| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-6页 |
| 目录 | 第6-8页 |
| 符号说明 | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-26页 |
| 1 牛结核病概述 | 第9-12页 |
| ·牛结核病的现状 | 第9-10页 |
| ·病原及流行病学的研究 | 第10-11页 |
| ·诊断方法的研究 | 第11-12页 |
| 2 分泌蛋白的研究进展 | 第12-26页 |
| ·结核分枝杆菌分泌蛋白的组成 | 第12-13页 |
| ·结核分枝杆菌分泌蛋白的生物学功能 | 第13-14页 |
| ·结核分枝杆菌几种分泌蛋白研究进展 | 第14-17页 |
| ·结核分枝杆菌分泌蛋白的研究方法 | 第17-20页 |
| ·结核分枝杆菌分泌蛋白在临床诊断中的应用 | 第20-21页 |
| ·结核分枝杆菌分泌蛋白在疫苗中的应用 | 第21-24页 |
| ·前景展望 | 第24-25页 |
| ·研究目的与意义 | 第25-26页 |
| 第二章 牛分枝杆菌Mb1761c 和Mb2277 蛋白的表达及其免疫原性的初步研究 | 第26-44页 |
| 1 材料 | 第26-28页 |
| ·实验菌株 | 第26页 |
| ·阳性血清 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·主要溶液的配制 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-34页 |
| ·引物设计与合成 | 第29页 |
| ·目的基因的扩增及纯化 | 第29-31页 |
| ·PCR 产物和pET28a(+)的酶切 | 第31页 |
| ·目的基因与载体连接 | 第31页 |
| ·重组质粒的转化 | 第31-32页 |
| ·重组质粒的提取 | 第32-33页 |
| ·挑选阳性克隆并鉴定 | 第33页 |
| ·原核表达载体的构建和鉴定 | 第33页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第33-34页 |
| ·Western-blot 检测重组蛋白的抗原性 | 第34页 |
| 3 实验结果 | 第34-42页 |
| ·生物信息学分析结果 | 第34-37页 |
| ·Mb1761c 和Mb2277 基因扩增结果 | 第37-38页 |
| ·重组克隆载体的测序与鉴定 | 第38-40页 |
| ·原核表达质粒的构建和酶切鉴定 | 第40页 |
| ·重组质粒的诱导表达结果 | 第40-42页 |
| ·Western-blot 检测重组蛋白的抗原性 | 第42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 重组蛋白在ELISA 检测方法中的初步应用研究 | 第44-55页 |
| 1. 材料 | 第44-45页 |
| ·重组表达菌株 | 第44页 |
| ·血清 | 第44页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第44-45页 |
| ·主要溶液的配制 | 第45页 |
| 2. 实验方法 | 第45-48页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第45-46页 |
| ·重组抗原初步应用于ELISA 方法 | 第46-48页 |
| 3. 实验结果 | 第48-53页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第48-49页 |
| ·重组抗原ELISA 方法的初步研究 | 第49-52页 |
| ·不同包被抗原敏感性的比较 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第65-67页 |