| 中文摘要 | 第7-8页 |
| 英文摘要 | 第8页 |
| 1 引言 | 第9-20页 |
| 1.1 PRV的发现以及流行 | 第9-11页 |
| 1.2 PR的防控情况 | 第11-12页 |
| 1.3 PR的流行病学 | 第12页 |
| 1.4 PR的病理变化 | 第12-13页 |
| 1.5 PR的临床特征 | 第13-14页 |
| 1.6 PRV的致病机理 | 第14-15页 |
| 1.7 PRV的结构和特征 | 第15-16页 |
| 1.7.1 PRV基因组 | 第15-16页 |
| 1.7.2 PRV病毒的囊膜糖蛋白 | 第16页 |
| 1.8 gE、gI、gC基因的功能 | 第16-19页 |
| 1.8.1 gE基因 | 第16-18页 |
| 1.8.2 gI基因 | 第18页 |
| 1.8.3 gC基因 | 第18-19页 |
| 1.9 本课题的目的及意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-35页 |
| 2.1 病料的采集与处理 | 第20页 |
| 2.2 细胞及引物 | 第20-21页 |
| 2.3 主要试剂 | 第21页 |
| 2.4 培养基及相关试剂的配制 | 第21-23页 |
| 2.5 主要仪器 | 第23页 |
| 2.6 病毒核酸提取及PCR扩增 | 第23-24页 |
| 2.7 细胞的复苏、传代与冻存 | 第24-25页 |
| 2.7.1 细胞复苏 | 第24-25页 |
| 2.7.2 细胞传代 | 第25页 |
| 2.7.3 细胞冻存 | 第25页 |
| 2.8 扩增病毒 | 第25-26页 |
| 2.9 目的基因的扩增 | 第26页 |
| 2.10 琼脂糖凝胶电泳 | 第26页 |
| 2.11 胶回收、连接、转化 | 第26-28页 |
| 2.12 阳性克隆的鉴定 | 第28-29页 |
| 2.13 真核表达质粒pEGFP-C1扩增 | 第29页 |
| 2.14 表达载体的构建 | 第29-31页 |
| 2.14.1 设计引物 | 第29-30页 |
| 2.14.2 质粒提取 | 第30页 |
| 2.14.3 酶切 | 第30-31页 |
| 2.15 无内毒素提取质粒、转染细胞 | 第31-33页 |
| 2.16 WesternBlot | 第33-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-42页 |
| 3.1 阳性病料检测结果 | 第35页 |
| 3.2 病毒分离与BHK-21细胞病变结果 | 第35-36页 |
| 3.3 主要囊膜糖蛋白gE,gI和gC基因的扩增 | 第36页 |
| 3.4 真核重组表达质粒酶切鉴定结果 | 第36页 |
| 3.5 主要囊膜糖蛋白基因序列分析结果 | 第36-41页 |
| 3.5.1 gE基因序列分析结果 | 第36-38页 |
| 3.5.2 gI基因序列分析结果 | 第38-40页 |
| 3.5.3 gC基因序列分析结果 | 第40-41页 |
| 3.6 WesternBlot检测gE,gI蛋白的表达 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-45页 |
| 5 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 致谢 | 第53页 |