摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-8页 |
第一章 序言 | 第13-21页 |
1.1 细菌耐药性概述 | 第13页 |
1.2 铜绿假单胞菌危害 | 第13-14页 |
1.3 群体感应系统的分类 | 第14-15页 |
1.3.1 AI-1系统 | 第14-15页 |
1.3.2 AI-2系统 | 第15页 |
1.3.3 AI-3系统 | 第15页 |
1.4 群体感应抑制剂概述 | 第15-17页 |
1.5 铜绿假单胞菌群体感应系统概述 | 第17-18页 |
1.6 群体感应抑制剂国内外研究现状 | 第18-19页 |
1.7 本研究主要内容及意义 | 第19-21页 |
第二章 紫色杆菌CV026初筛 | 第21-36页 |
引言 | 第21页 |
2.1 实验菌株 | 第21页 |
2.2 实验药品 | 第21-23页 |
2.3 实验仪器 | 第23页 |
2.4 实验方法 | 第23-26页 |
2.4.1 实验主要试剂 | 第23页 |
2.4.2 中成药提取液的制备 | 第23-24页 |
2.4.3 滤纸片法和打孔法初筛药物 | 第24页 |
2.4.4 紫色杆菌CV026菌液的制备 | 第24页 |
2.4.5 报告平板初筛群体感应抑制剂 | 第24-25页 |
2.4.6 检验透明抑菌圈中是否有菌生长 | 第25页 |
2.4.7 提取液最低抑菌浓度(MIC)测定 | 第25-26页 |
2.4.8 紫色菌素产量分析 | 第26页 |
2.5 实验结果 | 第26-34页 |
2.5.1 滤纸片初筛醇提液 | 第26-27页 |
2.5.2 打孔法初筛水提液 | 第27-30页 |
2.5.3 药物最低抑菌浓度的测定 | 第30-31页 |
2.5.4 紫色菌素产量分析 | 第31-34页 |
2.6 讨论与小结 | 第34-36页 |
第三章 致病菌铜绿假单胞菌毒力因子考察 | 第36-47页 |
引言 | 第36页 |
3.1 实验菌株 | 第36页 |
3.2 实验仪器 | 第36-37页 |
3.3 实验方法 | 第37-40页 |
3.3.1 实验主要试剂 | 第37-38页 |
3.3.2 铜绿假单胞菌PA01菌液制备 | 第38页 |
3.3.3 四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定药物最低抑菌浓度 | 第38页 |
3.3.4 绿脓菌素释放量分析 | 第38-39页 |
3.3.5 鼠李糖酯释放量分析 | 第39页 |
3.3.6 水解蛋白酶活性分析 | 第39页 |
3.3.7 弹性蛋白酶活性分析 | 第39页 |
3.3.8 建立铜绿假单胞菌体外生物膜模型 | 第39页 |
3.3.9 结晶紫染色法对生物膜半定量 | 第39-40页 |
3.3.10 银染法观察生物膜形态 | 第40页 |
3.4 实验结果 | 第40-45页 |
3.4.1 药物最低抑菌浓度的测定 | 第40-41页 |
3.4.2 绿脓菌素释放量考察 | 第41页 |
3.4.3 鼠李糖酯释放量考察 | 第41-42页 |
3.4.4 水解蛋白酶活性考察 | 第42页 |
3.4.5 弹性蛋白酶活性考察 | 第42-43页 |
3.4.6 生物膜半定量考察 | 第43-44页 |
3.4.7 生物膜形态观察 | 第44-45页 |
3.5 讨论与小结 | 第45-47页 |
第四章 冬凌草甲素QSI活性研究 | 第47-63页 |
引言 | 第47页 |
4.1 实验菌株 | 第47页 |
4.2 实验仪器 | 第47-48页 |
4.3 实验方法 | 第48-54页 |
4.3.1 实验主要试剂 | 第48-49页 |
4.3.2 菌液的制备 | 第49-50页 |
4.3.3 冬凌草甲素最低抑菌浓度的测定 | 第50页 |
4.3.4 紫色菌素产量分析 | 第50页 |
4.3.5 绿脓菌素释放量分析 | 第50页 |
4.3.6 鼠李糖酯释放量分析 | 第50-51页 |
4.3.7 水解蛋白酶活性分析 | 第51页 |
4.3.8 弹性蛋白酶活性分析 | 第51页 |
4.3.9 结晶紫染色法对生物膜半定量 | 第51页 |
4.3.10 银染法观察生物膜形态 | 第51页 |
4.3.11 冬凌草甲素对PA01群体感应调控机理的探究 | 第51-54页 |
4.4 实验结果 | 第54-61页 |
4.4.1 冬凌草甲素最低抑菌浓度 | 第54-55页 |
4.4.2 紫色菌素产量分析 | 第55页 |
4.4.3 绿脓菌素释放量分析 | 第55-56页 |
4.4.4 鼠李糖酯释放量分析 | 第56页 |
4.4.5 水解蛋白酶活性分析 | 第56-57页 |
4.4.6 弹性蛋白酶活性分析 | 第57页 |
4.4.7 生物膜半定量考察 | 第57-58页 |
4.4.8 生物膜形态观察 | 第58-59页 |
4.4.9 lasR基因、rhlR基因和23srRNA基因PCR结果 | 第59页 |
4.4.10 冬凌草甲素对lasR基因、rhlR基因表达的影响 | 第59-61页 |
4.5 讨论与小结 | 第61-63页 |
第五章 总结与展望 | 第63-64页 |
5.1 总结 | 第63页 |
5.2 展望 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
攻读硕士研究生期间发表论文 | 第70页 |