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小麦超长链脂肪酰辅酶A还原酶基因TaFAR的同源克隆与功能分析

摘要第6-8页
abstract第8-10页
第一章 文献综述第16-34页
    1.1 植物表皮角质的结构及其生物学功能第16-18页
        1.1.1 植物表皮角质的结构第16-17页
        1.1.2 植物表皮蜡质的生物学功能第17-18页
    1.2 植物表皮蜡质的形态第18-19页
    1.3 植物表皮蜡质的合成研究第19-25页
        1.3.1 脂肪酸从头合成过程第20-21页
        1.3.2 超长链脂肪酸(VeryLongChainFattyAcids,VLCFAs)的生物合成第21-22页
        1.3.3 植物表皮蜡质的合成途径第22-24页
        1.3.4 植物表皮蜡质的运输第24-25页
    1.4 植物表皮蜡质相关基因的研究第25-28页
        1.4.1 水稻表皮蜡质相关基因第25-26页
        1.4.2 拟南芥表皮蜡质相关基因第26-28页
        1.4.3 其他植物表皮蜡质相关基因第28页
    1.5 小麦表皮蜡质研究第28-31页
        1.5.1 小麦表皮蜡质成分的研究进展第28-29页
        1.5.2 小麦表皮蜡质的发育研究进展第29-30页
        1.5.3 小麦表皮蜡质合成与调控相关基因的研究进展第30-31页
    1.6 研究目的意义和技术路线第31-34页
        1.6.1 研究目的与意义第31-33页
        1.6.2 研究的技术路线第33-34页
第二章 小麦叶片表皮蜡质分析第34-40页
    2.1 材料第34-35页
        2.1.1 试验材料第34页
        2.1.2 生化试剂第34-35页
    2.2 试验方法第35页
        2.2.1 蜡质提取第35页
        2.2.2 气相色谱分析第35页
        2.2.3 扫描电镜分析第35页
        2.2.4 数据统计与分析第35页
    2.3 结果与分析第35-38页
        2.3.1 不同倍型小麦苗期叶片表皮蜡质成分分析第35-37页
        2.3.2 不同倍型小麦叶片表皮蜡质的扫描电镜分析第37-38页
    2.4 讨论第38-40页
第三章 小麦不同叶位高度叶片表皮蜡质的分析第40-45页
    3.1 材料第40-41页
    3.2 实验方法第41页
        3.2.1 材料的采集第41页
        3.2.2 表皮蜡质提取及气相色谱分析第41页
        3.2.3 数据统计与分析第41页
    3.3 结果与分析第41-43页
        3.3.1 不同叶位叶片表皮蜡质各成分的变化第41-42页
        3.3.2 不同叶位叶片表皮蜡质中各烷醇的变化第42-43页
        3.3.3 不同叶位叶片表皮蜡质中二酮的变化第43页
    3.4 讨论第43-45页
第四章 小麦超长链脂肪酰辅酶A还原酶基因TaFAR的克隆与特征分析第45-62页
    4.1 材料第45-46页
        4.1.1 试验材料第45页
        4.1.2 主要试剂盒及生化试剂第45页
        4.1.3 培养基第45-46页
        4.1.4 仪器设备第46页
    4.2 方法第46-52页
        4.2.1 基因组DNA的提取第46页
        4.2.2 RNA的提取第46-47页
        4.2.3 单链cDNA的合成第47-48页
        4.2.4 小麦TaFAR基因的克隆第48-50页
        4.2.5 小麦TaFAR基因的生物信息学分析第50页
        4.2.6 小麦TaFAR基因的表达分析第50-52页
        4.2.7 TaFAR亚细胞定位分析第52页
        4.2.8 数据分析第52页
    4.3 结果与分析第52-60页
        4.3.1 小麦总RNA的质量检测第52-53页
        4.3.2 小麦TaFAR的克隆第53-54页
        4.3.3 小麦TaFAR的染色体定位分析第54页
        4.3.4 小麦TaFAR蛋白序列多重比对分析第54-55页
        4.3.5 小麦TaFAR氨基酸序列进化分析第55-56页
        4.3.6 小麦TaFAR的原核表达分析第56页
        4.3.7 小麦TaFAR基因在不同器官中的表达分析第56-57页
        4.3.8 小麦TaFAR基因在非生物、生物因素下的表达分析第57-59页
        4.3.9 小麦TaFAR基因的亚细胞定位分析第59-60页
    4.4 讨论第60-62页
第五章 小麦超长链脂肪酰辅酶A还原酶基因TaFAR在酵母中的异源表达第62-69页
