胞对结核杆菌耐热抗原的反应 | 第90页 |
| ·IL-2参与结核杆菌耐热抗原活化NK细胞的过程 | 第90-92页 |
| 7.参考文献 | 第92-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 附录 | 第103-110页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第103页 |
| 攻读博士学位期间申请的专利 | 第103-104页 |
| 攻读博士学位期间参加的学术会议 | 第104-105页 |
| 附发表文章 | 第105-110页 |
