| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1.文献综述 | 第9-21页 |
| 1.1 木聚糖酶 | 第9-13页 |
| 1.1.1 木聚糖酶的来源及性质 | 第9-10页 |
| 1.1.2 木聚糖酶的分类 | 第10-11页 |
| 1.1.3 木聚糖酶的催化机理 | 第11-12页 |
| 1.1.4 木聚糖酶的应用 | 第12-13页 |
| 1.2 木聚糖酶抑制蛋白 | 第13-18页 |
| 1.2.1 TAXI型抑制蛋白的抑制特性 | 第13-15页 |
| 1.2.2 TLXI型抑制蛋白的抑制特性 | 第15页 |
| 1.2.3 XIP型抑制蛋白抑制特性 | 第15-18页 |
| 1.3 木聚糖酶抑制蛋白在谷物中存在的生物学意义 | 第18页 |
| 1.4 木聚糖酶抑制蛋白对木聚糖酶应用领域的影响 | 第18-20页 |
| 1.4.1 小麦饲用和加工领域的影响 | 第18-19页 |
| 1.4.2 谷朊粉-淀粉分离 | 第19页 |
| 1.4.3 面包烘焙 | 第19-20页 |
| 1.5 筛选抗木聚糖酶抑制蛋白抑制的木聚糖酶必要性 | 第20-21页 |
| 2 引言 | 第21-22页 |
| 3 材料与方法 | 第22-33页 |
| 3.1 材料 | 第22-24页 |
| 3.1.1 菌株和载体 | 第22页 |
| 3.1.2 试剂和溶液 | 第22-23页 |
| 3.1.3 仪器设备 | 第23-24页 |
| 3.2 实验流程 | 第24-25页 |
| 3.3 实验方法 | 第25-33页 |
| 3.3.1 目的基因的获得 | 第25-27页 |
| 3.3.2 重组质粒pET20b-X4模板的消解 | 第27页 |
| 3.3.3 转化 | 第27-28页 |
| 3.3.4 阳性转化子的筛选及保存 | 第28页 |
| 3.3.5 木聚糖酶基因在大肠杆菌中的原核表达 | 第28-29页 |
| 3.3.6 小麦木聚糖酶抑制蛋白xip在毕赤酵母总的表达检测 | 第29页 |
| 3.3.7 SDS-PAGE电泳分析 | 第29页 |
| 3.3.8 粗酶的纯化 | 第29-30页 |
| 3.3.9 纯酶的性质分析 | 第30-33页 |
| 4 结果和分析 | 第33-48页 |
| 4.1 五个关键作用位点突变体的获得及性质研究 | 第33-36页 |
| 4.1.1 突变体位点的确定 | 第33页 |
| 4.1.2 突变基因的获得 | 第33-35页 |
| 4.1.3 五个突变体酶活性及抑制率测定 | 第35-36页 |
| 4.2 非关键位点突变体酶活及抑制率的测定 | 第36-38页 |
| 4.2.1 突变体位点的确定 | 第36-37页 |
| 4.2.2 突变体酶活及抑制率的测定 | 第37-38页 |
| 4.3 与不受抑制木聚糖酶比对所得三个突变体的性质研究 | 第38-42页 |
| 4.3.1 突变体位点的确定 | 第38-40页 |
| 4.3.2 突变体基因的获得 | 第40-41页 |
| 4.3.3 突变体酶活及抑制率测定 | 第41-42页 |
| 4.4 组合突变体性质研究 | 第42页 |
| 4.4.1 突变体位点的确定 | 第42页 |
| 4.5 优良突变体纯酶的性质研究 | 第42-48页 |
| 4.5.1 突变体的纯化 | 第42-43页 |
| 4.5.2 纯酶的最适pH | 第43-44页 |
| 4.5.3 纯酶的最适温度 | 第44页 |
| 4.5.4 纯酶的热稳定性 | 第44-45页 |
| 4.5.5 纯酶动力学分析 | 第45-47页 |
| 4.5.6 相同摩尔数下酶活及抑制率的测定 | 第47-48页 |
| 5 结论和讨论 | 第48-50页 |
| 5.1 结论 | 第48页 |
| 5.2 讨论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| ABSTRACT | 第54-55页 |
