| 致谢 | 第4-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 文献综述 | 第11-17页 |
| 1.1 茶氨酸及其代谢相关酶的研究 | 第11-13页 |
| 1.1.1 茶氨酸的理化性质 | 第11页 |
| 1.1.2 茶氨酸在茶树体内的分布 | 第11页 |
| 1.1.3 茶氨酸的生理功能 | 第11-12页 |
| 1.1.4 茶树体内茶氨酸的代谢 | 第12-13页 |
| 1.2 茶氨酸合成相关酶 | 第13-14页 |
| 1.2.1 茶氨酸合成酶 | 第13页 |
| 1.2.2 谷氨酰胺合成酶 | 第13-14页 |
| 1.3 γ-谷氨酰基转肽酶 | 第14-16页 |
| 1.3.1 γ-谷氨酰基转肽酶研究现状 | 第14页 |
| 1.3.2 γ-谷氨酰基转肽酶的来源 | 第14-15页 |
| 1.3.3 GGT的结构 | 第15页 |
| 1.3.4 GGT催化性质 | 第15-16页 |
| 1.3.5 GGT的应用前景 | 第16页 |
| 1.4 毛状根表达系统 | 第16-17页 |
| 2 引言 | 第17-19页 |
| 2.1 立题依据及意义 | 第17页 |
| 2.2 研究基础 | 第17页 |
| 2.3 研究内容和技术路线 | 第17-19页 |
| 2.3.1 研究内容 | 第17-18页 |
| 2.3.2 技术路线 | 第18-19页 |
| 3 材料与方法 | 第19-37页 |
| 3.1 材料、试剂与仪器 | 第19-22页 |
| 3.1.1 材料 | 第19页 |
| 3.1.2 试剂 | 第19页 |
| 3.1.3 主要实验试剂配方 | 第19-21页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第21-22页 |
| 3.2 实验方法 | 第22-37页 |
| 3.2.1 引物设计 | 第22页 |
| 3.2.2 总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 3.2.3 cDNA第一链的合成 | 第23-24页 |
| 3.2.4 茶树不同器官CsGGT2/CsGGT4相对表达量的检测 | 第24-25页 |
| 3.2.5 茶树不同器官茶氨酸含量的测定 | 第25页 |
| 3.2.6 CsGGT2/CsGGT4的克隆及其原核表达与酶活检测 | 第25-32页 |
| 3.2.7 CsGGT2/CsGGT4转大豆发根酶活检测 | 第32-37页 |
| 4 结果与分析 | 第37-48页 |
| 4.1 茶树γ-谷氨酰基转肽酶基因(CsGGT)的克隆及生物信息学分析 | 第37-40页 |
| 4.1.1 茶树幼根RNA的提取及检测 | 第37页 |
| 4.1.2 CsGGT的扩增及序列分析 | 第37-38页 |
| 4.1.3 CsGGT蛋白三级结构预测 | 第38-39页 |
| 4.1.4 CsGGT与其他物种GGT的多序列比对 | 第39-40页 |
| 4.1.5 CsGGT2/CsGGT4蛋白系统进化树构建 | 第40页 |
| 4.2 茶树不同器官和组织中CsGGT2/CsGGT4的相对表达量分析 | 第40-41页 |
| 4.3 茶树不同器官茶氨酸含量的检测 | 第41-42页 |
| 4.4 茶树γ-谷氨酰基转肽酶基因(CsGGT)的功能分析 | 第42-48页 |
| 4.4.1 CsGGT2/CsGGT4原核表达功能分析 | 第42-46页 |
| 4.4.2 CsGGT2/CsGGT4转基因大豆酶活检测 | 第46-48页 |
| 5 讨论 | 第48-50页 |
| 5.1 “舒茶早”不同器官CsGGT2/CsGGT4的相对表达量与茶氨酸含量的分析 | 第48页 |
| 5.2 CsGGT2/CsGGT4的原核表达功能验证 | 第48-49页 |
| 5.3 CsGGT2/CsGGT4的真核表达功能验证 | 第49-50页 |
| 6 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 A. Cs GGT2、Cs GGT4 基因 ORF 核苷酸序列 | 第57-62页 |
| 附录 B. 茶氨酸标准曲线（HPLC） | 第62-63页 |
| 附录 C. HPLC 检测不同 pH 条件下CsGGT2 和 CsGGT4粗酶酶活结果 | 第63-65页 |
| 附录 D 大豆的侵染过程图 | 第65-66页 |
| 作者简介 | 第66页 |
