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活性海洋真菌的鉴定及其次级代谢产物的研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-28页
   ·海洋微生物研究概况第12-14页
     ·海洋微生物的多样性第12-13页
     ·海洋真菌第13页
     ·海洋细菌第13页
     ·海洋放线菌第13-14页
     ·海洋微藻第14页
   ·海洋微生物次级代谢产物研究第14-24页
     ·海洋真菌次级代谢产物研究第14-22页
     ·海洋细菌、放线菌次级代谢产物研究第22-23页
     ·海洋微藻次级代谢产物研究第23-24页
   ·海洋曲霉次级代谢产物活性成分研究第24-26页
     ·抗肿瘤活性成分第24-25页
     ·其它活性第25-26页
   ·本研究的目的、意义及技术路线第26-28页
2 海洋真菌的分离纯化及抑制烟草花叶病毒活性的筛选第28-41页
   ·材料与方法第28-30页
     ·供试寄主、供试毒源及抗体第28页
     ·实验仪器与试剂第28页
     ·菌株分离、纯化及发酵培养基第28-29页
     ·实验方法第29-30页
   ·实验结果第30-40页
     ·海洋真菌的分离第30-31页
     ·TMV浓度曲线第31页
     ·菌株发酵液抑制TMV侵染活性的测定第31-36页
     ·菌株发酵液抑制TMV增殖活性的测定第36-40页
   ·讨论第40-41页
3 海洋真菌抗肿瘤活性的筛选第41-51页
   ·材料与方法第41-44页
     ·实验材料、试剂及主要实验仪器第41-42页
     ·实验方法第42-44页
   ·实验结果与分析第44-50页
     ·肿瘤细胞生长曲线第44-45页
     ·发酵液抗肿瘤活性检测结果第45-50页
   ·讨论第50-51页
4 活性菌株的鉴定第51-68页
   ·材料和方法第51-57页
     ·主要实验仪器第51页
     ·主要实验试剂第51-52页
     ·供试菌株与培养基第52页
     ·菌株形态鉴定第52页
     ·菌株和质粒第52-53页
     ·菌株基因组总DNA提取及PCR反应第53-54页
     ·大肠杆菌克隆载体的构建第54页
     ·PCR扩增产物与pMD18-T克隆载体的连接第54-56页
     ·序列测定与分析第56-57页
   ·实验结果与分析第57-67页
     ·菌株在培养基上的生长性状第57页
     ·菌株形态鉴定第57-60页
     ·菌株ITS rDNA序列鉴定第60-67页
   ·讨论第67-68页
5 活性菌株次级代谢产物抑菌作用的研究第68-78页
   ·材料与方法第68-69页
     ·供试菌株与培养基第68页
     ·主要实验仪器与试剂第68-69页
     ·菌株发酵产物水溶性提取物的制备第69页
     ·海洋真菌对植物病原菌菌株拮抗性测定第69页
     ·水溶性提取物对植物病原菌的抑制作用第69页
   ·结果与分析第69-76页
     ·海洋真菌对植物病原真菌的抑制作用第69-70页
     ·海洋真菌发酵产物的提取物对植物病原真菌生长量的作用第70-74页
     ·海洋真菌发酵产物的提取物对植物病原真菌的抑制作用第74-75页
     ·海洋真菌活性提取物对植物病原真菌的抑制中浓度(EC_(50))第75-76页
   ·讨论第76-78页
6 活性菌株次级代谢产物活性部位的研究第78-85页
   ·材料与方法第78-80页
     ·实验材料第78页
     ·主要实验仪器第78-79页
     ·主要实验试剂第79页
     ·菌株发酵培养基第79页
     ·菌株发酵产物粗提物的制备第79页
     ·菌株发酵产物活性组分的分离第79-80页
     ·菌株发酵产物抑制TMV增殖活性的测定第80页
     ·菌株发酵产物抗肿瘤活性的测定第80页
   ·结果与分析第80-84页
     ·活性菌株发酵产物粗提物抑制TMV增殖的活性第80-81页
     ·菌株1008F_1发酵产物粗提物各部分抑制TMV增殖和抗肿瘤的活性第81-83页
     ·菌株1008F_1发酵产物粗提物活性部位各组分抗肿瘤的活性第83-84页
   ·讨论第84-85页
7 菌株1008F_1次级代谢产物活性成分的分离鉴定、活性测定及构效关系分析第85-141页
   ·材料和方法第85-91页
     ·实验材料第85页
     ·实验仪器第85-86页
     ·药品及溶剂第86页
     ·试验方法第86-91页
   ·结果与分析第91-139页
     ·海洋真菌1008F_1次级代谢产物中化合物的结构鉴定第91-136页
     ·化合物抑制TMV增殖活性及抑制中浓度第136-137页
     ·化合物抗肿瘤活性及抑制中浓度第137-139页
     ·化合物抗TMV及抗肿瘤活性SAR分析第139页
   ·讨论第139-141页
8 总结与讨论第141-144页
   ·抑制TMV增殖活性是海洋曲霉属真菌(Aspergillus sp.)的一种新的生物活性第141-142页
   ·海洋真菌的大量发酵过程第142页
   ·明确了抗TMV及抗肿瘤的活性成分第142页
   ·进行了化合物抗TMV及抗肿瘤活性的SAR分析第142-143页
   ·展望第143-144页
参考文献第144-151页
附录1 缩略语及含义第151-153页
附录二 攻博期间发表、投稿的论文及申请的专利第153-154页
致谢第154页

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