摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第1章 引言 | 第10-14页 |
1.1 目的和意义 | 第10页 |
1.2 MyD88和Tollip基因研究进展 | 第10-12页 |
1.3 主要研究内容和技术路线 | 第12-14页 |
1.3.1 主要研究内容 | 第12-13页 |
1.3.2 技术路线 | 第13-14页 |
第2章 材料与方法 | 第14-28页 |
2.1 材料 | 第14-17页 |
2.1.1 实验动物 | 第14页 |
2.1.2 主要试剂和仪器 | 第14-15页 |
2.1.3 主要溶液配制 | 第15-17页 |
2.1.4 引物 | 第17页 |
2.2 实验方法 | 第17-28页 |
2.2.1 总RNA的提取和去除DNA的污染 | 第18-19页 |
2.2.2 合成RT-PCRcDNA第一链和PCR扩增获取基因cDNA片段 | 第19页 |
2.2.3 SMART-RACE技术获取基因全长 | 第19-21页 |
2.2.4 割胶纯化基因片段 | 第21页 |
2.2.5 DNA与质粒载体连接 | 第21-22页 |
2.2.6 感受态细胞的转化及筛选 | 第22页 |
2.2.7 质粒插入片段的检测 | 第22页 |
2.2.8 质粒测序和质粒提取 | 第22-23页 |
2.2.9 构建真核重组表达载体 | 第23-25页 |
2.2.10 基因过表达对HEK-293T细胞TNF-a,IL6,MXA表达水平的影响 | 第25-27页 |
2.2.11 目的基因的生物信息学分析 | 第27页 |
2.2.12 数据获取处理与分析 | 第27-28页 |
第3章 结果 | 第28-49页 |
3.1 日本鳗鲡各组织总RNA的抽提结果 | 第28页 |
3.2 RACE-PCR扩增结果 | 第28页 |
3.3 AjMyD88和AjTollip基因序列分析 | 第28-37页 |
3.3.1 AjMyD88基因的序列分析 | 第28-33页 |
3.3.2 AjTollip基因的序列分析 | 第33-37页 |
3.4 AjMyD88和AjTollip基因在体内和体外表达分析 | 第37-47页 |
3.4.1 AjMyD88基因在日本鳗鲡各组织中表达分析 | 第37-40页 |
3.4.2 AjMyD88基因在JELL的表达变化 | 第40-42页 |
3.4.3 AjTollip基因在日本鳗鲡各组织中表达分析 | 第42-45页 |
3.4.4 AjTollip基因在JELL的表达变化 | 第45-47页 |
3.5 AjMyD88和AjTollip基因在人类293细胞系中的过表达 | 第47-49页 |
第4章 讨论 | 第49-54页 |
4.1 AjMyD88功能分析 | 第49-52页 |
4.2 AjTollip功能分析 | 第52-54页 |
第5章 结论和展望 | 第54-56页 |
5.1 结论 | 第54-55页 |
5.2 展望 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
在学期间发表的学术论文 | 第61页 |