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携带hIL12-p40-L△p35的双靶向溶瘤腺病毒联合CIK细胞的抗癌作用研究

摘要第1-5页
Abstract第5-6页
目录第6-8页
缩略语第8-9页
   ·引言第9-16页
     ·溶瘤腺病毒在肿瘤基因治疗中的研究进展第9-12页
       ·溶瘤腺病毒第9-10页
       ·提高溶瘤腺病毒靶向性的策略第10-12页
     ·CIK在肿瘤基因治疗中的研究进展第12-15页
       ·CIK细胞作用机制第13-15页
     ·实验方案设计第15-16页
       ·实验目的和意义第15-16页
       ·研究内容第16页
   ·实验材料第16-19页
     ·实验材料第16-19页
       ·菌株及质粒第16页
       ·工具酶及试剂第16页
       ·腺病毒第16-17页
       ·细胞株第17页
       ·实验动物第17页
       ·实验所需试剂第17页
       ·实验所需要的仪器和设备第17-18页
       ·主要溶液的配制第18-19页
       ·引物设计与合成第19页
   ·实验方法第19-30页
     ·分子克隆基本方法第19-23页
       ·质粒DNA的制备第19-21页
       ·从琼脂糖凝胶中回收DNA第21页
       ·酶切与连接第21-22页
       ·大肠杆菌感受态的制备及转化第22-23页
     ·AdCN205-hIL12-p40-LΔAp35腺病毒载体重组过程第23-26页
       ·pCZ203-hIL12-p40-LΔp35的构建第23页
       ·pCZ204-hIL12-p40-LΔp35的构建第23-24页
       ·在细菌BJ5183中重组得到pCZ205-hIL12-p40-LΔp35第24-26页
     ·病毒的扩增纯化及滴度测定第26-27页
     ·子代病毒复制能力第27页
     ·MTT检测细胞的存活第27-28页
     ·ELISA测定病毒AdCN205-hIL-12表达外源基因第28-29页
     ·AdCN205-GFP荧光表达第29页
     ·荧光化学发光检测细胞存活光表达第29页
     ·SCID鼠Huh7肝癌移植瘤模型的建立及分组治疗第29-30页
     ·ELISA检测组织匀浆中hIL-12的含量第30页
   ·实验结果第30-41页
     ·质粒构建第30-31页
       ·pCZ203-hIL.12-p40-LΔp35的构建及鉴定结果第30页
       ·pCZ204-hIL12-p40-LΔp35的构建及鉴定结果第30-31页
       ·重组得到pCZ205-hIL12-p40-LΔp35及其鉴定结果第31页
     ·病毒包装、扩增第31-32页
     ·病毒包装鉴定结果第32-33页
     ·病毒滴度的测定第33页
     ·AdCN205-hIL-12在体外能够选择性地在肿瘤细胞中复制第33-34页
     ·外源基因选择性地在肿瘤细胞中高量表达第34-36页
     ·AdCN205-hIL-12具有选择性杀死肿瘤细胞的能力第36-37页
     ·AdCN205-hIL-12联合CIK细胞发挥协同作用杀伤癌细胞第37-38页
     ·AdCN205-hIL-12明显抑制荷瘤小鼠肿瘤生长第38-41页
结论第41-44页
致谢第44-45页
参考文献第45-48页
硕士阶段发表论文(第一作者)第48页

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