| 致谢 | 第1-5页 |
| 中文摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 1 绪论 | 第11-28页 |
| ·宏基因组概述 | 第11-15页 |
| ·研究历史 | 第11-12页 |
| ·宏基因组文库的构建 | 第12-15页 |
| ·宏基因组筛选方法 | 第15-23页 |
| ·功能筛选 | 第15-18页 |
| ·序列筛选 | 第18-21页 |
| ·底物诱导基因表达筛选 | 第21-22页 |
| ·功能筛选与序列筛选相结合 | 第22-23页 |
| ·纤维素酶研究概述 | 第23-25页 |
| ·纤维素酶概述 | 第23-24页 |
| ·宏基因组来源纤维素酶的克隆 | 第24-25页 |
| ·研究目的与意义 | 第25-28页 |
| 2 功能筛选宏基因组纤维素酶基因 | 第28-41页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·材料与方法 | 第28-30页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·仪器及设备 | 第29页 |
| ·试剂 | 第29-30页 |
| ·主要溶液配制 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-35页 |
| ·宏基因组土壤样本DNA提取及纯化 | 第30页 |
| ·宏基因组文库的构建 | 第30-31页 |
| ·功能筛选宏基因组纤维素酶基因 | 第31-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·高质量宏基因组土壤DNA的提取及纯化 | 第35-36页 |
| ·宏基因组文库的构建 | 第36页 |
| ·功能筛选宏基因组纤维素酶基因 | 第36-38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| ·土壤宏基因组DNA的提取及文库构建 | 第38-40页 |
| ·功能筛选宏基因组纤维素酶基因 | 第40页 |
| ·纤维素酶新基因序列分析 | 第40-41页 |
| 3 宏基因组特异性多重PCR获取纤维素酶同源基因 | 第41-62页 |
| ·引言 | 第41-42页 |
| ·材料、仪器与试剂 | 第42-45页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·主要仪器及设备 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43页 |
| ·主要溶液配制 | 第43-45页 |
| ·实验方法 | 第45-50页 |
| ·宏基因组特异性多重PCR引物设计 | 第45页 |
| ·宏基因组多重PCR体系的优化 | 第45-47页 |
| ·宏基因组特异性多重PCR扩增宏基因组DNA纤维素酶 | 第47-50页 |
| ·宏基因组特异性多重PCR扩增基因片段分析 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-60页 |
| ·宏基因组特异性多重PCR引物设计 | 第50页 |
| ·宏基因组特异性多重PCR体系的优化 | 第50-52页 |
| ·宏基因组特异性多重PCR扩增宏基因组DNA纤维素酶 | 第52-55页 |
| ·宏基因组特异性多重PCR扩增基因序列分析 | 第55-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| ·高质量宏基因组DNA模板的制备 | 第60-61页 |
| ·宏基因组特异性引物的设计 | 第61页 |
| ·宏基因组特异性多重PCR体系的优化 | 第61页 |
| ·宏基因组特异性多重PCR | 第61-62页 |
| 4 宏基因组简并PCR获取纤维素酶同源基因 | 第62-78页 |
| ·引言 | 第62页 |
| ·材料、仪器与试剂 | 第62-64页 |
| ·实验材料 | 第62页 |
| ·主要仪器及设备 | 第62-63页 |
| ·主要试剂 | 第63页 |
| ·主要溶液配制 | 第63-64页 |
| ·实验方法 | 第64-70页 |
| ·简并引物设计 | 第64-65页 |
| ·简并PCR条件优化 | 第65-69页 |
| ·简并PCR扩增宏基因组DNA纤维素酶 | 第69-70页 |
| ·简并PCR扩增基因片段分析 | 第70页 |
| ·结果与分析 | 第70-76页 |
| ·简并引物设计 | 第70页 |
| ·简并PCR条件优化 | 第70-72页 |
| ·简并PCR扩增宏基因组DNA纤维素酶 | 第72页 |
| ·简并PCR扩增基因序列分析 | 第72-76页 |
| ·讨论 | 第76-78页 |
| ·PCR添加剂的选择 | 第76-77页 |
| ·简并PCR引物设计与选择 | 第77-78页 |
| 5 结论与展望 | 第78-80页 |
| ·结论 | 第78-79页 |
| ·宏基因文库的构建 | 第78页 |
| ·新纤维素酶全长基因的筛选 | 第78页 |
| ·宏基因组特异性多重PCR | 第78页 |
| ·简并PCR | 第78-79页 |
| ·论文的创新及意义 | 第79页 |
| ·论文创新 | 第79页 |
| ·论文意义 | 第79页 |
| ·展望 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-93页 |
| 附录 | 第93-94页 |
| 作者简历及硕士期间工作成果情况 | 第94-95页 |