| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 黄芩属药用植物研究概况 | 第11-13页 |
| 1.1.1 黄芩属植物概况 | 第11页 |
| 1.1.2 黄芩研究概况 | 第11-12页 |
| 1.1.3 粘毛黄芩研究概况 | 第12-13页 |
| 1.2 黄芩和粘毛黄芩药用活性成分黄芩苷的研究概况 | 第13-19页 |
| 1.2.1 黄芩苷的药用价值 | 第13-15页 |
| 1.2.2 植物中黄酮类化合物传统的代谢途径 | 第15-17页 |
| 1.2.3 黄芩中黄酮类化合物的代谢途径 | 第17-18页 |
| 1.2.4 黄芩中黄酮类化合物代谢途径中的关键酶基因 | 第18-19页 |
| 1.3 本研究的目的与意义 | 第19-23页 |
| 第2章 黄芩和粘毛黄芩药用活性成分黄芩苷的累积及变化 | 第23-33页 |
| 2.1 前言 | 第23-24页 |
| 2.2 材料与仪器 | 第24页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第24页 |
| 2.2.3 主要试剂 | 第24页 |
| 2.3 色谱条件 | 第24-25页 |
| 2.4 实验方法 | 第25-28页 |
| 2.4.1 标品溶液的制备 | 第25-26页 |
| 2.4.2 标准曲线的绘制 | 第26页 |
| 2.4.3 样品溶液的制备 | 第26页 |
| 2.4.4 精密度实验 | 第26-27页 |
| 2.4.5 稳定性实验 | 第27页 |
| 2.4.6 重复性实验 | 第27页 |
| 2.4.7 加样回收率实验 | 第27页 |
| 2.4.8 样品测定 | 第27-28页 |
| 2.4.9 数据分析 | 第28页 |
| 2.5 结果与分析 | 第28-30页 |
| 2.5.1 黄芩不同部位黄芩苷含量的动态变化规律 | 第28-29页 |
| 2.5.2 粘毛黄芩不同部位黄芩苷含量的动态变化规律 | 第29页 |
| 2.5.3 黄芩和粘毛黄芩不同部位黄芩苷含量的对比分析 | 第29-30页 |
| 2.6 讨论 | 第30-33页 |
| 第3章 黄芩苷合成途径3个关键酶基因的克隆及表达分析 | 第33-63页 |
| 3.1 前言 | 第33页 |
| 3.2 材料与仪器 | 第33-34页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第33页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第33-34页 |
| 3.2.3 主要试剂 | 第34页 |
| 3.3 实验方法 | 第34-40页 |
| 3.3.1 黄芩及粘毛黄芩不同部位不同月份总RNA的提取 | 第34-35页 |
| 3.3.2 总RNA质量检测 | 第35页 |
| 3.3.3 cDNA第一链的合成 | 第35页 |
| 3.3.4 粘毛黄芩黄芩苷代谢途径中关键基因同源克隆的引物设计 | 第35-36页 |
| 3.3.5 普通PCR扩增反应 | 第36-37页 |
| 3.3.6 PCR产物胶回收 | 第37页 |
| 3.3.7 亚克隆及测序 | 第37-39页 |
| 3.3.8 Real-time PCR | 第39-40页 |
| 3.3.9 数据分析 | 第40页 |
| 3.4 结果与分析 | 第40-61页 |
| 3.4.1 黄芩和粘毛黄芩总RNA的提取结果 | 第40-41页 |
| 3.4.2 粘毛黄芩关键酶基因引物验证及克隆结果 | 第41-46页 |
| 3.4.3 Real-time PCR引物的验证及克隆结果 | 第46-48页 |
| 3.4.4 Real-time PCR溶解曲线和扩增曲线结果 | 第48-51页 |
| 3.4.5 黄芩和粘毛黄芩CLL-7基因生长期各部位的表达分析 | 第51-53页 |
| 3.4.6 黄芩和粘毛黄芩FNSⅡ-1基因生长期各部位的表达分析 | 第53-56页 |
| 3.4.7 黄芩和粘毛黄芩FNS Ⅱ-2基因生长期各部位的表达分析 | 第56-59页 |
| 3.4.8 回归分析 | 第59-61页 |
| 3.5 讨论 | 第61-63页 |
| 第4章 粘毛黄芩SvFNS Ⅱ-2基因的cDNA完全编码序列克隆及生物信息学分析 | 第63-87页 |
| 4.1 前言 | 第63页 |
| 4.2 材料与仪器 | 第63-64页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第63页 |
| 4.2.2 主要仪器 | 第63-64页 |
| 4.2.3 主要试剂 | 第64页 |
| 4.3 实验方法 | 第64-68页 |
| 4.3.1 粘毛黄芩SvFNSⅡ-2基因3'RACE克隆 | 第64-66页 |
| 4.3.2 粘毛黄芩SvFNSⅡ-2基因5'侧翼克隆 | 第66-67页 |
| 4.3.3 粘毛黄芩SvFNS Ⅱ-2基因cDNA完全编码序列克隆 | 第67页 |
| 4.3.4 粘毛黄芩SvFNSⅡ-2基因生物信息学分析 | 第67-68页 |
| 4.4 结果与分析 | 第68-85页 |
| 4.4.1 粘毛黄芩SvFNS Ⅱ-2基因3'RACE克隆结果 | 第68-70页 |
| 4.4.2 粘毛黄芩SvFNS Ⅱ-2基因5'同源克隆结果 | 第70-72页 |
| 4.4.3 粘毛黄芩SvFNS Ⅱ-2基因cDNA完全编码序列克隆结果 | 第72-75页 |
| 4.4.4 粘毛黄芩SvFNS Ⅱ-2基因生物信息学分析 | 第75-85页 |
| 4.5 讨论 | 第85-87页 |
| 结论 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-101页 |
| 致谢 | 第101-103页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第103页 |
