| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 一 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 紫花苜蓿研究进展 | 第10-11页 |
| 1.2 植物对非生物逆境胁迫应答的研究 | 第11-14页 |
| 1.2.1 非生物胁迫对植物生理活动的影响 | 第11-12页 |
| 1.2.2 植物响应非生物胁迫的生理调节机制 | 第12-14页 |
| 1.2.3 植物响应非生物胁迫的分子应答调节机制 | 第14页 |
| 1.3 SKIP基因的研究概况 | 第14-17页 |
| 1.3.1 SKIP蛋白的结构特点 | 第15页 |
| 1.3.2 SKIP蛋白的功能 | 第15-16页 |
| 1.3.3 SKIP蛋白在植物中的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4 Trans-ActingsiRNA沉默基因机制简介 | 第17-18页 |
| 1.5 本研究的意义与目的 | 第18-19页 |
| 二 材料与方法 | 第19-32页 |
| 2.1 材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 植物培养基 | 第19页 |
| 2.1.3 菌种和质粒 | 第19页 |
| 2.1.4 实验试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.5 引物的设计 | 第20页 |
| 2.2 方法 | 第20-32页 |
| 2.2.1 紫花苜蓿幼苗的培育和处理 | 第20-21页 |
| 2.2.2 紫花苜蓿总RNA提取 | 第21页 |
| 2.2.3 紫花苜蓿基因组DNA的提取 | 第21-22页 |
| 2.2.4 紫花苜蓿SKIP同源基因cDNA的克隆 | 第22-26页 |
| 2.2.5 紫花苜蓿MsSKIP基因表达特性分析 | 第26页 |
| 2.2.6 紫花苜蓿SKIP基因编码蛋白的生物信息学分析 | 第26-27页 |
| 2.2.7 表达载体的构建 | 第27-30页 |
| 2.2.8 发根农杆菌介导的毛根转化截形苜蓿根组织 | 第30-31页 |
| 2.2.9 SKIP基因对胁迫相关基因表达量的影响 | 第31-32页 |
| 三 结果与分析 | 第32-55页 |
| 3.1 提取紫花苜蓿总RNA | 第32-33页 |
| 3.2 紫花苜蓿基因组DNA的提取 | 第33页 |
| 3.3 紫花苜蓿SKIP同源基因的克隆 | 第33-36页 |
| 3.4 紫花苜蓿基因组中MsSKIP基因的分析 | 第36-37页 |
| 3.5 MsSKIP基因表达特性分析 | 第37-38页 |
| 3.6 紫花苜蓿MsSKIP基因的生物信息学分析 | 第38-45页 |
| 3.6.1 MsSKIP基因片段同源性分析 | 第38-39页 |
| 3.6.2 MsSKIP基因编码蛋白的理化性质分析 | 第39-40页 |
| 3.6.3 MsSKIP蛋白跨膜结构预测 | 第40页 |
| 3.6.4 MsSKIP蛋白亲疏水性预测 | 第40-41页 |
| 3.6.5 MsSKIP信号肽预测 | 第41-42页 |
| 3.6.6 MsSKIP蛋白保守结构域分析 | 第42页 |
| 3.6.7 MsSKIP蛋白三级结构预测 | 第42-43页 |
| 3.6.8 MsSKIP蛋白亚细胞定位预测 | 第43-44页 |
| 3.6.9 MsSKIP磷酸化位点分析 | 第44页 |
| 3.6.10 MsSKIP构建系统进化树分析 | 第44-45页 |
| 3.7 表达载体构建 | 第45-50页 |
| 3.7.1 入门载体的构建 | 第47-48页 |
| 3.7.2 表达载体的构建 | 第48-50页 |
| 3.8 紫花苜蓿MsSKIP基因功能分析 | 第50-54页 |
| 3.9 SKIP基因对胁迫相关基因MtDREB1c表达量的影响 | 第54-55页 |
| 四 结论与讨论 | 第55-58页 |
| 4.1 结论 | 第55-56页 |
| 4.2 讨论 | 第56-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| 附录 | 第62-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
