致谢 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
1 文献综述 | 第8-16页 |
1.1 木聚糖酶及其应用 | 第8-9页 |
1.1.1 木聚糖酶在造纸上的应用 | 第8页 |
1.1.2 木聚糖酶在饲料工业中的应用 | 第8页 |
1.1.3 木聚糖酶在食品工业中的应用 | 第8-9页 |
1.1.4 木聚糖酶在麻类纺织行业中的应用 | 第9页 |
1.1.5 木聚糖酶在新领域中的应用前景 | 第9页 |
1.2 木聚糖酶的分类及结构特征 | 第9-11页 |
1.2.1 木聚糖酶的分类 | 第9-10页 |
1.2.2 F/10家族木聚糖酶的特征 | 第10页 |
1.2.3 G/11家族木聚糖酶的特征 | 第10-11页 |
1.3 葡聚糖酶 | 第11页 |
1.4 酶分子改造 | 第11-15页 |
1.4.1 酶分子改造的方法 | 第11-12页 |
1.4.2 G/11家族木聚糖酶提高热稳定性理性设计 | 第12-14页 |
1.4.3 酶分子融合研究 | 第14-15页 |
1.5 立题背景 | 第15-16页 |
2 引言 | 第16-17页 |
3 材料和方法 | 第17-25页 |
3.1 材料 | 第17-19页 |
3.1.1 菌株和载体 | 第17页 |
3.1.2 实验药品 | 第17页 |
3.1.3 常用试剂配方 | 第17-18页 |
3.1.4 仪器设备 | 第18-19页 |
3.2 实验流程 | 第19-21页 |
3.2.1 融合基因的构建 | 第19-20页 |
3.2.2 融合基因的原核表达纯化及性质鉴定 | 第20-21页 |
3.3 实验方法 | 第21-25页 |
3.3.1 质粒DNA的提取 | 第21页 |
3.3.2 构建融合基因 | 第21-23页 |
3.3.3 表达载体的构建 | 第23页 |
3.3.4 木聚糖酶基因原核表达 | 第23页 |
3.3.5 表达产物的纯化 | 第23-24页 |
3.3.6 酶学性质分析 | 第24-25页 |
4 结果与分析 | 第25-36页 |
4.1 融合基因的构建与表达 | 第25-36页 |
4.1.1 α螺旋的替换 | 第25-26页 |
4.1.2 PCR扩增融合基因 | 第26-27页 |
4.1.3 重组载体的构建 | 第27-28页 |
4.1.4 重组质粒测序比对 | 第28-31页 |
4.1.5 融合蛋白的表达及纯化 | 第31-32页 |
4.1.6 酶学性质分析 | 第32-36页 |
4.1.6.1 最适pH测定(pHopt) | 第32-33页 |
4.1.6.2 最适温度测定(Topt) | 第33页 |
4.1.6.3 半衰期测定(t1/2) | 第33-34页 |
4.1.6.4 酶促动力学参数 | 第34-36页 |
5 结论与讨论 | 第36-38页 |
5.1 结论 | 第36页 |
5.2 讨论 | 第36-37页 |
5.3 展望 | 第37-38页 |
参考文献 | 第38-41页 |
ABSTRACT | 第41-42页 |