| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 引言 | 第8-19页 |
| 1.1 p53研究进展 | 第8-11页 |
| 1.1.1 p53基因和p53基因突变 | 第8页 |
| 1.1.2 p53蛋白概述及结构特性 | 第8-9页 |
| 1.1.3 p53与MDM2/MDM4相互作用 | 第9-10页 |
| 1.1.4 p53与肿瘤治疗 | 第10-11页 |
| 1.2 基因敲除简介 | 第11-13页 |
| 1.2.1 基因敲除技术 | 第11-12页 |
| 1.2.2 CRISPER/Cas9系统 | 第12-13页 |
| 1.2.3 p53基因敲除 | 第13页 |
| 1.3 p53与细胞凋亡 | 第13-14页 |
| 1.3.1 细胞凋亡概述 | 第13页 |
| 1.3.2 p53参与的细胞凋亡途径 | 第13-14页 |
| 1.4 p53与线粒体介导凋亡的关系 | 第14-17页 |
| 1.4.1 线粒体简介 | 第14页 |
| 1.4.2 线粒体与自噬、凋亡的关系 | 第14-15页 |
| 1.4.3 p53与线粒体凋亡途径 | 第15-16页 |
| 1.4.4 线粒体膜电位与细胞凋亡 | 第16-17页 |
| 1.5 本课题主要研究内容及创新之处 | 第17-19页 |
| 1.5.1 主要研究内容 | 第17页 |
| 1.5.2 本课题的特色与创新之处 | 第17-19页 |
| 第二章 材料与方法 | 第19-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-24页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第19页 |
| 2.1.2 细胞株 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.1.4 主要试剂及试剂盒 | 第20-22页 |
| 2.1.5 常用溶液配制 | 第22-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-39页 |
| 2.2.1 重组质粒构建 | 第24-28页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第28-29页 |
| 2.2.3 稳定转染细胞株构建 | 第29-30页 |
| 2.2.4 获取目的基因 | 第30-31页 |
| 2.2.5 MTT细胞活力检测、耐药实验 | 第31页 |
| 2.2.6 蛋白质免疫印迹(Western Blot) | 第31-34页 |
| 2.2.7 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) | 第34-35页 |
| 2.2.8 细胞的DNA/RNA提取 | 第35-36页 |
| 2.2.9 T7核酸内切酶(T7E1) | 第36-37页 |
| 2.2.10 线粒体膜电位染色 | 第37-39页 |
| 第三章 结果分析 | 第39-58页 |
| 3.1 p53基因敲除 | 第39-45页 |
| 3.1.1 p53基因敲除细胞株的构建及验证 | 第39-43页 |
| 3.1.2 wtp53细胞抗药性的影响 | 第43-45页 |
| 3.2 表达不同p53蛋白及耐药性影响 | 第45-48页 |
| 3.2.1 不同p53对细胞抗药性的影响 | 第45页 |
| 3.2.2 表达不同p53稳定细胞株蛋白与纯化 | 第45-48页 |
| 3.3 不同p53与线粒体基因的关系 | 第48-52页 |
| 3.3.1 不同p53与线粒体基因mtND1和mtND2结合 | 第48-50页 |
| 3.3.2 p53对线粒体基因mtND1和mtND2表达的调控 | 第50-52页 |
| 3.4 p53与线粒体膜电位的关系 | 第52-58页 |
| 结论与展望 | 第58-60页 |
| 结论 | 第58页 |
| 展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 附录 | 第65-70页 |
| 个人简历 | 第70页 |
