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假单胞菌HN36对二氯喹啉酸危害烟草的修复及其机理研究

摘要第10-12页
第一章 文献综述第12-24页
    1 农药生产应用现状第12页
    2 除草剂第12-15页
        2.1 除草剂的应用概况第12页
        2.2 除草剂种类第12-14页
            2.2.1 生长调节类第13页
            2.2.2 氨基酸合成抑制剂类第13页
            2.2.3 类脂合成抑制剂类第13页
            2.2.4 幼苗生长抑制类第13-14页
            2.2.5 光合作用抑制剂类第14页
            2.2.6 细胞膜干扰剂第14页
            2.2.7 色素抑制剂第14页
            2.2.8 氨同化作用抑制剂第14页
        2.3 除草剂药害第14-15页
            2.3.1 失去绿色第15页
            2.3.2 局部坏死第15页
            2.3.3 造成落叶第15页
            2.3.4 叶片畸形第15页
            2.3.5 植株矮化第15页
            2.3.6 根变色、根数变少或畸形第15页
    3 除草剂的降解第15-19页
        3.1 光化学降解第15-16页
        3.2 化学水解第16页
        3.3 物理化学降解第16-17页
        3.4 除草剂的生物降解第17-19页
            3.4.1 微生物降解除草剂的代谢方式第17页
            3.4.2 微生物降解除草剂过程中的主要反应第17-18页
            3.4.3 降解除草剂微生物的分离第18页
            3.4.4 除草剂的微生物修复第18-19页
    4 除草剂二氯喹啉酸的降解第19-24页
        4.1 二氯喹啉酸的基本性质及其除草机理第19页
        4.2 二氯喹啉酸对烟草的药害现象第19-20页
        4.3 激素水平对烟草生长发育的影响第20-21页
        4.4 二氯喹啉酸的降解第21-24页
            4.4.1 二氯喹啉酸残留测定方法的研究第21页
            4.4.2 二氯喹啉酸在环境中降解的影响因子第21-22页
            4.4.3 与二氯喹啉酸生物降解相关的酶和中间代谢产物的研究第22页
            4.4.4 国内外研究现状第22-23页
            4.4.5 土壤残留二氯喹啉酸的修复第23-24页
第二章 二氯喹啉酸危害烟草的生理机制第24-37页
    1 材料与方法第24-26页
        1.1 试验材料第24页
        1.2 试验设计第24-25页
            1.2.1 二氯喹啉酸危害烟株的阈值第24页
            1.2.2 二氯喹琳酸对烟株生理特性的影响第24页
            1.2.3 二氯喹啉酸对烟草细胞超微结构的影响第24-25页
        1.3 试验方法第25-26页
            1.3.1 二氯喹啉酸危害烟株阈值的测定第25页
            1.3.2 保护酶活性测定第25页
            1.3.3 MDA及氧自由基含量的测定第25页
            1.3.4 叶片及根系内源激素含量的测定第25页
            1.3.5 叶片超微结构的观察第25页
            1.3.6 数据处理第25-26页
    2 结果与分析第26-35页
        2.1 二氯喹啉酸危害烟苗的阈值第26-27页
            2.1.1 二氯喹啉酸对烟株叶宽的影响第26页
            2.1.2 二氯喹啉酸对烟株叶长的影响第26-27页
            2.1.3 二氯喹啉酸对烟株高度的影响第27页
        2.2 不同浓度二氯喹啉酸对烟株保护酶活性的影响第27-29页
            2.2.1 对SOD活性的影响第27-28页
            2.2.2 对POD活性的影响第28页
            2.2.3 对CAT活性的影响第28-29页
        2.3 不同浓度二氯喹啉酸对烟株中MDA和氧自由基含量的影响第29-31页
            2.3.1 对烟株MDA含量的影响第29-30页
            2.3.2 二氯喹啉酸对烟株·OH含量的影响第30页
            2.3.3 对烟株系O_2·-含量的影响第30-31页
