中文摘要 | 第1-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
本文主要缩写词 | 第9-10页 |
Ⅰ 前言 | 第10-20页 |
1.1 植物抗虫基因工程的发展 | 第10-11页 |
1.2 目前植物抗虫基因工程中存在的主要问题及解决策略 | 第11-14页 |
1.2.1 植物抗虫基因工程中的突出问题——靶标害虫的抗性 | 第11-12页 |
1.2.2 其他问题 | 第12-13页 |
1.2.3 解决问题的策略 | 第13-14页 |
1.3 转双价抗虫基因植物的研究 | 第14-16页 |
1.3.1 转双价抗虫基因植物的提出 | 第14-15页 |
1.3.2 目前获得转双价抗虫基因植物的主要方法 | 第15页 |
1.3.3 转双价抗虫基因植物的研究现状 | 第15-16页 |
1.3.4 转双价抗虫基因植物研究的意义 | 第16页 |
1.4 转双价抗虫基因植物存在的主要问题和解决方法 | 第16-17页 |
1.4.1 目的基因的选择 | 第17页 |
1.4.2 基因沉默 | 第17页 |
1.4.3 基因突变 | 第17页 |
1.5 水稻遗传转化研究 | 第17-19页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第19-20页 |
Ⅱ 材料与方法 | 第20-28页 |
2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 实验材料 | 第20页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第20-21页 |
2.1.3 主要试剂和仪器 | 第21页 |
2.2 实验方法 | 第21-28页 |
2.2.1 质粒导入农杆菌方法 | 第21-22页 |
2.2.2 水稻胚性愈伤组织的诱导及继代 | 第22页 |
2.2.3 农杆菌介导的水稻愈伤转化方法 | 第22-23页 |
2.2.4 抗性愈伤的继代与再生成完整植株 | 第23页 |
2.2.5 水稻叶片DNA提取 | 第23-24页 |
2.2.6 质粒DNA的抽提 | 第24页 |
2.2.7 目的基因的PCR检测 | 第24-25页 |
2.2.8 双探针PCR-Southern blot检测 | 第25-26页 |
2.2.9 转基因植株后代的ELISA检测 | 第26-27页 |
2.2.10 转基因植株后代的田间抗虫性调查 | 第27页 |
2.2.11 转基因后代种子的分离比测定 | 第27-28页 |
Ⅲ 结果与分析 | 第28-43页 |
3.1 电激法将质粒pCUBAC-Hyg导入农杆菌LBA4404 | 第28页 |
3.2 农杆菌介导获得转双价抗虫基因水稻植株 | 第28-29页 |
3.3 转化植株的分子检测 | 第29-32页 |
3.3.1 PCR检测结果 | 第29-31页 |
3.3.2 转化植株的PCR-Southern blot分析 | 第31-32页 |
3.4 转基因T0代田间抗虫性及育性观察 | 第32-33页 |
3.5 T0代自交种子的标记基因遗传分离测定 | 第33-36页 |
3.6 T1代部分植株田间抗虫性表现 | 第36-37页 |
3.7 T1代自交获得转双价抗虫基因纯合株系 | 第37-40页 |
3.8 转基因植株后代的ELISA检测 | 第40-43页 |
3.8.1 转基因植株T1代ELISA检测 | 第40-41页 |
3.8.2 一些具有沉默现象的转基因株系的ELISA检测 | 第41-43页 |
Ⅳ 讨论 | 第43-46页 |
4.1 农杆菌介导获得转双价抗虫基因(sck+Bt)籼稻的意义 | 第43页 |
4.2 转基因水稻后代分离比为1:1的初步研究 | 第43-45页 |
4.3 转基因植物中基因沉默现象 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
图版 | 第53-55页 |
附件 | 第55-61页 |
致谢 | 第61页 |