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PKCζ介导高脂引发CD36向细胞膜转位的分子机制研究

摘要第3-4页
Abstract第4-5页
第1章 前言第9-15页
    1.1 脂代谢紊乱与胰岛素抵抗第9-10页
    1.2 囊泡转运与肌动蛋白重塑(actinremodeling)第10-11页
    1.3 CD36和GLUT4的主要功能第11-12页
    1.4 AMPK和CD36对组织摄取和利用脂肪酸的研究第12-13页
    1.5 PKCζ与CD36转运脂肪酸的作用密切相关第13-15页
第2章 实验材料及方法第15-29页
    2.1 实验细胞第15页
    2.2 实验试剂及配制第15-18页
        2.2.0 主要试剂第15-16页
        2.2.1 主要试剂盒第16页
        2.2.2 主要抑制剂和激动剂第16-17页
        2.2.3 10x电泳缓冲液第17页
        2.2.4 1x电转缓冲液第17页
        2.2.5 IPBuffer缓冲液第17页
        2.2.6 StrippingBuffer缓冲液第17-18页
        2.2.7 HepesBuffer缓冲液第18页
    2.3 抗体第18-19页
        2.3.1 实验抗体第18-19页
    2.4 实验仪器第19-20页
        2.4.1 实验仪器第19-20页
    2.5 实验方法第20-29页
        2.5.1 L6骨骼肌细胞复苏第20页
        2.5.2 L6骨骼肌细胞消化传代第20页
        2.5.3 L6骨骼肌细胞分化培养第20-21页
        2.5.4 shRNA干预L6骨骼肌细胞第21页
        2.5.5 动物实验第21页
        2.5.6 Westernblot法检测蛋白水平第21-23页
        2.5.7 Surface膜蛋白提取第23-24页
        2.5.8 冰冻组织制作及切片免疫荧光步骤第24-25页
        2.5.9 免疫荧光染色第25-26页
        2.5.10 葡萄糖/脂肪酸摄取实验第26-27页
        2.5.11 细胞核与细胞质提取第27-28页
        2.5.12 统计学方法第28-29页
第3章 实验结果第29-45页
    3.1 高脂小鼠模型实验第29-31页
        3.1.1 高脂喂养小鼠胰岛素抵抗时间确定第29页
        3.1.2 小鼠发生胰岛素抵抗前后血脂相关指标检测第29-30页
        3.1.3 小鼠发生胰岛素抵抗之前骨骼肌中脂肪酸摄取相关蛋白检测第30-31页
        3.1.4 小鼠发生胰岛素抵抗之前骨骼肌中CD36和GLUT4免疫荧光检测第31页
    3.2 L6骨骼肌细胞实验第31-45页
        3.2.1 高脂对L6骨骼细胞中CD36分布和表达的影响第31-32页
        3.2.2 棕榈酸(PA)处理不同时间对L6骨骼肌细胞胰岛素敏感性的影响第32-33页
        3.2.3 棕榈酸处理L6骨骼肌细胞可激活AMPK第33-34页
        3.2.4 棕榈酸处理不同时间对L6骨骼肌细胞actin结构的影响.第34页
        3.2.5 PA对于L6骨骼肌细胞摄取脂肪酸和葡萄糖的影响第34-35页
        3.2.6 脂肪酸类似物SSO对PA的抑制作用第35-36页
        3.2.7 Fyn对于PA引发信号通路的影响第36-38页
        3.2.8 Fyn对LKB1分布的影响第38-39页
        3.2.9 AMPK与PKCζ上下游关系的确定第39-40页
        3.2.10 PKCζ调控actin结构重塑第40-41页
        3.2.11 PKCζ对PA引发CD36上膜的影响第41-42页
        3.2.12 PKCζ通过调控actin结构重塑介导PA引发的CD36上膜第42-44页
        3.2.13 actin结构介导PA诱导L6骨骼肌细胞对脂肪酸的摄取..第44-45页
第4章 讨论与结论第45-49页
参考文献第49-55页
附录第55-56页
致谢第56-57页
攻读硕士学位期间的研究成果第57页

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