| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 综述部分 | 第12-29页 |
| 第一章 NANOG 基因的研究进展 | 第12-22页 |
| ·NANOG 基因的结构及其特征 | 第12-14页 |
| ·Nanog 基因的结构 | 第12页 |
| ·Nanog 基因保守结构域 | 第12-13页 |
| ·启动子 | 第13页 |
| ·重复序列 | 第13-14页 |
| ·假基因 | 第14页 |
| ·NANOG 基因的功能 | 第14-17页 |
| ·Nanog 基因在正常胚胎发育中的表达 | 第14-15页 |
| ·Nanog 基因敲除对胚胎发育和ES 细胞的影响 | 第15-16页 |
| ·Nanog 基因超表达对ES 细胞的影响 | 第16页 |
| ·Nanog 基因在成体细胞中的作用 | 第16-17页 |
| ·Nanog 基因在细胞融合中的作用 | 第17页 |
| ·NANOG 基因作用的机理 | 第17-22页 |
| ·Nanog 与Oct4，Sox2 之间的关系 | 第17-18页 |
| ·Nanog，Oct4 和LIF/STAT3 之间的关系 | 第18-20页 |
| ·Nanog 基因同3－磷酸肌醇激酶(Phosphoinositide 3-Kinase,P13K)信号通路之间关系 | 第20页 |
| ·Nanog, Oct4 和 FoxD3 之间的关系 | 第20页 |
| ·Nanog 基因的表观遗传学修饰 | 第20-21页 |
| ·调控Nanog 表达的因子/试剂 | 第21-22页 |
| 第二章 RNA 干扰研究进展 | 第22-29页 |
| ·RNAI 的分子机制 | 第22-24页 |
| ·RNAi 中所需的酶 | 第22-23页 |
| ·RNAi 作用机理 | 第23-24页 |
| ·SIRNA 的制备 | 第24-26页 |
| ·化学合成法 | 第24-25页 |
| ·质粒载体介导的siRNA 的制备 | 第25页 |
| ·病毒载体介导的siRNA 的制备 | 第25-26页 |
| ·RNAI 在基因组研究方面的应用 | 第26-27页 |
| ·RNAI 在医学方面的应用 | 第27-28页 |
| ·利用RNAI 技术研究ES 细胞 | 第28-29页 |
| 实验研究 | 第29-59页 |
| 第三章 NANOG 基因在HELA 细胞中的表达 | 第29-49页 |
| ·材料与方法 | 第29-39页 |
| ·材料 | 第29-32页 |
| ·方法与步骤 | 第32-39页 |
| ·结果和分析 | 第39-45页 |
| ·Nanog 基因的克隆 | 第39页 |
| ·重组质粒pNA992 酶切鉴定及测序结果 | 第39-40页 |
| ·Nanog 基因真核表达载体pG-Nanog 构建及鉴定 | 第40-41页 |
| ·转染细胞的筛选 | 第41页 |
| ·pG-Nanog 转染Hela 细胞以及Nanog 基因表达的检测 | 第41-43页 |
| ·抗增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)免疫组化染色结果 | 第43-44页 |
| ·细胞生长曲线 | 第44-45页 |
| ·生长周期测定 | 第45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·Nanog 基因克隆 | 第45-46页 |
| ·表达载体构建 | 第46页 |
| ·Nanog 基因对Hela 细胞的影响 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-49页 |
| 第四章 SIRNA 干扰NANOG 基因对小鼠ES 细胞和P19 细胞的影响 | 第49-59页 |
| ·材料和方法 | 第49-52页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·方法步骤 | 第50-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-57页 |
| ·半定量RT-PCR 检测siRNA 干扰效果 | 第52-53页 |
| ·siRNA 转染ES 细胞后细胞形态观察以及碱性磷酸酶（AP）染色 | 第53-55页 |
| ·siRNA 转染P19 细胞以及对P19 细胞诱导类胚体的影响 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| ·siRNA 设计 | 第57页 |
| ·siRNA 干扰ES-129 细胞Nanog 基因 | 第57页 |
| ·Nanog 基因表达下降对于ES 细胞和P19 细胞的影响 | 第57-58页 |
| ·小结 | 第58-59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 下一步工作设想 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 缩略词 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 作者简介 | 第69页 |
