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变铅青链霉菌中DNA硫化修饰基因组岛的分子遗传学研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
第一章:文献终述第12-38页
   ·细菌中的基因组岛第12-28页
   ·链霉菌简介第28-34页
   ·DNA 磷硫化修饰的进展第34-36页
   ·对于基因组到研究的结论和今后的挑战第36-38页
第二章 实验材料和方法第38-51页
   ·实验材料第38-43页
   ·大肠杆菌和链霉菌质粒DNA 快速提取及检测第43-44页
   ·链霉菌总DNA 的少量快速提取第44页
   ·高压电穿孔法转化大肠杆菌(参考EquiBio公司说明书,见下文)第44-45页
   ·DNA 测序及序列分析第45-46页
   ·PCR 引物和PCR 的条件第46页
   ·荧光实时定量第46-47页
   ·通过pJTU1514 上携带的基因小岛的环出来确定整合酶活性第47页
   ·两亲本杂交介导的质粒DNA 的跨属转移第47页
   ·链霉菌之间的孢子杂交第47-48页
   ·脉冲电泳(PFGE) 分离大片段DNA第48-49页
   ·DNA-DNA 放射性杂交第49-51页
第三章 突变株ZX1 染色体上缺失端点及界点的序列分析第51-56页
   ·变铅青链霉菌突变株ZX1 缺失端点和融合界点的克隆第51-53页
   ·变铅青链霉菌突变株ZX1 缺失端点和融合界点的序列分析第53-54页
   ·天蓝色链霉菌M145 以及对应的变铅青链霉菌ZX1 融合点处的序列分析第54-56页
第四章 90 kb 含硫修饰基因组岛在染色体上的定位以及野生型变铅青链霉菌1326 染色体物理图谱的完善第56-64页
   ·前期工作简介第56页
   ·野生型变铅青链霉菌66 和突变株ZX1 的染色体AseI 片段图谱的比较第56-59页
   ·Southern 杂交确定ZX1 包含dnd 基因簇的片段在染色体上的位置第59-64页
第五章 SLG 全序列的测定第64-76页
   ·前期工作简介第64-65页
   ·测序文库粘粒的选取及序列分析第65-68页
   ·基因组岛的序列详细分析第68-76页
第六章 SLG 的自发切除和环化的检测第76-80页
   ·SLG 的自发切除和环化第76-80页
第七章 SLG 切除环化和整合过程必需的功能基因的定位第80-86页
   ·人工构建基因小岛模拟基因组岛环出和整合全过程第80-81页
   ·SLG 切除环化和整合必须功能基因的定位第81-86页
第八章 DNA 磷硫酰修饰基因簇在细菌中广泛性第86-93页
   ·dnd 基因簇在不同类型的细菌中广泛存在第86-89页
   ·dnd 基因簇在同一种属的细菌中的分布第89-92页
   ·细菌基因组的dnd 基因簇都位于可移动的因子上第92-93页
第九章 考察SLG 在链霉菌中可移动性第93-95页
   ·SLG 在链霉菌中的种间和种内的接合转移的尝试第93-95页
第十章 dnd 基因簇编码功能特异性强限制性系统的发现第95-106页
   ·DNA 修饰-限制系统简介第95-97页
   ·整合型dnd 基因簇在天蓝色链霉菌M145 中的异常表达第97-98页
   ·dnd 不表达的原因研究第98-102页
   ·天蓝色链霉菌中 DNA 硫化修饰依赖性的强限制系统的发现第102-105页
 本章小结第105-106页
第十一章 总结与展望第106-113页
   ·本研究工作总结及主要创新点第106-109页
   ·讨论与展望第109-111页
   ·进一步相关工作的第111-113页
参考文献第113-129页
附表第129-135页
致谢第135-137页
攻读学位期间发表的学术论文第137-138页
攻读学位期间发表的学术论文第138页

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