摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-13页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-24页 |
1 猪圆环病毒(Porcine circovirus, PCV) | 第14-21页 |
·形态结构与理化特性 | 第14页 |
·病毒的培养特性 | 第14-15页 |
·基因组特征 | 第15页 |
·流行病学 | 第15-16页 |
·致病机理 | 第16页 |
·PCV2 相关的疾病 | 第16-17页 |
·诊断 | 第17-20页 |
·综合防制 | 第20-21页 |
2 单克隆抗体技术 | 第21-24页 |
·单克隆抗体的基本概念 | 第21页 |
·单克隆抗体技术的基本原理 | 第21页 |
·单克隆抗体的制备过程 | 第21-22页 |
·单克隆抗体的特点 | 第22页 |
·单克隆抗体技术的应用 | 第22页 |
·PCV2 单克隆抗体 | 第22-24页 |
第二章 单克隆抗体的制备及纯化 | 第24-37页 |
1 材料 | 第24-25页 |
·菌株、细胞和病毒 | 第24页 |
·实验动物 | 第24页 |
·主要试剂 | 第24页 |
·主要仪器及耗材 | 第24-25页 |
2 方法 | 第25-29页 |
·PCV2 Cap 蛋白的表达以及纯化 | 第25页 |
·免疫小鼠 | 第25-26页 |
·间接ELISA 方法的建立 | 第26页 |
·杂交瘤细胞株的制备 | 第26-27页 |
·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第27页 |
·阳性杂交瘤细胞的克隆 | 第27-28页 |
·杂交瘤细胞染色体分析 | 第28页 |
·阳性杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第28页 |
·腹水的制备与纯化 | 第28-29页 |
3 结果 | 第29-34页 |
·原核表达Cap 蛋白的纯化 | 第29页 |
·间接ELISA 方法最佳工作条件的建立 | 第29-30页 |
·免疫小鼠抗体水平监测 | 第30-31页 |
·饲养细胞的制备 | 第31页 |
·骨髓瘤细胞的制备 | 第31页 |
·细胞融合与单克隆杂交瘤细胞株的建立 | 第31页 |
·杂交瘤细胞染色体计数分析 | 第31-32页 |
·杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性试验 | 第32-33页 |
·腹水的制备与纯化 | 第33-34页 |
4 讨论 | 第34-37页 |
第三章 单克隆抗体的生物学性质鉴定及应用 | 第37-43页 |
1 材料 | 第37页 |
·细胞、质粒和病毒 | 第37页 |
·主要试剂 | 第37页 |
·主要仪器及耗材 | 第37页 |
2 方法 | 第37-39页 |
·单克隆抗体特性的鉴定 | 第37-38页 |
·单克隆抗体在Cap 蛋白亚细胞定位中的应用 | 第38-39页 |
3 结果 | 第39-41页 |
·单克隆抗体腹水效价的测定 | 第39页 |
·单克隆抗体类-亚类-亚型鉴定 | 第39页 |
·Western blot 鉴定 | 第39-40页 |
·间接免疫荧光试验 | 第40-41页 |
·Cap 蛋白亚细胞中的定位 | 第41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
第四章 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-48页 |
附录 | 第48-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
作者简介 | 第51页 |