缺失型α-地中海贫血基因诊断芯片及在分子流行病学研究中的应用
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 1 绪论 | 第14-24页 |
| ·问题的提出及研究意义 | 第14-15页 |
| ·问题的提出 | 第14页 |
| ·研究的意义 | 第14-15页 |
| ·国内外研究现状 | 第15-22页 |
| ·地中海贫血定义、起源和分类 | 第15页 |
| ·地中海贫血的分子基础 | 第15-19页 |
| ·地中海贫血的治疗 | 第19页 |
| ·地中海贫血的诊断 | 第19-20页 |
| ·地中海贫血的流行病学 | 第20页 |
| ·基因芯片技术及其在地中海贫血诊断中的应用 | 第20-22页 |
| ·本文研究的目的和研究内容 | 第22-24页 |
| ·本文的研究目的 | 第22-23页 |
| ·本文研究的主要内容 | 第23-24页 |
| 2 缺失型α-地中海贫血基因芯片的研制 | 第24-54页 |
| ·引言 | 第24页 |
| ·材料和方法 | 第24-31页 |
| ·材料 | 第24-26页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第26-27页 |
| ·DNA 的定量与稀释 | 第27页 |
| ·引物的设计与合成 | 第27-28页 |
| ·多重PCR 反应体系的优化 | 第28-29页 |
| ·特异性寡核苷酸探针的设计与合成 | 第29页 |
| ·玻片醛基化处理和选择 | 第29-30页 |
| ·芯片的制备及后处理 | 第30页 |
| ·芯片的杂交及洗涤 | 第30页 |
| ·芯片的扫描和分析 | 第30页 |
| ·芯片性能指标评价 | 第30-31页 |
| ·结果 | 第31-50页 |
| ·标准品的选择与制备 | 第31页 |
| ·PCR 引物的设计 | 第31-37页 |
| ·PCR 反应体系的优化 | 第37-41页 |
| ·醛基片的选择 | 第41页 |
| ·探针浓度的确定 | 第41-42页 |
| ·点样液的选择 | 第42-43页 |
| ·寡核苷酸探针的选择 | 第43-45页 |
| ·杂交检测体系的优化 | 第45页 |
| ·基因芯片检测的特异性 | 第45-47页 |
| ·芯片检测判定标准的确定 | 第47-48页 |
| ·芯片检测的限度 | 第48-49页 |
| ·芯片检测的重复性 | 第49-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| ·缺失型α-地中海贫血的基因诊断 | 第50页 |
| ·芯片检测缺失型α-地中海贫血 | 第50页 |
| ·质控参比品的选择 | 第50-51页 |
| ·多重PCR体系的建立 | 第51页 |
| ·芯片的制备 | 第51-52页 |
| ·检测标准的建立和检测结果的判定 | 第52页 |
| ·本章小结 | 第52-54页 |
| 3 第一例东南亚缺失与HKαα复合杂合子鉴定 | 第54-67页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·材料和方法 | 第54-57页 |
| ·材料 | 第54-55页 |
| ·血液学检测 | 第55页 |
| ·血红蛋白电泳 | 第55页 |
| ·DNA 的提取 | 第55页 |
| ·基因诊断 | 第55-56页 |
| ·非缺失点突变的检测 | 第56页 |
| ·β-地中海贫血的检测 | 第56-57页 |
| ·结果 | 第57-62页 |
| ·血液学分析 | 第57页 |
| ·分子分析 | 第57-62页 |
| ·讨论 | 第62-66页 |
| ·关于HKαα | 第62-65页 |
| ·关于HKαα和--SEA 的复合杂合子 | 第65-66页 |
| ·在临床中的意义 | 第66页 |
| ·本章小结 | 第66-67页 |
| 4 深圳市人群地中海贫血的分子流行病学研究 | 第67-78页 |
| ·引言 | 第67页 |
| ·材料和方法 | 第67-69页 |
| ·材料 | 第67-68页 |
| ·血液学检测 | 第68页 |
| ·血红蛋白电泳 | 第68页 |
| ·DNA 的提取 | 第68页 |
| ·缺失型α-地中海贫血的基因诊断 | 第68-69页 |
| ·非缺失点突变的检测 | 第69页 |
| ·β-地中海贫血的检测 | 第69页 |
| ·结果 | 第69-72页 |
| ·地中海贫血的流行病率 | 第69-70页 |
| ·α-地中海贫血 | 第70-71页 |
| ·β-地中海贫血 | 第71-72页 |
| ·α-和β-地中海贫血双重杂合子 | 第72页 |
| ·讨论 | 第72-76页 |
| ·地中海贫血流行病学 | 第72-73页 |
| ·深圳市地中海贫血流行病学 | 第73页 |
| ·深圳与广东省其他地区地中海贫血流行病学比较 | 第73-76页 |
| ·本章小结 | 第76-78页 |
| 5 结论与展望 | 第78-79页 |
| ·主要结论 | 第78页 |
| ·后续研究工作的展望 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-93页 |
| 附录 | 第93-111页 |
