| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-8页 |
| 第一章 靶向蛋白精氨酸甲基转移酶(PRMT)的抑制剂概述 | 第15-36页 |
| 1.1 引言 | 第15-22页 |
| 1.1.1 PRMT的生物学背景 | 第15-18页 |
| 1.1.2 PRMT与疾病的关系 | 第18-22页 |
| 1.2 靶向蛋白精氨酸甲基转移酶的药物研发现状 | 第22-34页 |
| 1.2.1 蛋白精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)的抑制剂发现与设计 | 第23-26页 |
| 1.2.2 蛋白精氨酸甲基转移酶3(PRMT3)的抑制剂发现与设计 | 第26-27页 |
| 1.2.3 蛋白精氨酸甲基转移酶4(PRMT4)的抑制剂发现与设计 | 第27-29页 |
| 1.2.4 蛋白精氨酸甲基转移酶5(PRMT5)的抑制剂发现与设计 | 第29-30页 |
| 1.2.5 蛋白精氨酸甲基转移酶6(PRMT6)的抑制剂发现与设计 | 第30-31页 |
| 1.2.6 蛋白精氨酸甲基转移酶7(PRMT7)的抑制剂发现与设计 | 第31-32页 |
| 1.2.7 靶向PRMTI型酶的抑制剂发现与设计 | 第32-33页 |
| 1.2.8 靶向PRMT的双底物抑制剂的发现与设计 | 第33-34页 |
| 1.3 总结与展望 | 第34-36页 |
| 第二章 靶向PRMTI型酶的抑制剂发现与活性验证 | 第36-46页 |
| 2.1 引言 | 第36-37页 |
| 2.2 研究方法 | 第37-41页 |
| 2.2.1 基于结构的虚拟筛选 | 第37-38页 |
| 2.2.2 PRMT1的蛋白表达与纯化 | 第38-39页 |
| 2.2.3 PRMT1 的时间分辨荧光(TR-FRET)酶活检测实验 | 第39-40页 |
| 2.2.4 PRMT的放射性同位素酶活检测实验 | 第40页 |
| 2.2.5 核磁共振波谱实验(NMR) | 第40-41页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第41-44页 |
| 2.3.1 针对PRMT1底物口袋区域的虚拟筛选 | 第41-42页 |
| 2.3.2 PRMT1的表达与纯化 | 第42页 |
| 2.3.3 虚拟筛选所得化合物的分子水平活性确证 | 第42-44页 |
| 2.4 结论 | 第44-46页 |
| 第三章 靶向PRMTI型酶的抑制剂结构改造与优化 | 第46-82页 |
| 3.1 引言 | 第46-47页 |
| 3.2 研究方法 | 第47-69页 |
| 3.2.1 化合物的结合模式分析 | 第47页 |
| 3.2.2 基于底物模拟策略的化合物合成 | 第47-59页 |
| 3.2.3 提升选择性和类药性质的化合物合成 | 第59-68页 |
| 3.2.4 表观遗传酶选择性实验 | 第68-69页 |
| 3.2.5 蛋白热稳定性实验 | 第69页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第69-80页 |
| 3.3.1 B3的结合模式分析 | 第69-70页 |
| 3.3.2 基于底物模拟策略的化合物改造、合成与构效分析 | 第70-73页 |
| 3.3.3 C22的作用机制研究与选择性测试 | 第73-76页 |
| 3.3.4 提升选择性与类药性质的化合物改造、合成与构效分析 | 第76-79页 |
| 3.3.5 C41的选择性及蛋白热稳定性实验 | 第79-80页 |
| 3.4 结论 | 第80-82页 |
| 第四章 PRMTI型酶抑制剂的细胞水平活性验证及其抗白血病作用机制研究 | 第82-94页 |
| 4.1 引言 | 第82-83页 |
| 4.2 研究方法 | 第83-87页 |
| 4.2.1 白血病细胞培养及细胞增殖检测 | 第83-84页 |
| 4.2.2 PRMT1基因在白血病细胞中的敲减实验 | 第84页 |
| 4.2.3 蛋白质印迹法在白血病细胞中检测精氨酸甲基化修饰变化 | 第84-85页 |
| 4.2.4 细胞周期与细胞凋亡实验 | 第85-86页 |
| 4.2.5 荧光定量 PCR(qPCR)检测靶基因表达水平 | 第86-87页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第87-92页 |
| 4.3.1 C22化合物对白血病细胞的增殖影响 | 第87-88页 |
| 4.3.2 PRMT1基因敲减验证及白血病细胞增殖抑制检测 | 第88-89页 |
| 4.3.3 C22对精氨酸甲基化修饰水平的调控 | 第89-90页 |
| 4.3.4 C22对白血病细胞周期、凋亡和白血病细胞关键致病基因的影响 | 第90-92页 |
| 4.4 结论 | 第92-94页 |
| 第五章 PRMTⅠ型酶抑制剂的抗肾透明细胞癌(ccRCC)作用机制研究 | 第94-103页 |
| 5.1 引言 | 第94-95页 |
| 5.2 研究方法 | 第95-97页 |
| 5.2.1 ccRCC细胞培养及细胞增殖检测 | 第95页 |
| 5.2.2 PRMT1基因在肾透明细胞癌中的敲减实验 | 第95-96页 |
| 5.2.3 蛋白质印迹法在ccRCC细胞中检测精氨酸甲基化修饰变化 | 第96页 |
| 5.2.4 克隆形成实验 | 第96页 |
| 5.2.5 细胞周期实验 | 第96页 |
| 5.2.6 A498裸鼠移植瘤模型的建立及体内药效学评价 | 第96-97页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第97-102页 |
| 5.3.1 C41 对ccRCC细胞的增殖影响 | 第97-98页 |
| 5.3.2 C41 在ccRCC细胞中对精氨酸甲基修饰水平的调控 | 第98页 |
| 5.3.3 PRMT1 基因敲减验证及对ccRCC细胞增殖影响 | 第98-99页 |
| 5.3.4 C41 对ccRCC细胞的克隆形成和周期的影响 | 第99-100页 |
| 5.3.5 C41对人肾透明细胞癌A498的体内药效学研究 | 第100-102页 |
| 5.4 结论 | 第102-103页 |
| 论文总结 | 第103-106页 |
| 参考文献 | 第106-127页 |
| 附录 | 第127-129页 |
| 致谢 | 第129-131页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第131-133页 |
