| 摘要 | 第3-4页 |
| abstract | 第4页 |
| 第1章 引言 | 第10-18页 |
| 1.1 传统的细胞表面分子荧光成像技术及DNA荧光探针 | 第10-12页 |
| 1.2 实验室前期已成功构建的用于细胞表面分子荧光成像的双链DNA荧光探针 | 第12-15页 |
| 1.3 前期构建的双链DNA荧光探针存在的缺陷及解决方案 | 第15页 |
| 1.4 传统的蛋白定量方法 | 第15-17页 |
| 1.5 双链DNA探针用于细胞表面分子数量定量的基本原理 | 第17-18页 |
| 第2章 DNA的制备及其鉴定 | 第18-34页 |
| 2.1 主要材料及其设备 | 第18-20页 |
| 2.1.1 主要的实验试剂 | 第18-19页 |
| 2.1.2 主要的实验设备 | 第19-20页 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-31页 |
| 2.2.1 HUVECs细胞培养方法 | 第20-22页 |
| 2.2.2 总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.3 RNA的检测 | 第23-24页 |
| 2.2.4 cDNA的制备 | 第24页 |
| 2.2.5 引物的设计 | 第24-25页 |
| 2.2.6 PCR反应体系 | 第25页 |
| 2.2.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第25-26页 |
| 2.2.8 DNA的纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.9 酶切和酶连 | 第27-28页 |
| 2.2.10 转化 | 第28页 |
| 2.2.11 挑单克隆 | 第28页 |
| 2.2.12 菌液PCR | 第28-29页 |
| 2.2.13 大肠杆菌的培养及保存 | 第29页 |
| 2.2.14 质粒的提取 | 第29-30页 |
| 2.2.15 细胞转染 | 第30页 |
| 2.2.16 免疫荧光 | 第30-31页 |
| 2.3 实验结果 | 第31-33页 |
| 2.3.1 DNA的制备 | 第31页 |
| 2.3.2 细胞转染 | 第31-33页 |
| 2.4 结论 | 第33-34页 |
| 第3章 DNA探针的制备及其在荧光染色上的初步研究 | 第34-63页 |
| 3.1 主要材料及其设备 | 第34-36页 |
| 3.1.1 主要的实验试剂 | 第34页 |
| 3.1.2 主要的实验设备 | 第34-35页 |
| 3.1.3 主要试剂的配制 | 第35-36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-49页 |
| 3.2.1 HepG-2细胞培养 | 第36-37页 |
| 3.2.2 制备Biotin-DNA | 第37-38页 |
| 3.2.3 利用琼脂糖凝胶电泳检测Biotin基团 | 第38页 |
| 3.2.4 利用激光共聚焦显微镜测硅珠的尺寸 | 第38-39页 |
| 3.2.5 利用环境扫描电镜测硅珠的尺寸 | 第39页 |
| 3.2.6 用透射电镜检测硅珠大小 | 第39-40页 |
| 3.2.7 利用量子点在激光共聚焦镜下检测硅珠上的亲和素 | 第40页 |
| 3.2.8 用激光共聚焦成像检测Biotin-DNA与硅珠的连接 | 第40-41页 |
| 3.2.9 制备Biotin-DNA-ROX荧光探针 | 第41页 |
| 3.2.10 利用硅珠对DNA荧光探针的检测 | 第41-42页 |
| 3.2.11 利用HepG-2细胞对DNA荧光探针的检测 | 第42-43页 |
| 3.2.12 利用LO-2细胞对DNA荧光探针的检测 | 第43-44页 |
| 3.2.13 利用HUVEC细胞对DNA荧光探针的检测 | 第44-45页 |
| 3.2.14 制备不同荧光强度Biotin-DNA-ROX荧光探针 | 第45页 |
| 3.2.15 不同荧光强度的DNA荧光探针在硅珠上的应用 | 第45-46页 |
| 3.2.16 不同荧光强度的DNA荧光探针在HepG-2上的应用 | 第46页 |
| 3.2.17 不同荧光强度的DNA荧光探针在LO-2上的应用 | 第46-47页 |
| 3.2.18 DNA与抗体偶联 | 第47-48页 |
| 3.2.19 DNA-抗体在HepG-2细胞的染色 | 第48-49页 |
| 3.2.20 DNA-抗体在LO-2细胞的染色 | 第49页 |
| 3.3 实验结果 | 第49-62页 |
| 3.3.1 琼脂糖凝胶电泳检测DNA探针的Biotin基团 | 第49-50页 |
| 3.3.2 通过激光共聚焦测量硅珠的尺寸 | 第50-51页 |
| 3.3.3 通过扫描电镜测量硅珠的大小 | 第51页 |
| 3.3.4 通过透射电镜测量硅珠的大小 | 第51-52页 |
| 3.3.5 利用量子点在共聚焦显微镜下检测硅珠上的亲和素 | 第52页 |
| 3.3.6 用激光共聚焦成像检测Biotin-DNA与硅珠的连接 | 第52-53页 |
| 3.3.7 利用硅珠对DNA荧光探针的检测 | 第53-54页 |
| 3.3.8 利用HepG-2细胞对DNA荧光探针的检测 | 第54-55页 |
| 3.3.9 利用LO-2细胞对DNA荧光探针的检测 | 第55-56页 |
| 3.3.10 利用HUVEC细胞对DNA荧光探针的检测 | 第56-57页 |
| 3.3.11 不同荧光强度的DNA荧光探针在硅珠上的应用 | 第57-58页 |
| 3.3.12 不同荧光强度的DNA荧光探针在HepG-2细胞上的应用 | 第58-59页 |
| 3.3.13 不同荧光强度的DNA荧光探针在LO-2上的应用 | 第59-60页 |
| 3.3.14 DNA-抗体在HepG-2细胞的染色 | 第60-61页 |
| 3.3.15 DNA-抗体在LO-2细胞的染色 | 第61-62页 |
| 3.4 总结 | 第62-63页 |
| 第4章 DNA探针对硅珠和血细胞表面分子的定量分析 | 第63-76页 |
| 4.1 主要材料及其设备 | 第63-65页 |
| 4.1.1 主要的实验设备 | 第63页 |
| 4.1.2 主要的实验试剂 | 第63-64页 |
| 4.1.3 主要试剂配制 | 第64-65页 |
| 4.2 实验方法 | 第65-67页 |
| 4.2.1 硅珠对PCR的干扰性检验 | 第65-66页 |
| 4.2.2 DNA探针在硅珠上的定量分析 | 第66-67页 |
| 4.2.3 DNA探针在人红细胞上的定量分析 | 第67页 |
| 4.3 实验结果 | 第67-75页 |
| 4.3.1 硅珠对PCR的干扰性检验 | 第67-68页 |
| 4.3.2 DNA探针在硅珠上的定量分析 | 第68-71页 |
| 4.3.3 DNA探针在血细胞上的定量分析 | 第71-75页 |
| 4.4 总结 | 第75-76页 |
| 第5章 结论与展望 | 第76-78页 |
| 5.1 结论 | 第76-77页 |
| 5.2 展望 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-82页 |
