摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第1章 前言 | 第9-15页 |
1.1 脂代谢紊乱与胰岛素抵抗 | 第9-10页 |
1.2 囊泡转运与肌动蛋白重塑(actinremodeling) | 第10-11页 |
1.3 CD36和GLUT4的主要功能 | 第11-12页 |
1.4 AMPK和CD36对组织摄取和利用脂肪酸的研究 | 第12-13页 |
1.5 PKCζ与CD36转运脂肪酸的作用密切相关 | 第13-15页 |
第2章 实验材料及方法 | 第15-29页 |
2.1 实验细胞 | 第15页 |
2.2 实验试剂及配制 | 第15-18页 |
2.2.0 主要试剂 | 第15-16页 |
2.2.1 主要试剂盒 | 第16页 |
2.2.2 主要抑制剂和激动剂 | 第16-17页 |
2.2.3 10x电泳缓冲液 | 第17页 |
2.2.4 1x电转缓冲液 | 第17页 |
2.2.5 IPBuffer缓冲液 | 第17页 |
2.2.6 StrippingBuffer缓冲液 | 第17-18页 |
2.2.7 HepesBuffer缓冲液 | 第18页 |
2.3 抗体 | 第18-19页 |
2.3.1 实验抗体 | 第18-19页 |
2.4 实验仪器 | 第19-20页 |
2.4.1 实验仪器 | 第19-20页 |
2.5 实验方法 | 第20-29页 |
2.5.1 L6骨骼肌细胞复苏 | 第20页 |
2.5.2 L6骨骼肌细胞消化传代 | 第20页 |
2.5.3 L6骨骼肌细胞分化培养 | 第20-21页 |
2.5.4 shRNA干预L6骨骼肌细胞 | 第21页 |
2.5.5 动物实验 | 第21页 |
2.5.6 Westernblot法检测蛋白水平 | 第21-23页 |
2.5.7 Surface膜蛋白提取 | 第23-24页 |
2.5.8 冰冻组织制作及切片免疫荧光步骤 | 第24-25页 |
2.5.9 免疫荧光染色 | 第25-26页 |
2.5.10 葡萄糖/脂肪酸摄取实验 | 第26-27页 |
2.5.11 细胞核与细胞质提取 | 第27-28页 |
2.5.12 统计学方法 | 第28-29页 |
第3章 实验结果 | 第29-45页 |
3.1 高脂小鼠模型实验 | 第29-31页 |
3.1.1 高脂喂养小鼠胰岛素抵抗时间确定 | 第29页 |
3.1.2 小鼠发生胰岛素抵抗前后血脂相关指标检测 | 第29-30页 |
3.1.3 小鼠发生胰岛素抵抗之前骨骼肌中脂肪酸摄取相关蛋白检测 | 第30-31页 |
3.1.4 小鼠发生胰岛素抵抗之前骨骼肌中CD36和GLUT4免疫荧光检测 | 第31页 |
3.2 L6骨骼肌细胞实验 | 第31-45页 |
3.2.1 高脂对L6骨骼细胞中CD36分布和表达的影响 | 第31-32页 |
3.2.2 棕榈酸(PA)处理不同时间对L6骨骼肌细胞胰岛素敏感性的影响 | 第32-33页 |
3.2.3 棕榈酸处理L6骨骼肌细胞可激活AMPK | 第33-34页 |
3.2.4 棕榈酸处理不同时间对L6骨骼肌细胞actin结构的影响. | 第34页 |
3.2.5 PA对于L6骨骼肌细胞摄取脂肪酸和葡萄糖的影响 | 第34-35页 |
3.2.6 脂肪酸类似物SSO对PA的抑制作用 | 第35-36页 |
3.2.7 Fyn对于PA引发信号通路的影响 | 第36-38页 |
3.2.8 Fyn对LKB1分布的影响 | 第38-39页 |
3.2.9 AMPK与PKCζ上下游关系的确定 | 第39-40页 |
3.2.10 PKCζ调控actin结构重塑 | 第40-41页 |
3.2.11 PKCζ对PA引发CD36上膜的影响 | 第41-42页 |
3.2.12 PKCζ通过调控actin结构重塑介导PA引发的CD36上膜 | 第42-44页 |
3.2.13 actin结构介导PA诱导L6骨骼肌细胞对脂肪酸的摄取.. | 第44-45页 |
第4章 讨论与结论 | 第45-49页 |
参考文献 | 第49-55页 |
附录 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第57页 |