| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 1 前言 | 第12-17页 |
| 1.1 植物病害生物防治 | 第12页 |
| 1.2 萎缩芽胞杆菌 | 第12-13页 |
| 1.3 几丁质酶和葡聚糖酶的研究及应用 | 第13-15页 |
| 1.3.1 几丁质酶的研究及应用 | 第13-15页 |
| 1.3.2 葡聚糖酶的研究及应用 | 第15页 |
| 1.4 绿色荧光蛋白在微生物定殖方面的研究 | 第15-16页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 2 菌株NMB28的分类鉴定 | 第17-25页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 菌株 | 第17页 |
| 2.1.2 培养基 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第17页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-20页 |
| 2.2.1 形态特征观察 | 第18页 |
| 2.2.2 生理生化测定 | 第18-19页 |
| 2.2.3 分子鉴定 | 第19-20页 |
| 2.3 结果分析 | 第20-24页 |
| 2.3.1 形态学特征 | 第20页 |
| 2.3.2 生理生化特征 | 第20-21页 |
| 2.3.3 分子鉴定 | 第21-24页 |
| 2.4 结论与讨论 | 第24-25页 |
| 3 菌株NMB28的生防效果测定 | 第25-35页 |
| 3.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 3.1.1 菌株 | 第25页 |
| 3.1.2 培养基 | 第25-26页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第26页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-28页 |
| 3.2.1 菌株NMB28抑菌谱测定 | 第26-27页 |
| 3.2.2 菌株NMB28对番茄灰霉病菌的离体防效测定 | 第27页 |
| 3.2.3 生防相关性状的测定 | 第27页 |
| 3.2.4 菌株NMB28产几丁质酶方式的检测 | 第27-28页 |
| 3.2.5 菌株NMB28产几丁质酶曲线 | 第28页 |
| 3.2.6 几丁质酶抑真菌活性检测 | 第28页 |
| 3.3 结果分析 | 第28-34页 |
| 3.3.1 抑菌谱测定 | 第28-30页 |
| 3.3.2 离体防效测定 | 第30-31页 |
| 3.3.3 生防相关性状测定 | 第31-33页 |
| 3.3.4 几丁质酶抑真菌作用检测 | 第33-34页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第34-35页 |
| 4 几丁质酶基因的克隆、原核表达及酶特性分析 | 第35-46页 |
| 4.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 4.1.1 实验菌株和质粒 | 第35页 |
| 4.1.2 培养基 | 第35页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第35-36页 |
| 4.2 实验方法 | 第36-39页 |
| 4.2.1 几丁质酶粗蛋白的制备与检测 | 第36-37页 |
| 4.2.2 几丁质酶基因的扩增 | 第37页 |
| 4.2.3 生物信息学分析 | 第37页 |
| 4.2.4 原核表达及检测 | 第37-38页 |
| 4.2.5 酶特性分析 | 第38-39页 |
| 4.3 结果分析 | 第39-44页 |
| 4.3.1 几丁质酶粗蛋白的制备 | 第39页 |
| 4.3.2 基因克隆 | 第39-40页 |
| 4.3.3 生物信息学分析 | 第40-41页 |
| 4.3.4 表达载体的构建 | 第41页 |
| 4.3.5 原核表达 | 第41-42页 |
| 4.3.6 表达蛋白活性检测 | 第42-43页 |
| 4.3.7 酶特性分析 | 第43-44页 |
| 4.4 结论与讨论 | 第44-46页 |
| 5 葡聚糖酶基因的克隆和原核表达 | 第46-50页 |
| 5.1 葡聚糖酶基因的扩增和序列分析 | 第46页 |
| 5.2 原核表达 | 第46页 |
| 5.2.1 构建表达载体 | 第46页 |
| 5.2.2 重组质粒的筛选 | 第46页 |
| 5.2.3 诱导表达 | 第46页 |
| 5.3 葡聚糖酶的活性检测和对灰霉的抑制作用 | 第46页 |
| 5.4 结果分析 | 第46-49页 |
| 5.4.1 葡聚糖酶基因扩增和分析 | 第46-48页 |
| 5.4.2 原核表达 | 第48页 |
| 5.4.3 葡聚糖酶活性分析 | 第48-49页 |
| 5.5 结论与讨论 | 第49-50页 |
| 6 绿色荧光蛋白标记 | 第50-53页 |
| 6.1 实验材料 | 第50页 |
| 6.2 实验方法 | 第50-51页 |
| 6.2.1 菌株NMB28抗生素抗性谱的测定 | 第50页 |
| 6.2.2 卡那霉素最低抑菌浓度的测定 | 第50-51页 |
| 6.2.3 萎缩芽胞杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第51页 |
| 6.2.4 绿色荧光蛋白标记菌株的筛选 | 第51页 |
| 6.3 结果分析 | 第51-52页 |
| 6.3.1 菌株NMB28的抗生素抗性谱 | 第51页 |
| 6.3.2 卡那霉素最低抑菌浓度的测定 | 第51-52页 |
| 6.3.3 绿色荧光蛋白标记菌株的筛选 | 第52页 |
| 6.4 结论与讨论 | 第52-53页 |
| 7 结论与展望 | 第53-55页 |
| 7.1 结论 | 第53页 |
| 7.2 创新点 | 第53-54页 |
| 7.3 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简介 | 第62-63页 |
| 导师简介 | 第63页 |