摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
英文缩写对照表 | 第11-12页 |
前言 | 第12-15页 |
第一部分 MRTF-A、CAMKⅡ在 AΒ25-35诱导的 AD 大鼠脑组织中的表达及相关性研究 | 第15-25页 |
1 材料 | 第15-17页 |
1.1 实验动物 | 第15页 |
1.2 仪器 | 第15-16页 |
1.3 大鼠 AD 模型构建所需试剂 | 第16页 |
1.4 免疫组化及激光共聚焦所需试剂 | 第16-17页 |
2 方法 | 第17-20页 |
2.1 动物模型的构建 | 第17-18页 |
2.2 行为学检测 | 第18页 |
2.3 免疫组化检测神经丝 | 第18-19页 |
2.4 免疫荧光检测 MRTF-A 表达 | 第19页 |
2.5 激光共聚焦检测 CaMKⅡα表达 | 第19页 |
2.6 统计学方法 | 第19-20页 |
3 结果 | 第20-23页 |
3.1 水迷宫行为学结果 | 第20页 |
3.2 免疫组化检测神经结构的完整性 | 第20-21页 |
3.3 免疫荧光或激光共聚焦检测 MRTF-A 及 CaMKⅡ表达 | 第21-23页 |
4 讨论 | 第23-25页 |
第二部分 MRTF-A 对 AΒ25-35诱导皮层神经元突触损伤的作用及机制研究 | 第25-51页 |
1 材料和方法 | 第25-36页 |
1.1 实验动物 | 第25页 |
1.2 处理细胞所用试剂 | 第25-26页 |
1.3 主要实验仪器 | 第26-27页 |
1.4 原代神经细胞培养相关试剂 | 第27-28页 |
1.5 质粒的转化、扩增、提取和转染所需试剂 | 第28-30页 |
1.6 激光共聚焦所用试剂及溶液配制 | 第30-31页 |
1.7 Western blot 所需试剂 | 第31-33页 |
1.8 RT-PCR 法所需试剂及溶液配制 | 第33-35页 |
1.9 Luc 报告基因质粒构建及所用试剂 | 第35-36页 |
2 方法 | 第36-43页 |
2.1 感受态细胞制备,转化 | 第36-37页 |
2.2 质粒 DNA 的大量提取 | 第37-38页 |
2.3 原代神经细胞培养 | 第38-39页 |
2.4 细胞处理 | 第39页 |
2.5 免疫荧光检测神经丝蛋白 | 第39-40页 |
2.6 Western blot 检测 Arc 蛋白表达 | 第40-41页 |
2.7 RT-PCR 检测 Arc mRNA 表达 | 第41-43页 |
2.8 报告基因荧光素酶活性分析 | 第43页 |
3 结果 | 第43-48页 |
3.1 激光共聚焦检测神经丝蛋白 | 第43-45页 |
3.2 Western blot 及 RT-PCR 检测 Arc 蛋白及 mRNA 水平 | 第45-46页 |
3.3 MRTF-A 上调 Arc 表达与调节 Arc 基因启动子上的 CArG box 有关 | 第46-47页 |
3.4 MRTF-A 上调 Arc 表达与 CaMKⅡ信号通路有关 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
综述 | 第57-63页 |
参考文献 | 第60-63页 |
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63页 |