摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
前言 | 第10-18页 |
1 高迁移率组分核小体蛋白(HMGs)简介 | 第10-12页 |
2 HMGD的研究现状 | 第12-14页 |
3 P因子及功能获得性UAS-Gal4系统概述 | 第14-16页 |
·P因子简介 | 第14页 |
·UAS-Gal4系统概述 | 第14-16页 |
4 本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
材料和方法 | 第18-30页 |
1 实验材料 | 第18-19页 |
·所用到的果蝇品系及细菌菌株 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18页 |
·主要仪器 | 第18-19页 |
2 实验方法 | 第19-30页 |
·质粒构建 | 第19页 |
·纯化PCR产物 | 第19-20页 |
·E.coli感受态的制备 | 第20页 |
·转化 | 第20页 |
·质粒DNA的小量提取 | 第20-21页 |
·质粒的大量制备 | 第21-22页 |
·显微注射及转基因果蝇的检测 | 第22页 |
·提取果蝇基因组DNA | 第22-23页 |
·胚胎死亡率统计 | 第23页 |
·胚胎表皮制片 | 第23页 |
·过量表达HmgD突变体幼虫的挑选 | 第23-24页 |
·通过杂交使UASPHmgD在母型Gal4和ActGal4驱动子的控制下过量表达 | 第24-25页 |
·唾液腺染色体的制备 | 第25页 |
·血细胞计数 | 第25页 |
·蜕皮激素挽救实验(ecdysone feeding experiments) | 第25-26页 |
·提取RNA | 第26-27页 |
·血细胞增殖途径相关基因的RT-PCR检测 | 第27页 |
·蜕皮激素受体及其相关调控基因的RT-PCR检测 | 第27-29页 |
·数据分析 | 第29-30页 |
实验结果 | 第30-42页 |
1 转基因果蝇的获得 | 第30页 |
2 PCR验证转基因果蝇 | 第30-31页 |
3 在母型Gal4驱动子控制下过量表达HmgD对果蝇发育的影响 | 第31-33页 |
·过量表达HmgD对果蝇胚胎表皮发育的影响 | 第32-33页 |
4 在广泛表达的Gal4的驱动子(ActGal4)控制下过量表达HmgD对果蝇发育的影响 | 第33-42页 |
·杂交结果 | 第33页 |
·从唾液腺染色体方面检测过量表达HmgD对果蝇染色体的影响 | 第33-34页 |
·表达HmgD导致果蝇血细胞增生 | 第34-35页 |
·黑色素瘤的发生部位 | 第35页 |
·血细胞的检测 | 第35-37页 |
·过量表达HmgD对果蝇血细胞增殖途径的影响 | 第37-38页 |
·过量表达HmgD对果蝇幼虫发育过程中蜕皮及存活率的影响 | 第38-39页 |
·广泛过量表达HmgD导致幼虫不能正常化蛹 | 第39-40页 |
·喂食蜕皮激素不能挽救过量表达HmgD突变体幼虫正常化蛹 | 第40-41页 |
·过量表达HmgD对果蝇蜕皮激素受体途径的影响 | 第41-42页 |
讨论 | 第42-45页 |
1 过量表达HmgD对果蝇胚胎发育的影响 | 第42-43页 |
2 在广泛表达的Gal4的驱动子(ActGal4)控制下过量表达HmgD对果蝇发育的影响 | 第43-45页 |
·对血细胞的影响 | 第43页 |
·对化蛹的影响 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
附录 | 第51-52页 |
致谢 | 第52页 |