| 摘要 | 第8-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-36页 |
| 1 希金斯刺盘孢侵染拟南芥的过程 | 第15-16页 |
| 2 希金斯刺盘孢侵染机理研究进展 | 第16-23页 |
| 2.1 植物炭疽病菌致病相关基因功能研究 | 第16-19页 |
| 2.2 病原物致病过程中的信号转导途径 | 第19-23页 |
| 3 脂类代谢 | 第23-27页 |
| 3.1 脂肪水解 | 第23-24页 |
| 3.2 脂肪酸的β氧化 | 第24-25页 |
| 3.3 乙醛酸循环 | 第25-27页 |
| 4 植物与病原菌互作模型 | 第27-28页 |
| 5 植物与病原菌互作过程中寄主细胞跨膜转运的分子机理 | 第28-35页 |
| 5.1 植物细胞的跨膜转运 | 第28-30页 |
| 5.2 PTI中的跨膜转运 | 第30-31页 |
| 5.3 病原菌穿透过程中寄主的跨膜转运 | 第31-32页 |
| 5.4 穿透后的寄主胞内的跨膜转运 | 第32-35页 |
| 6 本研究的目的与意义 | 第35-36页 |
| 第二章 希金斯刺盘孢T-DNA插入突变体库构建、致病缺陷突变体筛选及侧翼序列分析 | 第36-53页 |
| 1 材料与方法 | 第37-42页 |
| 1.1 试验材料 | 第37-38页 |
| 1.2 试验方法 | 第38-42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-52页 |
| 2.1 希金斯刺盘孢T-DNA插入突变体库的构建 | 第42-43页 |
| 2.2 希金斯刺盘孢致病缺陷突变体的获得 | 第43-47页 |
| 2.3 致病缺陷突变体的Southern杂交检测 | 第47-48页 |
| 2.4 致病缺陷突变体的T-DNA插入位点侧翼序列分析 | 第48-52页 |
| 3 讨论 | 第52-53页 |
| 第三章 ChRgf基因在希金斯刺盘孢孢子萌发、附着胞形成及致病过程中的功能分析 | 第53-82页 |
| 1 材料与方法 | 第54-61页 |
| 1.1 供试菌株 | 第54页 |
| 1.2 供试植物 | 第54页 |
| 1.3 希金斯刺盘孢RasGEF家族基因的序列分析 | 第54-55页 |
| 1.4 载体的构建和ATMT转化 | 第55页 |
| 1.5 农杆菌介导敲除、互补载体转化希金斯刺盘孢野生型菌株 | 第55-56页 |
| 1.6 ChRgf基因敲除、互补转化子的PCR鉴定 | 第56页 |
| 1.7 ChRgf基因敲除、互补转化子的Southern杂交鉴定 | 第56页 |
| 1.8 希金斯刺盘孢转化子生物学表型分析 | 第56-57页 |
| 1.9 真菌菌丝胞内cAMP含量的测定 | 第57-58页 |
| 1.10 外源物对孢子萌发及附着胞形成的影响 | 第58页 |
| 1.11 细胞壁完整性及抗逆能力测定 | 第58页 |
| 1.12 致病力测定及病菌侵染过程观察 | 第58-59页 |
| 1.13 ChRgf基因在发育及侵染过程中的表达分析 | 第59-61页 |
| 2 结果与分析 | 第61-79页 |
| 2.1 希金斯刺盘孢RasGEF家族基因分析 | 第61-63页 |
| 2.2 ChRgf基因的敲除与互补 | 第63-67页 |
| 2.3 ChRgf对菌落形态及生长速度、菌丝干重的影响 | 第67-68页 |
| 2.4 ChRgf基因敲除对菌丝尖端的影响 | 第68-69页 |
| 2.5 ChRgf影响希金斯刺盘孢的产孢 | 第69-70页 |
| 2.6 ChRgf基因敲除对孢子萌发、附着胞形成的影响 | 第70-71页 |
| 2.7 ChRgf敲除对附着胞膨压的影响 | 第71-72页 |
| 2.8 ChRgf敲除对希金斯刺盘孢致病力的影响 | 第72-75页 |
| 2.9 ChRgf参与调控cAMP信号途径 | 第75-77页 |
| 2.10 ChRgf基因影响细胞壁完整性及细胞渗透压 | 第77-78页 |
| 2.11 ChRgf基因的表达情况 | 第78-79页 |