        2.4 不同浓度二氯喹啉酸对烟株内源激素含量的影响第31-33页
            2.4.1 对IAA含量的影响第31页
            2.4.2 对ZR含量的影响第31-32页
            2.4.3 对GA_3含量的影响第32页
            2.4.4 对ABA含量的影响第32-33页
        2.5 二氯喹啉酸对烟株超微结构的影响第33-35页
            2.5.1 对茎尖超微组织结构的影响第33-34页
            2.5.2 对顶叶超微组织结构的影响第34-35页
    3 讨论第35-36页
    4 小结第36-37页
第三章 二氯喹啉酸降解菌的分离及降解特性第37-48页
    1 材料和方法第37-39页
        1.1 试验材料第37页
            1.1.1 样品第37页
            1.1.2 试剂与仪器第37页
            1.1.3 培养基第37页
        1.2 二氯喹啉酸降解菌的分离、纯化和鉴定第37-38页
            1.2.1 富集分离第37-38页
            1.2.2 分离菌株的鉴定第38页
        1.3 降解用接种菌液的制备第38页
        1.4 分离菌株的其它底物降解试验第38页
        1.5 分离菌株的生长曲线第38页
        1.6 二氯喹啉酸起始浓度对菌株HN36降解二氯喹啉酸的影响第38页
        1.7 温度对菌株HN36降解二氯喹啉酸的影响第38-39页
        1.8 pH对菌株HN36降解二氯喹啉酸的影响第39页
        1.9 HN36菌株生长和二氯喹啉酸降解之间的关系第39页
        1.10 二氯喹啉酸浓度的测定第39页
    2 结果与分析第39-46页
        2.1 二氯喹啉酸降解菌的初筛第39页
        2.2 二氯喹啉酸降解菌的复筛第39-41页
        2.3 二氯喹啉酸降解菌的形态特征第41页
        2.4 菌株HN36的生理生化试验鉴定第41页
        2.5 菌株HN36的16S rDNA序列测定及系统发育分析第41-43页
        2.6 菌株HN36的底物降解广谱性实验第43-44页
        2.7 菌株HN36的生长曲线第44页
        2.8 二氯喹啉酸起始浓度对菌株HN36降解二氯喹啉酸的影响第44页
        2.9 温度对菌株HN36降解二氯喹啉酸的影响第44-45页
        2.10 pH对菌株HN36降解二氯喹啉酸的影响第45页
        2.11 菌株HN36对二氯喹啉酸的降解与菌体生长的关系第45-46页
    3 讨论第46-47页
    4 小结第47-48页
第四章 菌株HN36降解二氯喹啉酸的途径第48-66页
    1 材料与方法第48-53页
        1.1 供试菌株第48页
        1.2 主要仪器第48页
        1.3 主要试剂第48页
        1.4 培养基第48页
        1.5 菌体培养第48页
        1.6 SDS-PAGE全细胞蛋白质电泳第48-49页
            1.6.1 菌体全细胞蛋白样品制备第48页
            1.6.2 SDS-PAGE电泳第48-49页
        1.7 邻苯二酚1,2—双加氧酶活性测定第49页
        1.8 邻苯二酚1,2—双加氧酶及邻苯二甲酸双加氧酶的基因扩增第49-51页
            1.8.1 菌株HN36的全基因组提取第49-50页
            1.8.2 菌株HN36的RNA提取第50页
            1.8.3 引物设计第50页
            1.8.4 PCR扩增第50页
            1.8.5 RNA反转录cDNA第50-51页
        1.9 双向电泳第51-53页
            1.9.1 等点聚焦电泳(第一向)第51页
            1.9.2 SDS-PAGE电泳(第二向)第51-52页
            1.9.3 染色第52页
            1.9.4 质谱鉴定第52-53页
        1.10 菌株HN36降解二氯喹啉酸的产物分析第53页
            1.10.1 样品前处理第53页
            1.10.2 样品分析第53页
    2 结果与分析第53-65页
        2.1 菌株HN36的全蛋白质SDS-PAGE电泳分析第53-54页
        2.2 双向电泳研究二氯喹啉酸降解的相关蛋白第54-58页
            2.2.1 双向电泳图谱第54页
