| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-33页 |
| 1.1 卵菌 | 第11-14页 |
| 1.2 分子植物免疫系统 | 第14-21页 |
| 1.2.1 分子植物免疫系统概述 | 第14-15页 |
| 1.2.2 PAMPs和PRRs | 第15-17页 |
| 1.2.3 PTI防卫反应 | 第17-19页 |
| 1.2.4 效应蛋白参与的ETS和ETI(以细菌为例) | 第19-21页 |
| 1.3 卵菌效应蛋白研究进展 | 第21-25页 |
| 1.3.1 卵菌效应蛋白的克隆 | 第21-22页 |
| 1.3.2 卵菌效应蛋白的转运和定位 | 第22-23页 |
| 1.3.3 卵菌效应蛋白调控植物免疫的研究进展 | 第23-25页 |
| 1.4 内质网应激与植物免疫调节 | 第25-28页 |
| 1.4.1 植物中的未折叠蛋白应答反应(UPR)通路 | 第25-27页 |
| 1.4.2 内质网应激与植物免疫之间的关系 | 第27-28页 |
| 1.5 植物中FKBP蛋白研究概况 | 第28-31页 |
| 1.5.1 脯氨酰构象与肽链折叠 | 第29-30页 |
| 1.5.2 植物中FKBP基因相关研究情况 | 第30-31页 |
| 1.6 本研究的目的和意义 | 第31-33页 |
| 第二章 利用IP-LC/MS方法鉴定PiAvr3aKI和PiAvrblb1在植物中的靶标 | 第33-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第33-34页 |
| 2.1.1 菌株、质粒、试剂 | 第33-34页 |
| 2.1.2 植物材料 | 第34页 |
| 2.2 实验方法 | 第34-41页 |
| 2.2.1 培养基和溶液配方 | 第34-35页 |
| 2.2.2 大肠杆菌DH10B感受态细胞制备流程 | 第35页 |
| 2.2.3 植物表达载体构建 | 第35-36页 |
| 2.2.4 农杆菌GV3101感受态细胞制备流程 | 第36-37页 |
| 2.2.5 农杆菌电击转化 | 第37页 |
| 2.2.6 拟南芥转化 | 第37页 |
| 2.2.7 拟南芥种植和转化子筛选 | 第37-38页 |
| 2.2.8 烟草瞬时转化(表达)方法 | 第38页 |
| 2.2.9 免疫沉淀(Immunoprecipitation,IP) | 第38-39页 |
| 2.2.10 免疫印迹(WesternBlot) | 第39页 |
| 2.2.11 酵母感受态细胞制备 | 第39页 |
| 2.2.12 酵母共转化 | 第39-40页 |
| 2.2.13 酵母系统中蛋白互作的检测 | 第40页 |
| 2.2.14 双分子荧光互补技术检测蛋白互作 | 第40-41页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第41-43页 |
| 2.3.1 标签蛋白表达检测 | 第41页 |
| 2.3.2 IP-LC/MS鉴定互作蛋白 | 第41-42页 |
| 2.3.3 候选互作蛋白的鉴定分析 | 第42-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-44页 |
| 第三章 PcAvr3a12可以通过靶向和抑制FKBP15-2来减弱植物免疫 | 第44-83页 |
| 3.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 3.1.1 菌株、质粒 | 第44-45页 |
| 3.1.2 植物材料 | 第45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-53页 |
| 3.2.0 序列比对分析 | 第45页 |
| 3.2.1 辣椒疫霉菌和寄生疫霉菌培养、菌丝收集、游动孢子刺激： | 第45页 |
| 3.2.2 疫霉菌DNA提取 | 第45-46页 |
| 3.2.3 植物基因组或侵染组织DNA提取 | 第46页 |
| 3.2.4 植物或菌丝RNA提取 | 第46页 |
| 3.2.5 反转录cDNA和实时定量 | 第46页 |
| 3.2.6 酵母文库筛选 | 第46-47页 |
| 3.2.7 GUS染色 | 第47-48页 |
| 3.2.8 MBP标签蛋白纯化 | 第48页 |
| 3.2.9 脯氨酰顺反异构酶酶(PPI)活测定 | 第48页 |
| 3.2.10 载体构建 | 第48-53页 |
| 3.3 结果与分析 | 第53-80页 |
| 3.3.1 PcAvr3a12促进拟南芥对辣椒疫霉的感病 | 第53-55页 |
| 3.3.2 PcAvr3a12特异地与一个来自寄主植物的FKBP蛋白互作 | 第55-57页 |
| 3.3.3 FKBP15-2表达模式分析 | 第57-59页 |
| 3.3.4 FKBP15-2介导拟南芥对疫霉菌的抗性 | 第59-62页 |
| 3.3.5 PcAvr3a12与FKBP15-2部分共同定位在植物内质网上 | 第62-64页 |
| 3.3.6 疫霉侵染过程中PcAvr3a12与FKBP15-2在吸器周围共定位 | 第64-66页 |
| 3.3.7 FKBP的脯氨酰顺反异构酶活性对其免疫功能是需要的 | 第66-68页 |
| 3.3.8 PcAvr3a12在体外抑制FKBP15-2的PPIase活性 | 第68-69页 |
| 3.3.9 FKBP15-2可能通过参与内质网应激响应来影响植物免疫 | 第69-72页 |
| 3.3.10 辣椒疫霉菌Avr3a家族效应蛋白成员功能初步分析 | 第72-75页 |
| 3.3.11 辣椒疫霉菌Avr3a家族效应蛋白成员与FKBP15-2互作情况研究 | 第75-77页 |
| 3.3.12 Avr3a家族蛋白与FKBP家族蛋白互作的初步分析 | 第77-80页 |
| 3.4 讨论 | 第80-83页 |
| 第四章 结论与展望 | 第83-85页 |
| 4.1 结论 | 第83-84页 |
| 4.2 创新点 | 第84页 |
| 4.3 展望 | 第84-85页 |
| 参考文献 | 第85-104页 |
| 致谢 | 第104-106页 |
| 作者简介 | 第106页 |
