| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 英文缩略语表 | 第13-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-20页 |
| 1.1 抗菌肽及其生物活性 | 第14-16页 |
| 1.1.1 抗菌肽概述 | 第14页 |
| 1.1.2 抗菌肽的抗微生物作用机制 | 第14-15页 |
| 1.1.3 抗菌肽对宿主自身免疫功能的调节 | 第15-16页 |
| 1.2 鱼类抗菌肽的研究进展 | 第16页 |
| 1.3 Piscidin的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 细胞免疫相关因子概述 | 第17-19页 |
| 1.5 本论文的研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 第2章 斜带石斑鱼piscidin-1天然肽的分离鉴定 | 第20-29页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第20页 |
| 2.2.2 菌株 | 第20页 |
| 2.2.3 试剂 | 第20-21页 |
| 2.2.4 培养基 | 第21页 |
| 2.2.5 实验仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.3 方法 | 第22-24页 |
| 2.3.1 试剂的配制 | 第22页 |
| 2.3.2 斜带石斑鱼粘液组织总蛋白的提取 | 第22页 |
| 2.3.3 斜带石斑鱼粘液组织总蛋白凝胶过滤层析分离 | 第22-23页 |
| 2.3.4 凝胶过滤层析分离后的样品进行HPLC再次分离纯化 | 第23-24页 |
| 2.3.5 HPLC分离纯化后的样品进行质谱鉴定 | 第24页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第24-27页 |
| 2.4.1 斜带石斑鱼粘液组织总蛋白凝胶过滤层析分离 | 第24-25页 |
| 2.4.2 凝胶过滤层析分离后的样品进行HPLC再次分离纯化 | 第25-26页 |
| 2.4.3 HPLC分离纯化后的样品进行质谱鉴定 | 第26-27页 |
| 2.5 讨论 | 第27-28页 |
| 2.6 本章小结 | 第28-29页 |
| 第3章 斜带石斑鱼ecPis-1L和ecPis-1S鱼自身脾脏淋巴细胞的免疫调节研究 | 第29-60页 |
| 3.1 前言 | 第29页 |
| 3.2 材料与方法 | 第29-31页 |
| 3.2.1 实验动物 | 第29页 |
| 3.2.2 试剂 | 第29-30页 |
| 3.2.3 实验仪器设备 | 第30-31页 |
| 3.3 方法 | 第31-40页 |
| 3.3.1 斜带石斑鱼ecPis-1L和ecPis-1S多肽的合成 | 第31页 |
| 3.3.2 实验所需试剂的配制 | 第31页 |
| 3.3.3 斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞的分离培养 | 第31-32页 |
| 3.3.4 斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞计数 | 第32-33页 |
| 3.3.5 MTT法检测斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞的增殖 | 第33-34页 |
| 3.3.5.1 ecPis-1L和ecPis-1S与ConA和LPS协同对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞的增殖影响 | 第33-34页 |
| 3.3.5.2 ecPis-1L和ecPis-1S对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞的增殖影响 | 第34页 |
| 3.3.6 ecPis-1L和ecPis-1S对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞相关免疫基因的调节 | 第34-36页 |
| 3.3.6.1 斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞的分离培养 | 第34-35页 |
| 3.3.6.2 不同浓度ecPis-1L和ecPis-1S对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞处理 | 第35-36页 |
| 3.3.6.3 ecPis-1L和ecPis-1S对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞处理后RNA的提取 | 第36页 |
| 3.3.7 ecPis-1S和ecPis-1L对斜带石斑鱼免疫基因表达的影响 | 第36-39页 |
| 3.3.7.1 去除基因组DNA | 第36-37页 |
| 3.3.7.2 反转录反应步骤 | 第37页 |
| 3.3.7.3 斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞相关免疫基因的引物设计 | 第37-38页 |
| 3.3.7.4 荧光定量PCR检测Piscidin对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞在不同浓度处理下其相关免疫基因的表达量 | 第38-39页 |
| 3.3.8 统计学分析 | 第39-40页 |
| 3.4 结果与分析 | 第40-55页 |
| 3.4.1 细胞计数 | 第40页 |
| 3.4.2 ecPis-1L和ecPis-1S与ConA和LPS协同对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞的增殖影响 | 第40-42页 |
| 3.4.3 ecPis-1L和ecPis-1S分别单独对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞的增殖影响 | 第42-44页 |
| 3.4.4 ecPis-1S和ecPis-1L对斜带石斑鱼免疫基因表达的影响 | 第44-55页 |
| 3.4.4.1 ecPis-1S和ecPis-1L对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞IL-1和IL-8基因表达的影响 | 第44-45页 |
| 3.4.4.2 ecPis-1S和ecPis-1L对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞TNFα和NFAT基因表达的影响 | 第45-47页 |
| 3.4.4.3 ecPis-1S和ecPis-1L对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞cdk2和cdk4基因表达的影响 | 第47-48页 |
| 3.4.4.4 ecPis-1S和ecPis-1L对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞cycA和cycH基因表达的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.4.5 ecPis-1S和ecPis-1L对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞cdc6和cdc14基因表达的影响 | 第49-51页 |
| 3.4.4.6 ecPis-1S和ecPis-1L对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞MHCI和MHCII基因表达的影响 | 第51-52页 |
| 3.4.4.7 ecPis-1S和ecPis-1L对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞TGFβ和Smad基因表达的影响 | 第52-53页 |
| 3.4.4.8 ecPis-1S和ecPis-1L对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞RhoA和RAP1b基因表达的影响 | 第53-55页 |
| 3.4.4.9 ecPis-1S和ecPis-1L对斜带石斑鱼脾脏淋巴细胞ROCK基因表达的影响 | 第55页 |
| 3.5 讨论 | 第55-59页 |
| 3.6 本章小结 | 第59-60页 |
| 第4章 结论 | 第60-61页 |
| 4.1 主要研究结论 | 第60页 |
| 4.2 创新点 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 硕士期间学术成果 | 第66页 |