            2.2.2 质谱鉴定第54-55页
            2.2.3 蛋白质的分析第55-58页
        2.3 邻苯二酚1,2—双加氧酶酶活分析第58页
        2.4 邻苯二酚1,2—双加氧酶的基因扩增第58-61页
        2.5 邻苯二酚1,2—双加氧酶基因的RT-PCR第61页
        2.6 邻苯二甲酸双加氧酶基因的扩增第61-62页
        2.7 HN36降解二氯喹啉酸的中间代谢产物分析第62-65页
            2.7.1 样品本底第62页
            2.7.2 衍生化前样品结果第62-64页
            2.7.3 衍生化后结果第64-65页
    3 讨论第65页
    4 小结第65-66页
第五章 降解菌HN36对二氯喹啉酸危害烟草的修复第66-101页
    1 材料与方法第66-68页
        1.1 试验材料第66页
        1.2 试验设计第66-67页
            1.2.1 降解菌HN36对土壤中二氯喹啉酸的降解及对土壤酶活性的影响第66页
            1.2.2 降解菌HN36对二氯喹啉酸残留土壤烟草生理特性的影响第66-67页
            1.2.3 降解菌HN36对烟株组织形态及超微结构的影响第67页
            1.2.4 降解菌HN36对烟株农艺性状及烟叶化学成分的影响第67页
        1.3 试验方法第67-68页
            1.3.1 降解菌HN36菌液制备第67页
            1.3.2 土壤中二氯喹啉酸浓度的测定第67页
            1.3.3 根际土壤酶活性测定第67页
            1.3.4 氧自由基含量测定第67页
            1.3.5 保护酶活性测定第67-68页
            1.3.6 丙二醛含量、抗氧化率及伤害率测定第68页
            1.3.7 根系活力测定第68页
            1.3.8 氨基酸及还原型谷胱甘肽含量的测定第68页
            1.3.9 组织结构及超微结构观察第68页
    2 结果与分析第68-97页
        2.1 降解菌HN36对土壤中二氯喹啉酸的降解第68-69页
            2.1.1 不同接种量对土壤中二氯喹啉酸降解效果的影响第68-69页
            2.1.2 二氯喹啉酸初始浓度对HN36降解效果的影响第69页
        2.2 降解菌HN36对二氯喹啉酸胁迫土壤中酶活性的影响第69-74页
            2.2.1 不同接种量对二氯喹啉酸胁迫土壤中酶活性的影响第69-72页
            2.2.2 降解菌HN36对不同浓度二氯喹啉酸胁迫土壤酶活性的影响第72-74页
        2.3 降解菌HN36对二氯喹啉酸残留土壤烟株生理特性的影响第74-85页
            2.3.1 不同量降解菌HN36对二氯喹啉酸残留土壤烟株生理特性的影响第74-80页
            2.3.2 降解菌HN36对不同浓度二氯喹啉酸土壤烟株生理特性的影响第80-85页
        2.4 降解菌HN36对烟株农艺性状的影响第85-89页
            2.4.1 不同量降解菌HN36对二氯喹啉酸胁迫下烟株农艺性状的影响第85-87页
            2.4.2 降解菌HN36对不同浓度二氯喹啉酸胁迫下烟株农艺性状的影响第87-89页
        2.5 降解菌HN36对烟株组织结构的影响第89-94页
            2.5.1 对顶叶组织结构的影响第89-91页
            2.5.2 对中部叶片组织结构的影响第91-93页
            2.5.3 对根系结构的影响第93-94页
        2.6 降解菌HN36对烟株超微结构的影响第94-97页
            2.6.1 对茎尖细胞超微结构的影响第94-95页
            2.6.2 对顶叶细胞超微结构的影响第95-96页
            2.6.3 对中部叶片细胞超微结构的影响第96-97页
        2.7 降解菌HN36对烟叶主要化学成分的影响第97页
    3 讨论第97-99页
    4 小结第99-101页
第六章 研究结论与展望第101-103页
    1 主要研究结论第101页
    2 本研究创新点第101-102页
    3 展望第102-103页
参考文献第103-114页
ABSTRACT第114-116页
攻读博士学位期间主要科研成果第117页

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