| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 一 文昌鱼模式动物化研究进展 | 第12-13页 |
| 1 文昌鱼是简单的发育生物学研究模型 | 第12页 |
| 2 文昌鱼模型中已经建立的研究技术 | 第12-13页 |
| 二 Tol2转座子系统 | 第13-19页 |
| 1 转基因技术 | 第13-15页 |
| 2 Tol2转座子系统概述 | 第15-19页 |
| 三 论文选题和研究目的 | 第19-20页 |
| 第二章 文昌鱼中转基因技术的建立 | 第20-32页 |
| 一 材料和方法 | 第20-26页 |
| 1 材料 | 第20-21页 |
| 2 方法 | 第21-26页 |
| 2.1 质粒构建与扩增 | 第21-22页 |
| 2.2 mRNA合成 | 第22页 |
| 2.3 转基因文昌鱼FO和F1的获得过程 | 第22-25页 |
| 2.4 Tol2系统在文昌鱼中的效率评估 | 第25-26页 |
| 二 结果 | 第26-30页 |
| 1 显微注射后的FO | 第26-28页 |
| 2 转基因F1的获得以及Tol2系统在文昌鱼中的效率 | 第28-30页 |
| 三 讨论 | 第30-32页 |
| 1 两个启动子的活性 | 第30页 |
| 2 Tol2转座子系统转基因技术在文昌鱼中成功建立 | 第30-31页 |
| 3 获得转基因文昌鱼的关键因素 | 第31-32页 |
| 第三章 mCherry报告基因在两个启动子控制下的表达谱分析 | 第32-51页 |
| 一 材料和方法 | 第33-38页 |
| 1 材料 | 第33页 |
| 2 方法 | 第33-38页 |
| 2.1 转基因F1不同时期胚胎的固定和RFP信号的观察 | 第33-34页 |
| 2.2 WISH | 第34-35页 |
| 2.2.1 RNA探针合成 | 第34页 |
| 2.2.2 WISH过程 | 第34-35页 |
| 2.3 Southern blot | 第35-37页 |
| 2.3.1 基因组DNA样品的制备 | 第35页 |
| 2.3.2 DNA探针的合成 | 第35页 |
| 2.3.3 DNA探针的质量评价 | 第35-36页 |
| 2.3.4 Southern blot试验过程 | 第36-37页 |
| 2.4 Inverse PCR | 第37-38页 |
| 二 结果 | 第38-49页 |
| 1 mCherry在Chordin启动子控制下的表达谱 | 第38页 |
| 2 mCherry在mylz2启动子控制下的表达谱 | 第38-42页 |
| 3 mCherry-mylz2片段的拷贝数 | 第42页 |
| 4 mCherry-mylz2片段的插入位点 | 第42-49页 |
| 三 讨论 | 第49-51页 |
| 1 Chordin-mCherry转基因品系 | 第49页 |
| 2 mylz2-mCherry转基因品系 | 第49-50页 |
| 3 Tol2系统在文昌鱼模型中的稳定性 | 第50-51页 |
| 总结与展望 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附件 | 第59-63页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文和参加的学术会议 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
