| 致谢 | 第4-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-29页 |
| 1 植物盐害 | 第12-13页 |
| 1.1 离子毒害 | 第12页 |
| 1.2 渗透胁迫 | 第12-13页 |
| 1.3 氧化胁迫 | 第13页 |
| 2 植物耐盐机理 | 第13-16页 |
| 2.1 钠离子的吸收 | 第14-15页 |
| 2.2 钠离子的外排 | 第15页 |
| 2.3 钠离子的区隔化 | 第15-16页 |
| 2.4 抗氧化机制 | 第16页 |
| 3 Ca~(2+)与植物CBL-CIPK调控网络 | 第16-17页 |
| 4 SOS途径 | 第17-24页 |
| 4.1 SOS基因家族的克隆和功能 | 第18-23页 |
| 4.1.1 SOS1 | 第18-20页 |
| 4.1.2 SOS2 | 第20-21页 |
| 4.1.3 SOS3 | 第21-22页 |
| 4.1.4 SOS4 | 第22页 |
| 4.1.5 SOS5 | 第22-23页 |
| 4.2 SOS信号通路 | 第23-24页 |
| 5 NHX途径 | 第24-25页 |
| 6 从拟南芥到高等植物的耐盐途径比较 | 第25-26页 |
| 7 小麦耐盐研究进展 | 第26-29页 |
| 第二章 TaSOS2和TaSOS3的克隆和功能研究 | 第29-52页 |
| 1 材料与方法 | 第29-39页 |
| 1.1 试验材料 | 第29-32页 |
| 1.1.1 植物材料 | 第29页 |
| 1.1.2 菌株和载体 | 第29-30页 |
| 1.1.3 酶、化学试剂及试剂盒 | 第30页 |
| 1.1.4 各种培养基配方 | 第30-32页 |
| 1.2 试验方法 | 第32-39页 |
| 1.2.1 RNA提取 | 第32-33页 |
| 1.2.2 反转录反应 | 第33页 |
| 1.2.3 引物设计 | 第33页 |
| 1.2.4 PCR反应体系及条件 | 第33-34页 |
| 1.2.5 PCR产物胶回收 | 第34页 |
| 1.2.6 TaSOS2/TaSOS 3与T-载体的连接 | 第34页 |
| 1.2.7 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化和鉴定 | 第34-35页 |
| 1.2.8 质粒DNA提取 | 第35-36页 |
| 1.2.9 酵母表达载体构建 | 第36页 |
| 1.2.10 酵母转化 | 第36-37页 |
| 1.2.11 酵母菌液PCR | 第37页 |
| 1.2.12 酵母梯度点滴生长实验 | 第37页 |
| 1.2.13 酵母细胞内Na~+、K~+离子含量测定 | 第37页 |
| 1.2.14 酵母双杂交表达载体构建 | 第37-38页 |
| 1.2.15 酵母转化 | 第38-39页 |
| 1.2.16 酵母双杂交 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-49页 |
| 2.1 TaSOS2、TaSOS3克隆 | 第39-42页 |
| 2.1.1 RNA提取质量检测 | 第39-40页 |
| 2.1.2 TaSOS2的克隆和生物信息学分析 | 第40-41页 |
| 2.1.2.1 TaSOS2 PCR扩增检测 | 第40页 |
| 2.1.2.2 TaSOS2的生物信息学分析 | 第40-41页 |
| 2.1.3 TaSOS3的克隆和生物信息学分析 | 第41-42页 |
| 2.1.3.1 TaSOS3克隆检测 | 第41-42页 |
| 2.1.3.2 TaSOS3的生物信息学分析 | 第42页 |
| 2.2 TaSOS2和TaSOS3的功能鉴定 | 第42-46页 |
| 2.2.1 酵母表达载体的构建 | 第42页 |
| 2.2.2 酵母梯度试验 | 第42-44页 |
| 2.2.3 TaSOS2调控TaSOS1的Na~+、K~+离子含量测定 | 第44-46页 |
| 2.3 TaSOS2和TaSOS3互作验证 | 第46-49页 |
| 2.3.1 酵母双杂交载体构建 | 第46页 |
| 2.3.2 TaSOS2和TaSOS3自激活活性检测 | 第46-47页 |
| 2.3.4 TaSOS2和TaSOS3互作试验 | 第47-49页 |
| 3 讨论 | 第49-52页 |
| 3.1 小麦TaSOS2、TaSOS3的克隆 | 第49页 |