| 3 讨论 | 第79-82页 |
| 第四章 乙酰辅酶A合成酶ChAcs在希金斯刺盘孢初生菌丝发育及致病过程中的功能分析 | 第82-108页 |
| 1 材料与方法 | 第83-87页 |
| 1.1 供试菌株及供试植物 | 第83页 |
| 1.2 希金斯刺盘孢ChAcs家族基因的序列分析 | 第83页 |
| 1.3 ChAcs基因敲除、互补载体的构建 | 第83-84页 |
| 1.4 ChAcs基因敲除转化子的Southern杂交鉴定 | 第84页 |
| 1.5 ChAcs基因互补转化子的PCR验证 | 第84-85页 |
| 1.6 希金斯刺盘孢对不同类型碳源的利用 | 第85页 |
| 1.7 总脂类含量的测定 | 第85页 |
| 1.8 脂肪粒染色 | 第85页 |
| 1.9 致病性测定及侵染过程观察 | 第85-86页 |
| 1.10 ChAcs基因在希金斯刺盘孢生长发育及侵染拟南芥过程中的表达分析 | 第86页 |
| 1.11 RNA-seq分析及相关基因的验证 | 第86-87页 |
| 2 结果与分析 | 第87-104页 |
| 2.1 希金斯刺盘孢乙酰辅酶A合成酶家族基因的分析 | 第87-89页 |
| 2.2 ChAcs基因的敲除 | 第89-90页 |
| 2.3 ChAcs基因的互补载体的构建以及互补转化子的获得 | 第90-92页 |
| 2.4 ChAcs基因对希金斯刺盘孢生长发育的影响 | 第92-93页 |
| 2.5 ChAcs1和ChAcs2对不同类型碳源利用的影响 | 第93-95页 |
| 2.6 ChAcs1与ChAcs2对希金斯刺盘孢致病力的影响 | 第95-96页 |
| 2.7 敲除转化子细胞全脂类含量的测定 | 第96-97页 |
| 2.8 脂类物质在附着胞形成过程中的动态变化 | 第97-98页 |
| 2.9 ChAcs1,ChAcs2基因在希金斯刺盘孢菌中的亚细胞定位 | 第98页 |
| 2.10 ChAcs基因在希金斯刺盘孢生长发育及侵染拟南芥过程中的表达情况 | 第98-99页 |
| 2.11 ChAcs1敲除转化子接种拟南芥的RNA-seq分析 | 第99-101页 |
| 2.12 q-PCR对RNA-seq数据的初步验证 | 第101-102页 |
| 2.13 ChAcs1调控致病相关基因表达 | 第102页 |
| 2.14 ChAcs1调控与三羧酸循环、乙醇代谢及乙醛酸循环等相关基因的表达 | 第102-103页 |
| 2.15 ChAcs1敲除诱导寄主拟南芥防卫反应基因上调表达 | 第103-104页 |
| 3 讨论 | 第104-108页 |
| 第五章 希金斯刺盘孢侵染拟南芥活养寄生条件下寄主的亚细胞反应 | 第108-128页 |
| 1 材料与方法 | 第109-112页 |
| 1.1 植物材料与生长条件 | 第109-111页 |
| 1.2 炭疽菌侵染相应寄主的光学显微观察 | 第111页 |
| 1.3 希金斯刺盘孢侵染荧光标记转基因拟南芥植株的共聚焦显微观察 | 第111-112页 |
| 2 结果与分析 | 第112-122页 |
| 2.1 炭疽菌接种寄主后寄主细胞的活性 | 第112-114页 |
| 2.2 质膜蛋白在活养寄生界面的聚集 | 第114-116页 |
| 2.3 不同磷酸肌醇在活养寄生界面的聚集 | 第116-118页 |
| 2.4 内吞囊泡在初生菌丝周围聚集 | 第118-120页 |
| 2.5 液泡膜包裹初生菌丝 | 第120-121页 |
| 2.6 液泡膜破裂后细胞死亡导致初生菌丝向次生菌丝转化 | 第121-122页 |
| 3 讨论 | 第122-128页 |
| 全文总结、创新性与展望 | 第128-132页 |
| 全文总结 | 第128-130页 |
| 创新性 | 第130-131页 |
| 展望 | 第131-132页 |
| 参考文献 | 第132-158页 |
| 附录 | 第158-166页 |
| 附录1 | 第158-161页 |
| 附录2 | 第161-165页 |
| 附录3 | 第165-166页 |
| 致谢 | 第166-168页 |
