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小麦生理型雄性不育DNA甲基化调控育性机理研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 文献综述第13-45页
    1.1 小麦杂种优势利用的进展第13-14页
    1.2 目前小麦杂种优势利用的几种主要途径第14-23页
        1.2.1 基于核质互作型小麦雄性不育的“三系法”第14-17页
        1.2.2 小麦光温敏雄性不育系统第17-20页
        1.2.3 化杀剂技术诱导小麦雄性不育系统第20-23页
    1.3 小麦化杀剂诱导的生理型雄性不育的机理第23-30页
        1.3.1 显微结构研究第23-24页
        1.3.2 生理生化代谢研究第24-26页
        1.3.3 化学杀雄不育相关基因的分析第26-30页
    1.4 DNA 甲基化在植物生长发育中的作用第30-42页
        1.4.1 甲基化酶种类和功能第31-32页
        1.4.2 DNA 甲基化方式第32-34页
        1.4.3 植物 DNA 甲基化的生物学功能第34-41页
        1.4.4 植物 DNA 甲基化检测方法第41-42页
    1.5 本试验选题目的和意义第42-44页
    试验主要技术路线第44-45页
第二章 小麦生理型雄性不育 DNA 甲基化图谱分析第45-61页
    2.1 材料和方法第45-50页
        2.1.1 植物材料第45-46页
        2.1.2 试验仪器和试剂第46页
        2.1.3 小麦花药 DNA 提取和纯化第46-47页
        2.1.4 甲基化敏感扩增多态性试验第47页
        2.1.5 选增性扩增产物的 MSAP 电泳分析第47-48页
        2.1.6 MSAP 差异表达条带回收、二次扩增和纯化第48-49页
        2.1.7 目标基因克隆、测序和同源性分析第49-50页
    2.2 结果与分析第50-58页
        2.2.1 化学杂交剂诱导的雄性不育效果第50-51页
        2.2.2 化杀剂 SQ-1 对小麦花药基因组 DNA 甲基化程度的影响第51-54页
        2.2.3 化杀剂 SQ-1 对小麦花药 DNA 甲基化模式的影响第54-56页
        2.2.4 SQ-1 诱导小麦花药 MSAP 多态性片段的序列分析第56-58页
    2.3 讨论第58-61页
        2.3.1 化杀剂 SQ-1 对小麦花药 DNA 甲基化的影响第58页
        2.3.2 化杀剂 SQ-1 影响的甲基化差异基因第58-61页
第三章 生理型雄性不育 DNA 甲基化对活性氧代谢的调节第61-77页
    3.1 材料与方法第62-68页
        3.1.1 供试材料和处理第62页
        3.1.2 试验仪器和试剂第62页
        3.1.3 活性氧含量测定和组织染色第62-63页
        3.1.4 丙二醛(MDA)含量的测定第63页
        3.1.5 抗氧化酶活力测定第63-64页
        3.1.6 小麦花药总 DNA 的提取和纯化第64页
        3.1.7 小麦花药总 RNA 的提取、纯化和反转录第64-65页
        3.1.8 小麦活性氧相关基因的表达分析第65-66页
        3.1.9 小麦花药 DNA 甲基化处理第66-67页
        3.1.10 目的序列的确定及引物设计第67页
        3.1.11 目的序列甲基化 PCR 扩增第67页
        3.1.12 目的序列连接转化和测序第67-68页
        3.1.13 活性氧合成抑制剂对小麦生理型不育系育性调控第68页
    3.2 结果与分析第68-75页
        3.2.1 化杀剂 SQ-1 对小麦花药活性氧含量的影响第68-69页
        3.2.2 化杀剂 SQ-1 对小麦花药抗氧化酶活性的影响第69-71页
        3.2.3 化杀剂 SQ-1 对小麦花药活性氧代谢基因表达水平的影响第71-73页
        3.2.4 化杀剂 SQ-1 对小麦花药 NOX 基因核心启动子区甲基化分析第73-74页
        3.2.5 活性氧合成抑制剂对小麦生理型不育系育性调控第74-75页
    3.3 讨论第75-77页
        3.3.1 植物细胞中的活性氧平衡第75页
        3.3.2 植物细胞中的活性氧与雄性不育的关系第75-76页
        3.3.3 生理型不育活性氧的 DNA 甲基化调控第76页
        3.3.4 植物细胞中活性氧的多重功能第76-77页
第四章 小麦生理型雄性不育脂质代谢第77-96页
    4.1 材料与方法第77-82页
        4.1.1 供试材料和处理第77页
        4.1.2 试验仪器和试剂第77-78页
        4.1.3 不同处理花粉粒的细胞学和扫描电镜观察第78页
        4.1.4 不同时期花药组织切片和荧光显微镜观察第78-80页
        4.1.5 花药 RNA 提取、纯化和 cDNA 反转录以及 DNA 提取第80页
        4.1.6 花药不同发育时期 DNA ladder 试验第80页
        4.1.7 花药脂肪酸及其衍生物测定第80-81页
        4.1.8 花药脂质代谢 TaECR 基因克隆和序列分析第81页
        4.1.9 花药脂质代谢相关基因表达分析第81-82页
    4.2 结果分析第82-93页
        4.2.1 SQ-1 对花药发育的干扰作用第82-85页
        4.2.2 SQ-1 对花药脂肪族化合物组成的调节第85-87页
        4.2.3 小麦 TaECR 基因的序列分析第87-90页
        4.2.4 SQ-1 对花药相关基因表达调控第90-93页
    4.3 讨论第93-96页
        4.3.1 活性氧代谢与细胞凋亡第93-94页
        4.3.2 化杀剂 SQ-1 处理对花药脂肪族代谢的影响第94-96页
第五章 主要结论及创新点第96-98页
    5.1 主要结论第96页
    5.2 主要创新点第96-98页
参考文献第98-117页
中英文缩略词对照表第117-118页
致谢第118-119页
作者简介第119页

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