| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 一 引言 | 第9-13页 |
| 1 稻瘟病及稻瘟病菌 | 第9-10页 |
| 2 脂肪酶和脂肪酶基因 | 第10-12页 |
| 2.1 脂肪酶 | 第10-11页 |
| 2.2 植物病原真菌的脂肪酶研究进展 | 第11-12页 |
| 3 基因敲除技术 | 第12页 |
| 4 本研究目的和意义 | 第12-13页 |
| 二 材料与方法 | 第13-24页 |
| 1 材料 | 第13-14页 |
| 1.1 供试菌株 | 第13页 |
| 1.2 供试植物 | 第13页 |
| 1.3 实验用培养基 | 第13页 |
| 1.4 生化试剂 | 第13-14页 |
| 2 实验方法 | 第14-24页 |
| 2.1 稻瘟病菌MoL1蛋白序列获得和生物学分析 | 第14页 |
| 2.2 普通PCR反应体系 | 第14-15页 |
| 2.3 酶切连接 | 第15页 |
| 2.4 DNA片段凝胶回收(Tiangen) | 第15-16页 |
| 2.5 质粒DNA提取 | 第16页 |
| 2.6 大肠杆菌(DH5 α)感受态细胞的制备 | 第16-17页 |
| 2.7 大肠杆菌(DH5 α)的转化 | 第17页 |
| 2.8 稻瘟病菌原生质体的制备和转化 | 第17-18页 |
| 2.9 稻瘟病菌DNA粗提 | 第18页 |
| 2.10 稻瘟病菌DNA精提 | 第18-19页 |
| 2.11 稻瘟病菌目的基因的敲除 | 第19-20页 |
| 2.12 稻瘟病菌MOL1-GFP融合互补载体构建 | 第20-21页 |
| 2.13 稻瘟病的表型分析 | 第21-22页 |
| 2.14 MoL1的真核表达分析 | 第22-24页 |
| 三 结果与分析 | 第24-38页 |
| 1 稻瘟病菌中酵母脂肪酶Sclip同源基因的生物学分析 | 第24-30页 |
| 1.1 稻瘟病菌中酵母脂肪酶Sclip同源基因的获得及其氨基酸序列 | 第24页 |
| 1.2 稻瘟病菌中MOL1的同源基因蛋白结构域保守性分析 | 第24-26页 |
| 1.3 在不同物种中脂肪酶基因的进化关系 | 第26-30页 |
| 2 稻瘟病菌MOL1敲除突变体的筛选和验证 | 第30-31页 |
| 3 突变体的表型分析 | 第31-38页 |
| 3.1 稻瘟病菌MOL1的突变体菌落形态和生长速率 | 第31-33页 |
| 3.2 稻瘟病菌MOL1的突变体产孢量统计 | 第33页 |
| 3.3 稻瘟病菌MOL1突变体的分生孢子萌发和附着胞的形成情况 | 第33-34页 |
| 3.4 稻瘟病菌MOL1敲除突变体的致病性 | 第34-35页 |
| 3.5 稻瘟病菌MOL1蛋白在菌丝中的亚细胞定位 | 第35-36页 |
| 3.6 稻瘟病菌MOL1的表达和纯化 | 第36-38页 |
| 四 小结与讨论 | 第38-40页 |
| 展望 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-48页 |
| 附录 本研究所用引物 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49页 |
