嗜热酯酶APE1547催化结构域的克隆、表达及性质测定
| 内容提要 | 第1-7页 |
| 第一章 前言 | 第7-19页 |
| ·嗜热酶 | 第7-8页 |
| ·嗜热酶简介 | 第7-8页 |
| ·嗜热酶的应用 | 第8页 |
| ·酯酶 | 第8-9页 |
| ·嗜热酯酶APE1547 | 第9-11页 |
| ·结构域简介 | 第11-14页 |
| ·α/β水解酶折叠催化结构域 | 第12-13页 |
| ·α/β水解酶折叠的结构 | 第13-14页 |
| ·蛋白质工程 | 第14-17页 |
| ·本论文的立题依据 | 第17-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-35页 |
| ·实验材料 | 第19-22页 |
| ·菌种和质粒 | 第19页 |
| ·主要试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19-20页 |
| ·培养基 | 第20-21页 |
| ·试剂的配置 | 第21-22页 |
| ·常用储备液 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-35页 |
| ·模块酶W11 基因的载体构建 | 第22-28页 |
| ·重组酶表达条件的优化 | 第28-30页 |
| ·模块酶W11 包涵体蛋白的复性和纯化 | 第30-32页 |
| ·酶学性质的表征 | 第32-35页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第35-54页 |
| ·模块酶 W11 的基因构建 | 第35页 |
| ·重组蛋白W11 的诱导表达 | 第35-40页 |
| ·表达菌的选择 | 第35-37页 |
| ·目的蛋白诱导表达条件的选择 | 第37-40页 |
| ·包涵体蛋白的复性 | 第40-45页 |
| ·包涵体蛋白的预处理 | 第40-41页 |
| ·包涵体蛋白的复性和纯化 | 第41-45页 |
| ·模块酶的酶学性质表征 | 第45-54页 |
| ·温度对酶活的影响 | 第45-47页 |
| ·pH对酶活的影响 | 第47-48页 |
| ·酶动力学 | 第48-49页 |
| ·酶的底物特异性 | 第49-50页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第50-51页 |
| ·酶的热稳定性 | 第51-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 摘要 | 第58-60页 |
| Abstract | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