    5.1 材料第62-63页
        5.1.1 菌株及载体第62页
        5.1.2 培养基第62页
        5.1.3 实验试剂第62-63页
        5.1.4 实验仪器第63页
    5.2 方法第63-64页
        5.2.1 酵母表达载体的构建第63页
        5.2.2 酿酒酵母INVSc1感受态细胞的制备及转化第63-64页
        5.2.3 酵母诱导表达及其蜡质的抽提第64页
        5.2.4 酵母诱导产物的检测第64页
    5.3 结果与分析第64-67页
        5.3.1 TaFAR6在酵母中的异源表达研究第64-66页
        5.3.2 TaFAR7在酵母中的异源表达研究第66页
        5.3.3 TaFAR8在酵母中的异源表达研究第66-67页
    5.4 讨论第67-69页
第六章 小麦超长链脂肪酰辅酶A还原酶基因TaFAR在番茄中的功能研究第69-82页
    6.1 材料第69-70页
        6.1.1 试验材料第69页
        6.1.2 菌株及载体第69页
        6.1.3 培养基第69-70页
        6.1.4 酶及试剂第70页
    6.2 实验方法第70-73页
        6.2.1 植物过表达载体的构建第70页
        6.2.2 利用农杆菌介导法将TaFAR转入番茄第70-71页
        6.2.3 转基因植株的分子生物学检测第71-72页
        6.2.4 转基因番茄叶片和果实表皮蜡质成分的检测第72-73页
        6.2.5 扫描电镜分析第73页
        6.2.6 数据统计与处理第73页
    6.3 结果与分析第73-80页
        6.3.0 植物过表达载体的构建第73页
        6.3.1 转TaFAR基因番茄的获得第73-74页
        6.3.2 转TaFAR基因番茄的分子生物学鉴定第74-75页
        6.3.3 转TaFAR基因番茄叶片表皮蜡质的测定第75-77页
        6.3.4 转TaFAR基因番茄果实表皮蜡质的测定第77-78页
        6.3.5 转TaFAR基因番茄叶片及果实表皮蜡质晶体结构的观察第78-79页
        6.3.6 转TaFAR基因番茄果实保水性分析第79-80页
    6.4 结论第80-82页
第七章 小麦超长链脂肪酰辅酶A还原酶基因TaFAR在水稻中的功能研究第82-95页
    7.1 材料第82-83页
        7.1.1 试验材料第82页
        7.1.2 菌株及其质粒第82页
        7.1.3 试剂第82页
        7.1.4 试验仪器第82页
        7.1.5 水稻遗传转化用培养基第82-83页
    7.2 试验方法第83-85页
        7.2.1 植物表达载体的构建第83页
        7.2.2 质粒DNA的小量抽提第83页
        7.2.3 农杆菌EHA105感受态细胞的制备及其转化第83页
        7.2.4 水稻的遗传转化第83-84页
        7.2.5 转基因水稻的分子鉴定第84-85页
        7.2.6 转基因水稻叶片表皮蜡质成分的检测第85页
        7.2.7 扫描电镜分析第85页
        7.2.8 转基因水稻的保水性分析第85页
        7.2.9 数据统计与分析第85页
    7.3 结果分析第85-93页
        7.3.1 转化水稻过表达载体的构建第85页
        7.3.2 转TaFAR基因水稻植株的获得第85-86页
        7.3.3 转TaFAR基因水稻植株的分子生物学检测第86-87页
        7.3.4 转TaFAR基因水稻植株的表达与农艺性分析第87-89页
        7.3.5 转TaFAR基因水稻植株叶片表皮蜡质分析第89-90页
        7.3.6 转TaFAR基因水稻植株叶鞘表皮蜡质分析第90-91页
        7.3.7 转TaFAR基因水稻植株的表皮蜡质扫描电镜分析第91-92页
        7.3.8 转TaFARs水稻保水性分析第92-93页
    7.4 结论第93-95页
第八章 全文总结第95-97页
    8.1 全文结论第95-96页
        8.1.1 小麦TaFAR基因的克隆与表达分析第95页
        8.1.2 小麦三个脂肪酰辅酶A还原酶TaFAR的功能验证第95-96页
    8.2 全文创新点第96-97页
        8.2.1 小麦叶片表皮蜡质成分分析第96页
        8.2.2 小麦超长链脂肪酰辅酶A还原酶TaFAR的功能分析第96-97页
参考文献第97-111页
附录第111-112页
致谢第112-113页
作者简介第113页

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