| 中文摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-6页 |
| 1 绪论 | 第10-22页 |
| 1.1 立题依据及意义 | 第10页 |
| 1.2 研究背景 | 第10-19页 |
| 1.2.1 生物体内的氧化还原稳态 | 第10-11页 |
| 1.2.2 Nrf1的重要功能 | 第11-13页 |
| 1.2.3 Nrf1的基本结构 | 第13-16页 |
| 1.2.4 Nrf1的下游基因 | 第16-18页 |
| 1.2.5 Nrf1与Nrf2的差异 | 第18-19页 |
| 1.3 研究内容及目的 | 第19-20页 |
| 1.3.1 研究内容 | 第19页 |
| 1.3.2 研究目的 | 第19-20页 |
| 1.4 本课题创新之处 | 第20页 |
| 1.5 技术路线图 | 第20-22页 |
| 2 tBHQ刺激下Nrf1/2下游氧化还原相关基因的表达 | 第22-46页 |
| 2.1 前言 | 第22-23页 |
| 2.2 实验材料 | 第23-27页 |
| 2.2.1 实验细胞 | 第23页 |
| 2.2.2 相关设备及仪器 | 第23-24页 |
| 2.2.3 相关药品及试剂 | 第24-26页 |
| 2.2.4 药品及试剂的配制 | 第26-27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-35页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第27-29页 |
| 2.3.2 细胞总RNA提取 | 第29页 |
| 2.3.3 反转录PCR(RT-PCR) | 第29-30页 |
| 2.3.4 实时定量PCR(qRT-PCR) | 第30-31页 |
| 2.3.5 WesternBlot | 第31-35页 |
| 2.3.6 氧化还原刺激..tBHQ药物处理四种细胞系 | 第35页 |
| 2.4 实验结果 | 第35-44页 |
| 2.4.1 tBHQ刺激0-2h相关基因的表达 | 第35-36页 |
| 2.4.2 tBHQ刺激0-24h后Nrf1/2的表达 | 第36-39页 |
| 2.4.3 tBHQ刺激0-24h氧化还原相关基因的表达 | 第39-44页 |
| 2.5 讨论 | 第44-46页 |
| 3 DTT刺激下Nrf1/2下游氧化还原相关基因的表达 | 第46-60页 |
| 3.1 前言 | 第46页 |
| 3.2 实验材料 | 第46-47页 |
| 3.2.1 实验细胞 | 第46页 |
| 3.2.2 相关设备及仪器 | 第46页 |
| 3.2.3 相关药品及试剂 | 第46页 |
| 3.2.4 药品及试剂的配制 | 第46-47页 |
| 3.3 实验方法 | 第47-48页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第47页 |
| 3.3.2 细胞总RNA提取 | 第47页 |
| 3.3.3 反转录PCR(RT-PCR) | 第47页 |
| 3.3.4 实时定量PCR(qRT-PCR) | 第47页 |
| 3.3.5 WesternBlot | 第47页 |
| 3.3.6 氧化还原刺激..DTT药物处理四种细胞系 | 第47-48页 |
| 3.4 实验结果 | 第48-57页 |
| 3.4.1 DTT刺激0-2h相关基因的表达 | 第48-49页 |
| 3.4.2 DTT刺激0-24h后Nrf1/2的表达 | 第49-51页 |
| 3.4.3 DTT刺激0-24h氧化还原相关基因的表达 | 第51-57页 |
| 3.5 讨论 | 第57-60页 |
| 4 Nrf1/2对MT1E基因的差异性调控 | 第60-84页 |
| 4.1 前言 | 第60页 |
| 4.2 实验材料 | 第60-63页 |
| 4.2.1 实验细胞 | 第60页 |
| 4.2.2 相关设备及仪器 | 第60-61页 |
| 4.2.3 相关药品及试剂 | 第61-62页 |
| 4.2.4 药品及试剂的配制 | 第62-63页 |
| 4.3 实验方法 | 第63-71页 |
| 4.3.1 ARE位点质粒构建 | 第63-67页 |
| 4.3.2 高纯度质粒提取 | 第67-68页 |
| 4.3.3 WesternBlot | 第68页 |
| 4.3.4 细胞培养 | 第68页 |
| 4.3.5 质粒转染 | 第68-69页 |
| 4.3.6 双荧光素酶报告基因实验 | 第69-70页 |
| 4.3.7 活细胞成像 | 第70-71页 |
| 4.4 实验结果 | 第71-83页 |
| 4.4.1 Nrf1/2与MT1E-2×ARE1/2-Luc的相互作用 | 第71-72页 |
| 4.4.2 Nrf1/2与MT1E-6×ARE1/2-Luc的相互作用 | 第72-75页 |
| 4.4.3 Nrf1/2与MT1E-6×ARE1/2-pLuc的相互作用 | 第75-77页 |
| 4.4.4 Nrf1N端功能初探 | 第77-83页 |
| 4.5 讨论 | 第83-84页 |
| 5 结论与展望 | 第84-86页 |
| 5.1 主要结论 | 第84页 |
| 5.2 课题展望 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 附录 | 第94-95页 |
| A qRT-PCR引物 | 第94-95页 |
| B MT1E启动子区ARE位点引物 | 第95页 |
| C Nrf1(35)N和TCF11(35)N引物 | 第95页 |
