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基于蛋白质组学的高抗铜微紫青霉菌铜抗性机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 前言第11-39页
    1.1 微生物重金属研究概述第13-20页
        1.1.1 微生物对重金属的抗性机制假说第13-15页
        1.1.2 重金属铜在生命活动中的作用第15页
        1.1.3 酿酒酵母的铜抗性研究第15-18页
        1.1.4 丝状真菌的铜抗性研究第18-20页
            1.1.4.1 活性氧第18页
            1.1.4.2 抗氧化酶类及其同工酶第18页
            1.1.4.3 超氧化物歧化酶(SOD)第18-19页
            1.1.4.4 过氧化物酶(POD)第19-20页
    1.2 蛋白质组学第20-26页
        1.2.1 蛋白质组学研究的分类第21-22页
        1.2.2 蛋白质组学的主要研究策略第22-24页
        1.2.3 iTRAQ技术简介第24-26页
    1.3 真菌的蛋白质组学研究进展第26-27页
    1.4 代谢组学研究概述第27-35页
        1.4.1 代谢组学的分析方法第29页
        1.4.2 样品的制备第29-30页
        1.4.3 代谢组学研究用到的技术第30-32页
        1.4.4 数据的分析和解释第32-33页
        1.4.5 微生物领域的代谢组学第33-35页
        1.4.6 代谢组学与微生物重金属抗性机制第35页
    1.5 金属组学第35-37页
    1.6 本研究的工作基础,内容和目的意义第37-39页
第二章 不同浓度铜胁迫下GXCR蛋白质组差异分析第39-51页
    2.1 材料与方法第39-46页
        2.1.1 真菌的培养第39-40页
            2.1.1.1 微紫青霉菌GXCR孢子悬液制备第39页
            2.1.1.2 菌丝体的培养第39-40页
            2.1.1.3 菌丝体的收集第40页
        2.1.2 真菌总蛋白的提取第40页
        2.1.3 蛋白质的消化第40-41页
        2.1.4 肽段的标记第41页
        2.1.5 强阳离子交换(SCX)高效液相色谱(HPLC)分离第41-42页
        2.1.6 肽段的纯化第42-43页
        2.1.7 质谱检测第43-44页
        2.1.8 定性和定量蛋白质分析第44-45页
        2.1.9 功能注释和蛋白质路径分类第45-46页
    2.2 实验结果第46-51页
        2.2.1 蛋白质定性分析结果第49-50页
        2.2.2 蛋白质定量分析结果第50-51页
第三章 差异表达蛋白第51-63页
    3.1 高丰度的蛋白质第51-52页
    3.2 高丰度的差异表达蛋白(DP)第52-54页
    3.3 目标的差异表达蛋白第54-55页
    3.4 将DPs映射到代谢途径的结果第55-59页
    3.5 糖酵解和糖异生途径第59-60页
    3.6 三羧酸循环(TCA)途径第60-61页
    3.7 脂肪酸合成和代谢途径第61-62页
    3.8 氧化磷酸化(OP)途径第62页
    3.9 信号传导通路第62-63页
第四章 铜胁迫下的GXCR代谢产物分析第63-70页
    4.1 材料与方法第63-66页
        4.1.1 真菌的培养第63-64页
            4.1.1.1 真菌孢子悬液的制备第63页
            4.1.1.2 菌丝体的培养第63-64页
            4.1.1.3 菌丝体的收集第64页
        4.1.2 极性代谢物的提取第64页
        4.1.3 提取物的衍生化第64-65页
        4.1.4 气相色谱和质谱联用检测第65页
            4.1.4.1 色谱参数第65页
            4.1.4.2 质谱参数第65页
        4.1.5 代谢物鉴定第65页
        4.1.6 数据分析第65-66页
    4.2 实验结果第66-70页
        4.2.1 代谢物的鉴定第66页
        4.2.2 微紫青霉菌株GXCR铜胁迫下的代谢谱第66-70页
第五章 结果分析与讨论第70-79页
    5.1 铜胁迫下GXCR的差异蛋白第70-72页
    5.2 铜胁迫下GXCR的代谢产物第72-74页
    5.3 GXCR抗铜机制模型第74-77页
    5.4 总结第77-79页
参考文献第79-93页
附录第93-163页
致谢第163-164页
攻读博士学位期间取得的科研成果第164页

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