| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第10-26页 |
| 一、肌肉发生和发育的调控 | 第10-22页 |
| 1 肌肉组织的结构 | 第10页 |
| 2 肌肉发生 | 第10-11页 |
| 3 肌肉发生与发育调控的研究进展 | 第11-22页 |
| 3.1 成肌调节因子(myogenic regulatory factors, MRFs) | 第11-12页 |
| 3.2 MEF2家族 | 第12-13页 |
| 3.3 Pax基因家族 | 第13页 |
| 3.4 肌肉生长抑制素(myostatin, MSTN) | 第13-14页 |
| 3.5 胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor 1, IGF-Ⅰ) | 第14-15页 |
| 3.6 肿瘤坏死因子(TNF-a) | 第15页 |
| 3.7 IL-6 | 第15-16页 |
| 3.8 组蛋白甲基转移酶(SMYD1) | 第16-17页 |
| 3.9 肌肉素musclin | 第17页 |
| 3.10 MicroRNAs | 第17-18页 |
| 3.11 肌肉发育调控相关的信号通路 | 第18-22页 |
| 二、AKIRIN与骨骼肌肌肉发生 | 第22-26页 |
| 1 AKIRIN的发现和结构 | 第22-23页 |
| 2 AKIRIN基因的组织分布 | 第23页 |
| 3 AKIRIN对骨骼肌发育的影响 | 第23-24页 |
| 3.1 Akirin基因的表达受MSTN的负调控 | 第23页 |
| 3.2 Akirin增强MRFs的表达 | 第23-24页 |
| 3.3 Akirin抑制CD34和Sca-1基因的表达 | 第24页 |
| 4 AKIRIN的信号通路 | 第24-25页 |
| 5 结论和展望 | 第25-26页 |
| 引言 | 第26-27页 |
| 第一章 猪AKIRIN2基因的克隆、序列分析及组织分布 | 第27-42页 |
| 1 引言 | 第27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-34页 |
| 2.1 样品采集 | 第27页 |
| 2.2 主要仪器 | 第27-28页 |
| 2.3 主要试剂 | 第28页 |
| 2.4 配制的溶液 | 第28-29页 |
| 2.5 方法 | 第29-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-40页 |
| 3.1 总RNA的提取 | 第34页 |
| 3.2 Akirin2基因的克隆 | 第34-35页 |
| 3.3 序列分析 | 第35-39页 |
| 3.4 RT-PCR分析猪Akirin2基因的组织分布 | 第39-40页 |
| 4 结论与讨论 | 第40-42页 |
| 第二章 猪AKIRIN2基因过表达对C2C12细胞分化相关基因表达的影响 | 第42-64页 |
| 1 引言 | 第42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-54页 |
| 2.1 质粒与细胞 | 第42页 |
| 2.2 主要仪器 | 第42-43页 |
| 2.3 主要试剂 | 第43页 |
| 2.4 配制的主要试剂 | 第43-44页 |
| 2.5 方法 | 第44-54页 |
| 3 结果与分析 | 第54-61页 |
| 3.1 PCR扩增结果 | 第54-55页 |
| 3.2 载体pEGFP-N1 DNA双酶切结果 | 第55-56页 |
| 3.3 重组阳性克隆pEGFP-N1-Akirin2的筛选和鉴定 | 第56页 |
| 3.4 C2C12细胞的复苏和培养 | 第56-57页 |
| 3.5 诱导分化 | 第57-58页 |
| 3.6 猪Akirin2基因过表达对成肌细胞C2C12分化中MyoD、Myogenin基因的影响 | 第58-59页 |
| 3.7 猪Akirin2基因过表达对C2C12细胞分化中MHC、IGF-2、P21、Cyclin D基因表达的影响 | 第59-60页 |
| 3.8 猪Akirin2基因过表达对C2C12细胞分化中IL-6基因表达的影响 | 第60-61页 |
| 4 结论与讨论 | 第61-64页 |
| 第三章 AKIRIN2基因沉默对C2C12细胞分化相关基因表达的影响 | 第64-77页 |
| 1 引言 | 第64页 |
| 2 材料与方法 | 第64-70页 |
| 2.1 菌株、质粒和细胞 | 第64-65页 |
| 2.2 试剂 | 第65页 |
| 2.3 仪器 | 第65页 |
| 2.4 方法 | 第65-70页 |
| 3 结果与分析 | 第70-74页 |
| 3.1 psiRNA-h7SKGFPzeo载体的酶切 | 第70-71页 |
| 3.2 重组质粒的酶切鉴定 | 第71页 |
| 3.3 重组质粒对C2C12细胞Akirin2基因表达的抑制作用 | 第71-72页 |
| 3.4 干扰Akirin2对C2C12细胞分化中MyoD、Myogenin基因表达的影响 | 第72-73页 |
| 3.5 干扰Akirin2对C2C12细胞分化中MHC、IGF-2、P21、Cyclin D基因表达的影响 | 第73页 |
| 3.6 猪Akirin2基因过表达对C2C12细胞分化中IL-6基因表达的影响 | 第73-74页 |
| 4 结论与讨论 | 第74-77页 |
| 第四章 猪AKIRIN2基因启动子的克隆及活性分析 | 第77-90页 |
| 1 引言 | 第77页 |
| 2 材料与方法 | 第77-83页 |
| 2.1 样品采集 | 第77页 |
| 2.2 主要仪器 | 第77页 |
| 2.3 主要试剂 | 第77-78页 |
| 2.4 配制的溶液 | 第78页 |
| 2.5 方法 | 第78-83页 |
| 3 结果与分析 | 第83-87页 |
| 3.1 猪骨骼肌基因组DNA的提取 | 第83页 |
| 3.2 猪Akirin2基因启动子区PCR扩增结果 | 第83-84页 |
| 3.3 生物信息学分析 | 第84-85页 |
| 3.4 荧光素酶报告载体的构建及鉴定结果 | 第85-86页 |
| 3.5 细胞培养与转染效果 | 第86页 |
| 3.6 荧光素酶活性检测结果 | 第86-87页 |
| 4 结论与讨论 | 第87-90页 |
| 全文结论 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-103页 |
| ABSTRACT | 第103-105页 |
| 附录1 攻读博士期间发表文章 | 第106-107页 |
| 附录2 英文缩略词表 | 第107-108页 |
| 附录3 | 第108页 |
