提要 | 第1-5页 |
英文缩写词表 | 第5-8页 |
引言 | 第8-15页 |
材料和方法 | 第15-23页 |
1. 引物设计 | 第15页 |
·确定 H5N1 型 AIV(A/Goose/Guangdong/1/96(H5)-NCBI:AAD519 27)的 B 细胞表位和 T 细胞表位 | 第15页 |
·设计引物 | 第15页 |
2. 实验材料 | 第15-17页 |
·限制性内切酶及其它试剂 | 第15-16页 |
·菌种及质粒 | 第16页 |
·培养基 | 第16页 |
·实验动物及其他 | 第16-17页 |
3. 实验方法 | 第17-23页 |
·感受态细胞的制备 | 第17页 |
·质粒的转化 | 第17页 |
·碱裂解法小量制备质粒 | 第17-18页 |
·细菌的超声裂解 | 第18页 |
·用PCR 搭建的方法构建基因片段 | 第18页 |
·PCR 产物的T-A 克隆 | 第18-19页 |
·重组禽流感H5 型疫苗编码基因的克隆-亚克隆构建 | 第19页 |
·IPTG 诱导重组禽流感H5 型疫苗表达 | 第19-20页 |
·重组禽流感H5 型疫苗的纯化 | 第20-21页 |
·动物实验 | 第21-23页 |
实验流程 | 第23-24页 |
实验结果 | 第24-29页 |
1. H5 型AIV B 细胞表位及T 细胞表位的确定 | 第24页 |
2. 重组禽流感H5 型疫苗结构的设计 | 第24-25页 |
3. 用PCR搭建的方法分别构建B_1、C_1、B_2和C_2片段的编码基因 | 第25页 |
4. 重组禽流感H5 型疫苗的编码基因的构建 | 第25-27页 |
·重组禽流感 H5 型疫苗克隆载体的构建 | 第25-27页 |
·重组禽流感 H5 型疫苗表达载体的构建 | 第27页 |
5. 重组禽流感H5 型疫苗的的表达、鉴定及纯化 | 第27-28页 |
6. 重组禽流感H5 型疫苗的抗原性研究 | 第28-29页 |
图片和表格 | 第29-48页 |
讨论 | 第48-52页 |
1. 重组禽流感H5 型疫苗B 细胞表位的选择 | 第48-49页 |
2. 重组禽流感H5 型疫苗linker 的设计 | 第49-50页 |
3. 重组禽流感H5 型疫苗抗原性研究 | 第50-52页 |
结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
中文摘要 | 第58-62页 |
ABSTRACT | 第62-68页 |
致谢 | 第68页 |