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Hedgehog信号通路调控牛肌卫星细胞增殖和分化的研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
第一章 文献综述第14-35页
    1.1. HEDGEHOG(HH)信号通路第14-26页
        1.1.1. 概述第14-15页
        1.1.2. Hh 信号通路的传导途径(图 1‐1)第15-18页
        1.1.3. Hh 信号通路的主要功能第18-20页
        1.1.4. Hh 信号通路与其它信号或因子的关系第20-25页
        1.1.5. Hh 信号通路的调节物第25-26页
    1.2. 肌肉卫星细胞第26-32页
        1.2.1. 肌肉的发育规律第26-27页
        1.2.2. 肌肉卫星细胞的地位和作用第27-29页
        1.2.3. 肌肉卫星细胞相关的信号因子和基因调节第29-31页
        1.2.4. 肌肉卫星细胞与肉牛生产第31-32页
    1.3. HH 信号通路对细胞增殖及分化的调控研究第32-34页
        1.3.1. Hh 信号通路与细胞增殖第32-33页
        1.3.2. Hh 信号通路与中胚层来源的细胞的分化第33-34页
    1.4. 本研究的目的和意义第34-35页
第二章 HH 信号通路成员在牛不同组织的特异性表达分析第35-41页
    2.1. 材料与方法第35-36页
        2.1.1. 样品采集第35页
        2.1.2. 组织中总 RNA 提取第35页
        2.1.3. 反转录 PCR第35页
        2.1.4. 荧光实时定量 PCR第35页
        2.1.5. 数据统计及分析第35-36页
    2.2. 结果分析第36-38页
        2.2.1. Ptch1 基因在牛各组织中的表达情况第36页
        2.2.2. Smo 基因在牛各组织中的表达情况第36-37页
        2.2.3. Gli1 基因在牛各组织中的表达情况第37-38页
        2.2.4. Gli2 基因在牛各组织中的表达情况第38页
    2.3. 讨论第38-40页
    2.4. 小结第40-41页
第三章 牛肌肉卫星细胞的分离培养及鉴定第41-49页
    3.1. 材料与方法第41-42页
        3.1.1. 牛 MuSC 的原代分离及培养第41页
        3.1.2. 细胞免疫荧光鉴定第41-42页
        3.1.3. 细胞中总 RNA 的提取第42页
        3.1.4. 反转录 PCR第42页
        3.1.5. 荧光实时定量 PCR第42页
        3.1.6. 数据统计及分析第42页
    3.2. 结果分析第42-46页
        3.2.1. 根据贴壁能力分离出不同的细胞类群第42-43页
        3.2.2. 免疫细胞化学鉴定结果第43-44页
        3.2.3. Hh 通路成员在牛肌肉来源的不同细胞类群中的表达情况第44-46页
    3.3. 讨论第46-48页
        3.3.1 肌肉组织原代细胞的分离和鉴定第46-47页
        3.3.2 各细胞类群中 Hh 信号通路成员的表达情况第47-48页
    3.4. 小结第48-49页
第四章 HH 信号通路对牛肌肉卫星细胞增殖的影响第49-55页
    4.1. 材料与方法第49-50页
        4.1.1. 生长曲线的绘制第49页
        4.1.2. 细胞周期的检测第49页
        4.1.3. 细胞中总 RNA 的提取第49-50页
        4.1.4. 反转录 PCR第50页
        4.1.5. 荧光实时定量 PCR第50页
        4.1.6. 数据统计及分析第50页
    4.2. 结果分析第50-52页
        4.2.1. Cyclopamine 浓度对生长曲线的影响第50-51页
        4.2.2. 细胞周期的流式检测结果第51页
        4.2.3. 细胞周期蛋白的基因表达情况第51-52页
    4.3. 讨论第52-54页
    4.4. 小结第54-55页
第五章 HH 信号通路对牛肌肉卫星细胞成肌分化的作用研究第55-71页
    5.1. 材料与方法第55页
        5.1.1. 牛 MuSC 的成肌分化第55页
        5.1.2. 细胞中总 RNA 的提取第55页
        5.1.3. 反转录 PCR第55页
        5.1.4. 荧光实时定量 PCR第55页
        5.1.5. 数据统计及分析第55页
    5.2. 结果分析第55-65页
        5.2.1. 不同浓度 cyclopamine 对牛 MuSC 成肌分化的影响第55-60页
        5.2.2. Hh 信号通路激动剂 purmorphamine 牛肌肉卫星细胞成肌分化的影响第60-65页
    5.3. 讨论第65-70页
        5.3.1. 在成肌分化过程中 Hh 信号通路的变化情况第65-66页
        5.3.2. 肌肉细胞成肌分化的发生第66-67页
        5.3.3. 成肌分化过程中相关因子的基因表达第67-70页
    5.4. 小结第70-71页
第六章 HH 信号通路对牛肌肉卫星细胞成脂分化的作用研究第71-86页
    6.1. 材料与方法第71-72页
        6.1.1. 通过过表达诱导牛 MuSC 的成脂分化第71页
        6.1.2. 含胰岛素的诱导液诱导牛 MuSC 的成脂分化第71页
        6.1.3. 细胞中总 RNA 的提取第71页
        6.1.4. 反转录 PCR第71页
        6.1.5. 荧光实时定量 PCR第71页
        6.1.6. 数据统计及分析第71-72页
    6.2. 结果分析第72-82页
        6.2.1. 过表达 C/EBPα诱导牛 MuSC 成脂分化过程中 Hh 信号通路组分的表达情况第72-73页
        6.2.2. 过表达 ADIG 诱导牛 MuSC 成脂分化过程中 Hh 信号通路组分的表达情况第73-76页
        6.2.3. 不同浓度 Cyclopamine 对牛肌肉卫星细胞成脂分化的影响第76-80页
        6.2.4. Hh 信号通路激动剂 Purmorphamine 牛肌肉卫星细胞成脂分化的影响第80-82页
    6.3. 讨论第82-85页
        6.3.1. 牛 MuSC 成脂过程中 Hh 信号通路的变化情况第82-83页
        6.3.2. 成脂过程中相关因子的作用关系第83-84页
        6.3.3. Hh 信号对于牛 MuSC 成脂的影响第84-85页
    6.4. 小结第85-86页
第七章 结论及创新点第86-87页
    (一)结论第86页
    (二)创新点第86-87页
参考文献第87-109页
附录第109-115页
    一、所用到的主要仪器设备第109页
    二、所用到的主要试剂及耗材第109-110页
    三、总 RNA 的提取第110-112页
    四、反转录 PCR第112页
    五、荧光实时定量 PCR第112-115页
缩略词第115-116页
致谢第116-117页
作者简介第117页

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