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氯化镧暴露对大鼠血脑屏障细胞旁通透性的影响及分子机制研究

摘要第4-7页
Abstract第7-10页
英文缩略语第11-15页
第一部分 氯化镧对大鼠血脑屏障通透性和连接蛋白表达的影响第15-40页
    1 前言第15-18页
    2 材料和方法第18-25页
        2.1 主要试剂和仪器第18-20页
            2.1.1 主要试剂第18-19页
            2.1.2 主要仪器第19-20页
        2.2 实验动物及分组第20页
        2.3 实验方法第20-25页
            2.3.1 Evansblue渗透实验测定血脑屏障通透性第20-21页
            2.3.2 透射电镜观察血脑屏障超微结构第21页
            2.3.3 免疫荧光组织化学法检测血脑屏障紧密和粘附连接蛋白定位与表达第21页
            2.3.4 Westernblot法检测血脑屏障紧密和粘附连接蛋白表达第21-22页
            2.3.5 Real-TimePCR法检测血脑屏障紧密和粘附连接蛋白mRNA表达第22-24页
            2.3.6 统计分析第24-25页
    3 结果第25-37页
        3.1 氯化镧暴露对仔鼠体重和脑重的影响第25页
        3.2 氯化镧暴露对仔鼠血脑屏障通透性的影响第25页
        3.3 氯化镧暴露对仔鼠血脑屏障超微结构的影响第25-26页
        3.4 氯化镧暴露对仔鼠血脑屏障连接蛋白定位与表达的影响第26-31页
        3.5 氯化镧暴露对仔鼠血脑屏障连接蛋白mRNA与蛋白表达的影响第31-37页
            3.5.1 仔鼠大脑皮质和海马claudin-5mRNA与蛋白表达第31-32页
            3.5.2 仔鼠大脑皮质和海马occludinmRNA与蛋白表达第32页
            3.5.3 仔鼠大脑皮质和海马ZO-1mRNA与蛋白表达第32页
            3.5.4 仔鼠大脑皮质和海马VE-cadherinmRNA与蛋白表达第32-37页
    4 讨论第37-39页
    结论第39-40页
第二部分 氯化镧对大鼠脑基质金属蛋白酶活性及表达的影响第40-56页
    5 前言第40-43页
    6 材料和方法第43-47页
        6.1 主要试剂和仪器第43-44页
            6.1.1 主要试剂第43-44页
            6.1.2 主要仪器第44页
        6.2 实验方法第44-47页
            6.2.1 冰冻切片原位明胶酶谱法检测脑MMP-2/-9活性第44-45页
            6.2.2 Westernblot法检测脑MMP-2/-9蛋白表达第45页
            6.2.3 Real-TimePCR法检测脑MMP-2/-9和TIMP-2/-9mRNA表达第45-46页
            6.2.4 统计分析第46-47页
    7 结果第47-53页
        7.1 氯化镧暴露对仔鼠脑MMP-2/-9活性的影响第47页
        7.2 氯化镧暴露对仔鼠脑MMP-2mRNA转录与蛋白表达的影响第47页
        7.3 氯化镧暴露对仔鼠脑MMP-9mRNA转录与蛋白表达的影响第47-48页
        7.4 氯化镧暴露对仔鼠脑TIMP-2mRNA转录水平的影响第48页
        7.5 氯化镧暴露对仔鼠脑TIMP-1mRNA转录水平的影响第48-53页
    8 讨论第53-55页
    结论第55-56页
第三部分 氯化镧对大鼠脑微血管RhoA/ROCK信号通路的活化作用第56-70页
    9 前言第56-58页
    10 材料和方法第58-62页
        10.1 主要试剂和仪器第58-59页
            10.1.1 主要试剂第58页
            10.1.2 主要仪器第58-59页
        10.2 实验方法第59-62页
            10.2.1 大鼠脑微血管提取第59-60页
            10.2.2 Pull-down法检测脑微血管RhoA活性第60页
            10.2.3 Westernblot法检测脑微血管ROCK1/2、MLCK和MLC2蛋白表达水平第60-61页
            10.2.4 Westernblot法检测脑微血管p-MYPT1和p-MLC2蛋白表达水平第61页
            10.2.5 统计分析第61-62页
    11 结果第62-67页
        11.1 大鼠脑微血管提取第62页
        11.2 氯化镧暴露对仔鼠脑微血管RhoA活性的影响第62页
        11.3 氯化镧暴露对仔鼠脑微血管ROCK1/2蛋白表达水平的影响第62-63页
        11.4 氯化镧暴露对仔鼠脑微血管MYPT1磷酸化水平的影响第63页
        11.5 氯化镧暴露对仔鼠脑微血管MLC2磷酸化水平的影响第63页
        11.6 氯化镧暴露对仔鼠脑微血管MLCK蛋白表达水平的影响第63-67页
    12 讨论第67-69页
    结论第69-70页
本研究创新性的自我评价第70-71页
参考文献第71-81页
综述第81-110页
    参考文献第98-110页
攻读学位期间取得的研究成果第110-111页
致谢第111-112页
个人简历第112页

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