| 致谢 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 1 绪论 | 第9-25页 |
| ·手性亚砜化合物 | 第9-11页 |
| ·手性化合物 | 第9-10页 |
| ·手性亚砜类化合物及用途 | 第10-11页 |
| ·手性亚砜的制备 | 第11-14页 |
| ·化学法制备手性亚砜类化合物 | 第12-14页 |
| ·生物法制备手性亚砜类化合物 | 第14页 |
| ·黄素依赖型单加氧酶(FMO)——硫氧化酶 | 第14-22页 |
| ·硫氧化酶的催化机理 | 第15-16页 |
| ·已知的硫氧化酶 | 第16-19页 |
| ·硫氧化酶生物合成手性亚砜反应的优化 | 第19-22页 |
| ·硫氧化酶生物催化合成手性亚砜过程中辅酶再生 | 第22-24页 |
| ·电化学法再生 | 第22页 |
| ·酶法再生 | 第22-24页 |
| ·本课题的研究路线及意义 | 第24-25页 |
| ·研究路线 | 第24页 |
| ·意义 | 第24-25页 |
| 2 N.aromaticivorans基因组中硫氧化酶基因的克隆和表达 | 第25-40页 |
| ·实验材料和仪器 | 第25-28页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| ·实验方法 | 第28-36页 |
| ·重组表达质粒构建策略 | 第28页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第28-30页 |
| ·TA克隆 | 第30-32页 |
| ·重组表达质粒的构建 | 第32-35页 |
| ·硫氧化酶的表达及SDS-PAGE分析 | 第35-36页 |
| ·实验结果讨论 | 第36-38页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第36页 |
| ·TA克隆 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第37页 |
| ·重组蛋白的表达鉴定 | 第37-38页 |
| ·小结 | 第38-40页 |
| 3 硫氧化酶基础酶学性质的研究 | 第40-50页 |
| ·实验材料 | 第40-42页 |
| ·菌种 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·主要溶液与缓冲液 | 第40-42页 |
| ·实验方法 | 第42-45页 |
| ·重组目的蛋白的纯化 | 第42-43页 |
| ·酶活力检测 | 第43-44页 |
| ·硫氧化酶酶学性质的初步测定 | 第44-45页 |
| ·实验结果与讨论 | 第45-49页 |
| ·重组目的蛋白的纯化及纯化前后的酶活 | 第45-46页 |
| ·硫氧化酶酶学性质测定 | 第46-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 4 辅酶再生体系的构建及其应用于硫醚不对称氧化的研究 | 第50-68页 |
| ·实验材料 | 第50-51页 |
| ·菌种 | 第50页 |
| ·实验试剂 | 第50-51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-61页 |
| ·Candida bodinii中甲酸脱氢酶基因定点突变 | 第51-52页 |
| ·Candida bodinii中甲酸脱氢酶突变基因在E.coli中重组表达 | 第52-54页 |
| ·甲酸脱氢酶突变体的酶活力测定 | 第54-55页 |
| ·CHMO在E.coli中单独表达及活性检测 | 第55-56页 |
| ·以CHMO为模型建立与mFDH的共表达体系 | 第56-59页 |
| ·共表达体系硫氧化反应过程优化 | 第59-61页 |
| ·实验结果与讨论 | 第61-67页 |
| ·共表达蛋白SDS-PAGE电泳检测 | 第61页 |
| ·CHMO和FDH单独表达和共表达时酶活力测定 | 第61-63页 |
| ·共表达体系硫氧化反应 | 第63-64页 |
| ·共表达体系硫氧化反应过程优化 | 第64-67页 |
| ·小结 | 第67-68页 |
| 5 结论和建议 | 第68-70页 |
| ·结论 | 第68-69页 |
| ·建议 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 作者简历及在硕士期间所发表的论文 | 第76页 |