| 3.2 TaSOS2、TaSOS3调控TaSOS1分析 | 第49-50页 |
| 3.3 TaSOS2和TaSOS3互作分析 | 第50-52页 |
| 第三章 TaSOS1调控区域鉴定 | 第52-67页 |
| 1 材料与方法 | 第52-59页 |
| 1.1 实验材料 | 第52-55页 |
| 1.1.1 酵母菌株和载体 | 第52-53页 |
| 1.1.2 拟南芥材料和植物载体 | 第53页 |
| 1.1.3 拟南芥培养的培养基和营养液配方 | 第53-55页 |
| 1.1.3.1 MS固体培养基制备 | 第53-54页 |
| 1.1.3.2 PNS营养液配置 | 第54-55页 |
| 1.1.3.3 营养土的配置 | 第55页 |
| 1.1.4 农杆菌转化试剂 | 第55页 |
| 1.2 试验方法 | 第55-59页 |
| 1.2.1 酵母引物设计和表达载体构建 | 第55-56页 |
| 1.2.2 酵母转化和耐盐互补实验 | 第56页 |
| 1.2.3 植物表达载体构建 | 第56页 |
| 1.2.4 拟南芥的种植 | 第56-57页 |
| 1.2.5 农杆菌转化 | 第57页 |
| 1.2.6 拟南芥花序侵染 | 第57-58页 |
| 1.2.7 转基因拟南芥阳性植株的筛选及PCR鉴定 | 第58-59页 |
| 1.2.8 转基因植株耐盐鉴定 | 第59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-65页 |
| 2.1 转酵母鉴定TaSOS1的磷酸化位点 | 第59-63页 |
| 2.1.1 酵母表达载体构建 | 第59-60页 |
| 2.1.2 TaSOS1的磷酸化位点鉴定 | 第60-63页 |
| 2.2 TaSOS1的磷酸化位点鉴定转化拟南芥验证 | 第63-65页 |
| 2.2.1 植物表达载体构建 | 第63页 |
| 2.2.2 转基因阳性植株的获得和检测 | 第63-64页 |
| 2.2.3 转基因植株的耐盐性鉴定 | 第64-65页 |
| 3 讨论 | 第65-67页 |
| 第四章 TaSOS1高耐盐突变体的获得和耐盐鉴定 | 第67-81页 |
| 1 材料与方法 | 第67-71页 |
| 1.1 试验材料 | 第67-68页 |
| 1.1.1 酵母试验材料 | 第67页 |
| 1.1.2 拟南芥试验材料 | 第67页 |
| 1.1.3 转基因拟南芥质膜离子转运活性测定 | 第67-68页 |
| 1.2 试验方法 | 第68-71页 |
| 1.2.1 酵母表达引物设计与表达载体构建 | 第68-69页 |
| 1.2.2 突变体酵母转化方法和功能互补试验 | 第69页 |
| 1.2.3 转基因酵母细胞离子含量测定 | 第69页 |
| 1.2.4 高耐盐突变体拟南芥引物设计和表达载体构建 | 第69-70页 |
| 1.2.5 高耐盐突变体转化拟南芥 | 第70页 |
| 1.2.6 Δ974转基因拟南芥耐盐鉴定 | 第70页 |
| 1.2.7 转基因拟南芥质膜活性测定 | 第70-71页 |
| 2 结果与分析 | 第71-78页 |
| 2.1 高耐盐突变体的获得 | 第71-74页 |
| 2.1.1 突变体酵母表达载体构建 | 第71-72页 |
| 2.1.2 突变体酵母功能互补试验 | 第72页 |
| 2.1.3 Δ974转基因酵母离子含量测定 | 第72-74页 |
| 2.2 Δ974转拟南芥功能验证 | 第74-78页 |
| 2.2.1 Δ974植物表达载体构建 | 第74页 |
| 2.2.2 转基因拟南芥筛选和鉴定 | 第74页 |
| 2.2.3 Δ974转基因拟南芥耐盐性鉴定 | 第74-76页 |
| 2.2.4 转基因拟南芥的质膜离子交换活性测定 | 第76-78页 |
| 2.2.4.1 转基因拟南芥K~+转运活性检测 | 第76-77页 |
| 2.2.4.2 转基因拟南芥Na~+转运活性检测 | 第77-78页 |
| 3 讨论 | 第78-81页 |
| 3.1 Δ974高耐盐突变体的获得 | 第78-79页 |
| 3.2 Δ974在拟南芥中的耐盐功能验证 | 第79页 |
| 3.3 小麦耐盐基因工程研究 | 第79-81页 |
| 全文总结 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-94页 |
| 英文摘要 | 第94-95页 |
