| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 1 引言 | 第9-14页 |
| 1.1 稻瘟病侵染循环特点 | 第9-10页 |
| 1.2 产孢在稻瘟病菌生活周期中的重要性及其调控机制 | 第10页 |
| 1.3 PAK家族蛋白 | 第10-12页 |
| 1.3.1 PAK蛋白家族及其结构 | 第10-11页 |
| 1.3.2 PAK的生物学功能 | 第11-12页 |
| 1.3.3 真菌PAK激酶 | 第12页 |
| 1.4 Septins蛋白家族及其相关功能 | 第12-13页 |
| 1.5 本研究的意义 | 第13-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-27页 |
| 2.1 材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 供试菌株和植株 | 第14页 |
| 2.1.2 质粒 | 第14-15页 |
| 2.1.3 实验培养基 | 第15页 |
| 2.1.4 试剂 | 第15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-27页 |
| 2.2.1 生物信息学方法 | 第16页 |
| 2.2.2 稻瘟病菌产孢阶段RNA的提取 | 第16-17页 |
| 2.2.3 RNA的反转录 | 第17-18页 |
| 2.2.4 稻瘟病菌基因敲除方法 | 第18页 |
| 2.2.5 常规PCR体系及荧光定量PCR | 第18-19页 |
| 2.2.6 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第19页 |
| 2.2.7 大肠杆菌的转化及转化子验证 | 第19-20页 |
| 2.2.8 稻瘟病菌原生质体的制备 | 第20页 |
| 2.2.9 稻瘟病菌原生质体的转化 | 第20-21页 |
| 2.2.10 稻瘟病菌菌丝DNA粗提 | 第21页 |
| 2.2.11 Pull down | 第21-24页 |
| 2.2.12 稻瘟病菌相关表型分析 | 第24-25页 |
| 2.2.12.1 稻瘟病菌生长速度测定 | 第24页 |
| 2.2.12.2 产孢量统计 | 第24页 |
| 2.2.12.3 分生孢子萌发以及附着胞形成 | 第24页 |
| 2.2.12.4 分生孢子隔膜形成率 | 第24-25页 |
| 2.2.12.5 分生孢子梗生长情况观察 | 第25页 |
| 2.2.11.6 分生孢子细胞核形成情况 | 第25页 |
| 2.2.12.7 致病性测定 | 第25页 |
| 2.2.13 产孢阶段的共定位观察 | 第25-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-43页 |
| 3.1 候选基因在Chm1突变体中的相对表达量 | 第27页 |
| 3.2 生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 3.3 所选基因突变体与互补菌株的获得 | 第28-29页 |
| 3.4 MoSep3的功能分析 | 第29-34页 |
| 3.4.1 ΔMosep3菌落形态观察及生长速度测定 | 第29-30页 |
| 3.4.2 ΔMosep3的产孢量统计 | 第30页 |
| 3.4.3 ΔMoSep3的分生孢子梗形成情况 | 第30-31页 |
| 3.4.4 ΔMosep3的分生孢子形态 | 第31-32页 |
| 3.4.5 ΔMosep3的细胞核分布 | 第32-33页 |
| 3.4.6 ΔMosep3致病性分析 | 第33-34页 |
| 3.5 MoSep3与Chm1之间的互作关系验证 | 第34-35页 |
| 3.6 MoSep3与Chm1产孢阶段荧光共定位 | 第35-37页 |
| 3.7 MoUbr2的功能分析 | 第37-39页 |
| 3.7.1 ΔMoubr2菌落形态观察及生长速度测定 | 第37页 |
| 3.7.2 ΔMoubr2的产孢量统计 | 第37-38页 |
| 3.7.3 ΔMoubr2分生孢子萌发和附着胞形成 | 第38-39页 |
| 3.7.4 ΔMoubr2致病性分析 | 第39页 |
| 3.8 MoFre3的功能分析 | 第39-43页 |
| 3.8.1 ΔMofre3菌落形态观察及生长速度测定 | 第39-40页 |
| 3.8.2 ΔMofre3的产孢量统计 | 第40页 |
| 3.8.3 ΔMoFre3分生孢子萌发和附着胞形成 | 第40-41页 |
| 3.8.4 ΔMofre3致病性分析 | 第41-43页 |
| 4 小结与讨论 | 第43-46页 |
| 4.1 MoUbr2和MoFre3的缺失不影响稻瘟病菌的生长和致病性 | 第43页 |
| 4.2 MoSep3在调节稻瘟病菌的生长及致病性方面具有重要的作用 | 第43-44页 |
| 4.3 Chm1与MoSep3可能共同参与了稻瘟病菌的分生孢子形成 | 第44-46页 |
| 5 展望 | 第46-48页 |
| 5.1 MoSep3和Chm1调控稻瘟病菌的致病性的深入研究 | 第46页 |
| 5.2 MoSep3与Chm1在附着胞及侵入栓阶段的的共定位 | 第46-47页 |
| 5.3 寻找Chm1对MoSep3的磷酸化位点 | 第47页 |
| 5.4 MoRac1-Chm1-MoSep3的进一步验证 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
| 附录 本研究所用引物 | 第53-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
